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浙江省医药卫生科学研究基金(2003B104)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：沈周俊丁国庆陈善闻廖国栋周卸来更多>>
相关机构：浙江大学医学院附属第一医院浙江大学医学院附属邵逸夫医院上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇人干扰素
  • 1篇人干扰素Α-...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇重组卡介苗
  • 1篇卡介苗
  • 1篇基因
  • 1篇基因重组
  • 1篇基因重组卡介...
  • 1篇干扰素
  • 1篇干扰素Α
  • 1篇干扰素Α-2...
  • 1篇膀胱
  • 1篇膀胱肿瘤

机构

  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇浙江大学医学...
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 1篇周卸来
  • 1篇廖国栋
  • 1篇陈善闻
  • 1篇丁国庆
  • 1篇沈周俊

传媒

  • 1篇中华外科杂志

年份

  • 1篇2008
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人干扰素α-2b基因重组卡介苗的构建与鉴定被引量：2
2008年
目的构建能自动分泌表达人干扰素α-2b（IFNα-2b）的重组卡介苗（rBCG-IFNα-2b）菌株，并对其进行鉴定。方法分别从人外周血和BCG基因组中提取DNA，聚合酶联反应（PCR）扩增人IFNα-2b基因和BCGAg85B信号肽基因，将该两片段插入质粒pMV261，构建分泌型卡介苗穿梭表达载体pMV261-AgS5B-IFNα-2b。电穿孔将该载体导入BCG中，构建rBCG-IFNα-2b。分别用PCR扩增和Westernblot检测rBCG-IFNα-2b中人IFNα-2b基因和蛋白的表达情况，酶联免疫吸附（ELISA）检测rBCG-IFNα-2b培养上清中IFNα-2b蛋白的表达情况。结果采用酶切、PCR扩增及DNA测序对pMV261-AgS5B-IFNα-2b进行鉴定，结果显示BCGAgS5B信号肽片段和人IFNα-2b片段与文献结果一致，连接方向正确。以rBCG-IFNα-2bDNA为模板、IFNα-2b引物进行PCR扩增后得到与理论上大小相同的扩增片段，Westernblot显示rBCG-IFNα-2b的培养上清和菌体中均可检测到IFNα-2b蛋白的表达，且培养上清中蛋白的表达量明显多于菌体，ELISA法可检测到培养上清中有高表达的IFNα-2b蛋白（301．45pg／ml）。结论成功构建了能自动分泌表达人IFNα-2b的新型重组卡介苗菌株rBCG-IFNα-2b，为进一步研究其免疫活性和抗膀胱肿瘤疗效奠定了基础。
丁国庆沈周俊陈善闻周卸来廖国栋
关键词：卡介苗膀胱肿瘤干扰素Α-2B基因重组
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