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天津市自然科学基金(07JCZ-DJC04900)
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代晓华
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人生存素survivin的克隆与分泌表达
2012年
旨在克隆人生存素(survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达。采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达载体pAYZ-survivin,将该载体转化大肠杆菌16C9进行表达。结果表明,成功克隆了survivin基因并构建了重组表达载体。融合蛋白主要以可溶性状态分泌到周质腔内存在。分离提取蛋白,HiTrap金属螯合柱进行亲和层析纯化,并经Western blot验证了高纯度survivin融合蛋白的表达。
代晓华
姜琳琳
程昕
纪庆
朱惠芳
熊冬生
周圆
关键词:
生物医学工程
生存素
分泌表达
大肠杆菌
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