国家自然科学基金(30871722)
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 相关作者：赵凌侠芦丽亚金丽鑫杨宁刘莹更多>>
- 相关机构：上海交通大学南方医科大学南方医院南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 用无选择标记的转基因烟草表达胸腺素α1(Tα1)
- 2010年
- 胸腺素α1(thymosin α1,Tα1)作为免疫调节剂在T细胞成熟、分化和功能发挥方面扮演着重要角色,临床主要被用于免疫缺陷、病毒感染和自身免疫性疾病(HBV、HCV、HIV和癌症等)的治疗。由于组织提取Tα1原料限制、化学合成价格昂贵和传统表达系统(原核或转基因动物)存在安全隐患,使Tα1临床应用受限。用烟草表达Tα1,首先按植物偏爱密码子设计合成tα1基因(124bp)并重组串联成4×tα1,构建植物双元表达载体p35s∷4×tα1(含twinT-DNAs),用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草。PCR和Southern blot结果证实获得了14转基因烟草,并发现靶基因4×tα1与筛选基因nptII在转基因烟草T0代基因组中发生了分别整合。对177株T1代转基因烟草检测,获得了2株仅整合4×tα1而无筛选标记nptII的植株。ELISA结果显示,4×Tα1在转基因烟草叶片中的表达量介于180.46(81#)～756.87ng/g.fw(86#),Western blot证实植物源4×Tα1具有免疫活性。MTT实验结果显示,植物源的4×Tα1蛋白具有促进BALB/c鼠脾淋巴细胞增殖的功能,为用安全植物表达系统生产包括Tα1在内的药用蛋白提供重要参考。
- 芦丽亚宋维游晓慧江婷赵凌侠
- 关键词：胸腺素Α1转基因烟草生物活性无选择标记
- 植物生物反应器研究现状、瓶颈及策略被引量：11
- 2009年
- 近10年,植物作为重组蛋白生产系统是生命科学中研究最活跃领域之一。植物系统具有低成本、安全和易规模化优势,其表达生物活性药用蛋白能力已被许多研究所证实;同时,植物药用蛋白产品还表现出潜在的市场和广阔应用前景。鉴于此,回顾了植物生物反应器兴起,介绍了植物表达系统和重组蛋白研究现状,综述了植物生物反应器面临瓶颈问题、解决对策和未来一段时间内研究热点;在展望植物生物反应器前景同时,对我国研究现状、与国外差距和未来发展应采取策略进行了讨论。
- 金丽鑫赵凌侠
- 关键词：植物生物反应器重组蛋白
- 携Sialyl Lewis^x和抗ICAM-1单抗双配体微泡靶向黏附行为方式的体外研究被引量：4
- 2011年
- 目的 体外对比评价携Sialyl Lewisx和抗ICAM-1单抗双配体和同型对照单配体微泡的靶向黏附行为方式.方法 构建携Sialyl Lewisx与抗ICAM-1单抗双配体（MB-D）、携Sialyl Lewisx（MB-S）和抗ICAM-1单抗（MB-I）三种靶向微泡,利用平行板流动腔和Image-Pro-Plus图像分析软件,分别在0.6、2.0和4.0 dyn/cm2三种剪切应力下分析每种微泡流动过程的速度变化,测定滚动和牢固结合的微泡数目,并检测三种靶向微泡的半数解离应力.结果 0.6 dyn/cm2时单个视野内微泡的滚动数目,MB-D和MB-S明显高于MB-I（P＜0.05）,而在2.0和4.0 dyn/cm2时MB-S分别约是MB-D和MB-I的1.47～1.70倍和4.52～10.65倍（P＜0.05）.三种剪切应力下微泡的全程（6 min）结合数目MB-D分别为MB-S和MB-I的1.40～1.44倍和2.18～3.78倍（P＜0.05）.MB-S、MB-D和MB-I的半数解离应力依次递增.结论 三种微泡具有不同的靶向黏附行为方式,MB-I表现为低效滚动后的牢固结合,MB-S呈高效滚动后的不稳定黏附,而MB-D能够实现高效滚动后相对牢固的结合,其靶向黏附效能明显高于同型对照微泡,有望在体内动脉系统高剪切应力状态下实现分子影像评价.
- 李美瑜杨莉吴爵非肖云彬宾建国刘莹宾建平
- 关键词：微气泡基因打靶
- 番茄叶霉菌及番茄抗性基因分子生物学研究进展被引量：8
- 2009年
- 叶霉菌(Cladosporium fulvum)是番茄(Solanum lycopersicum)叶霉病致病真菌,严重地威胁着番茄生产;二者互作遵循"基因对基因"假说,是目前研究植物与病原菌互作模式系统。本文简要地回顾了番茄叶霉菌和抗性基因(Cf)研究历史;概述了叶霉菌侵染特征、效应因子的类型、功能和特性;对番茄Cf基因的类型、定位、进化、结构和功能研究进展加以综述,特别是对Cf/Avr互作的分子机制、信号转导和抗性基因自激活等最新研究成果加以重点阐述;同时,对今后番茄抗叶霉病研究所面临问题、研究热点和解决策略进行了讨论。以期为番茄抗叶霉病或植物抗真菌病研究提供一些有用信息。
- 芦丽亚杨宁赵凌侠
- 关键词：番茄叶霉菌
- 开发一种预防和治疗骨质疏松症的功能性生菜(英文)被引量：1
- 2009年
- 骨质疏松症严重威胁着人类的健康,鲑鱼降钙素是一种治疗骨质疏松的有效药,但是昂贵的价格限制了它的使用。本研究以生菜作为生物反应器来表达降钙素中生物活性较高的鲑鱼降钙素,以期通过鲜食表达降钙素的生菜达到防止或治疗骨质疏松目的,同时可大大降低生产成本。首先按植物偏爱密码子设计合成了编码鲑鱼降钙素的msCT基因,其次考虑到转基因产品安全性问题,构建植物双元表达载体p35S-2300-twinT-DNA::pil-msCT::noster,利用农杆菌介导进行生菜转化。经PCR和Southern blot确认得到了12株独立的转基因植株。同时RT-PCR分析表明鲑鱼降钙素在To代转基因植株中成功表达,而且表达量存在显著差异,为利用植物生物反应器生产治疗用降钙素奠定了基础。
- 崔丽洁芦丽亚叶坚庞永珍申国安赵凌侠唐克轩
- 关键词：骨质疏松症鲑鱼降钙素双元载体生菜
- 谈谈植物疫苗问题被引量：1
- 2009年
- 本文对植物疫苗的研究现状和问题进行了介绍和讨论。
- 张巍阎秀峰赵凌侠
- 关键词：植物疫苗转基因生物安全
