国家自然科学基金(81170817)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：徐建江洪佳旭李纲吴继红莫秀梅更多>>
- 相关机构：复旦大学东华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部卫生公益性行业科研专项上海市自然科学基金更多>>
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- 温度敏感性材料培养的脂肪源性干细胞作为眼表重建种子细胞的可行性研究被引量：2
- 2015年
- 背景 组织工程角膜学的发展为角膜盲的治疗提供了新的选择,但目前暂未发现培养方法简单、可行性好的角膜上皮种子细胞和理想的支架材料.研究表明,脂肪源性干细胞（ADSCs）具有自我更新能力同时也具有类上皮的特质,而温度敏感性材料（TRSs）作为支架进行干细胞培养也为细胞层片技术的进步提供了技术支撑. 目的 研究兔ADSCs在TRSs上的培养特性,并与经典的口腔黏膜上皮细胞（OMECs）特性进行比较,探讨ADSCs作为眼表重建种子细胞的可行性.方法 异丙基丙烯酰胺溶于二丙醇后均匀涂于直径35 mm的聚苯乙烯培养皿表面,利用电子束照射制备TRSs,兔颈背部皮下脂肪组织2～3g经消化培养后获得ADSCs,同时取出兔口腔黏膜组织进行消化培养,获得OMECs.将2种干细胞均接种于TRSs上继续培养,比较2种细胞形态、生长速度、脱附时间和成活细胞的总计数,将ADSCs层片和OMECs层片行组织病理学检查,观察2种细胞的形态特征;采用免疫组织化学法检测2种细胞中干细胞标志物和上皮细胞标志物的表达;应用扫描电子显微镜检查2种细胞层片的表面超微结构.结果 自制TRSs透明性和光滑度与普通培养皿接近,任意观察的5个样品中有4个水接触角＞10°,成功率为80％.TRSs上培养的ADSCs呈长梭形,OMECs呈不规则圆形.ADSCs生长周期在TRSs上为12～ 14 d,脱附时间为（46.0±9.6） min,细胞总计数为（7.9±1.1）×105/片,而TRSs培养的OMECs生长周期为14～16 d,脱附时间为（91.9±10.9） min,细胞计数为（45.8±26.5） ×105/片,2种细胞间层片脱附时间和细胞计数的差异均有统计学意义（P=0.002、0.028）.组织病理学检查显示,TRSs上的ADSCs呈1～3层排列,而OMECs呈4～5层覆层结构.免疫组织化学染色显示,ADSCs和OMECs细胞层片细胞角蛋白12（CK12）及干细胞标志物p63、ATP结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）均呈阳性表达.扫描电子显�
- 韦巧玲徐建江
- 关键词：组织工程角膜脂肪源干细胞口腔黏膜上皮细胞眼表重建
- 丝素蛋白和乳酸-己内酯共聚物纳米纤维支架构建组织工程化角膜上皮的实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的评估兔角膜缘上皮细胞在丝素蛋白(SF)和乳酸-己内酯共聚物(PLCL)复合纳米纤维薄膜上的黏附、增殖和分化情况,探讨SF-PLCL复合纳米纤维薄膜作为组织工程角膜上皮支架材料的可行性。方法利用六氟异丙醇(HFIP)作为溶剂,配制浓度为8%的SF和PLCL共混物(质量比25∶75)的纺丝溶液。通过静电纺丝技术制备纳米纤维膜。将体外培养的第一代兔角膜缘上皮细胞种植于SF-PLCL纳米纤维薄膜上进行复合培养。利用扫描电镜观察SF-PLCL纳米纤维薄膜的表面形态及细胞材料复合物的表面形貌;利用免疫荧光染色分析角膜上皮细胞标记物K3的表达情况;通过细胞活力检测观察细胞在材料上的生长分布规律。结果 SF-PLCL纳米纤维薄膜的平均纤维直径为(715±186)nm,材料具有较好的透明度。扫描电镜显示角膜缘上皮细胞在材料上保持正常上皮细胞的铺路石样形态,黏附生长良好,细胞表面布满微绒毛,细胞间紧密联接;免疫荧光染色表明角膜缘上皮细胞在材料上可分化为成熟的角膜上皮细胞。细胞活力检测证实角膜缘上皮细胞在材料上生长良好,均匀分布,形成多层层化结构。结论角膜上皮细胞与SF-PLCL纳米纤维膜的生物相容性良好,SF-PLCL纳米纤维膜是一种潜在、合适的组织工程角膜上皮支架材料。
- 李纲钱婷婷洪佳旭徐建江吴继红崔呈俊莫秀梅
- 关键词：丝素蛋白静电纺丝角膜上皮
- 圆锥角膜患者角膜上皮厚度变化的相干光断层扫描研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨原发性圆锥角膜患者和健康人角膜上皮厚度的差异及傅里叶OCT相关参数的诊断效能.方法 横断面研究.收集2013年6月1日至7月31日期间来上海复旦大学附属眼耳鼻喉科医院就诊的圆锥角膜患者25例（34只眼）和同期健康人志愿者41例（41眼）.利用升级的傅里叶OCT观察所有对象的角膜上皮厚度和角膜厚度.角膜上皮厚度参数取傅里叶OCT测量参数中的Superior值、Inferior值、I-S值、Min值、Max值、Min-Max值和Central值;角膜厚度参数取傅里叶OCT测量参数中的IT-SN值、I-S值、Min值、Min-Median值、Min-Max值和Central值.数据比较采用x2检验、成组t检验和Wilcoxon秩和检验.测量参数的诊断价值判断采用受试者工作特征（ROC）曲线和Youden指数法.结果 角膜上皮厚度参数中,圆锥角膜组和对照组的Inferior值为（50.5±4.8）和（54.8 ±2.5）μm; I-S值为（-2.7±7.5）和（0.9±1.3）μm;Min值为（35.9±10.7）和（51.4±2.6）μm;Min-Max值为（-33.6±18.9）和（-5.7±1.8）μm; Central值为（50.1±6.8）和（54.7±2.2）μm.其中Min-Max和Min诊断效能较高[曲线下面积（AUC） =0.967,0.958;Youden指数为0.882,0.829];Inferior、I-S和Central诊断效能中等（AUC=0.794,0.728,0.715;Youden指数为0.461,0.564,0.565）.角膜厚度参数中,圆锥角膜组和对照组的IT-SN值为（-82.8 ±65.2）和（-23.7±18.5） μm;I-S值为（-72.5 ±55.6）和（-20.5±19.8）μm;Min值为（401.2±83.8）和（525.4±28.1）μm;Min-Median值为（-83.4 ±48.2）和（-23.1 ±4.8）μm;Min-Max值为（-169.7 ±99.4）和（-59.2±23.3）μm;Central值为（453.4±58.6）和（533.4±28.8） μm.其中Min、Min-Median、Min-Max具有较好的诊断效能（AUC=0.952,0.938,0.924,Youden指数为0.784,0.829,0.721）;Central、IT-SN和I-S诊断效能中等（AUC=0.891,0.877,0.862;Youden指数为0.643,0.707,0.580）.结论 圆锥角膜患者的中央及下方角膜上皮明显变薄,上皮厚度差异增大;中央角膜变薄,
- 赵玉瑾洪佳旭王飞崔心瀚杨宇婧朱晓宇吴丹魏安基陈岩吴甦潜黄霏霏徐建江
- 关键词：圆锥角膜角膜厚度测量
