国家重点基础研究发展计划(G1999055902)
- 作品数：30 被引量：126H指数：6
- 相关作者：孙方臻孙青原黄秀英崔龙波陈大元更多>>
- 相关机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所中国科学院烟台大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划中国科学院知识创新工程国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 小鼠早期受精胚细胞核诱导成熟卵母细胞Ca^(2+)释放活性的研究
- 2002年
- 在受精过程中,哺乳动物卵子细胞内的钙离子浓度呈现连续性反复升高.有证据表明:将受精的1-和2-细胞期的胚胎细胞核移植到未受精卵中能导致卵子产生钙升高并使该重构胚激活 然而,尚不清楚胚胎细胞核这种诱导卵子内钙升高的能力是如何获得的,是否处于不同发育阶段的早期胚胎细胞核都具有这种能力.利用细胞核移植技术,将小鼠受精早期胚胎细胞核移植到成熟卵母细胞中,并测定该重构胚细胞内钙含量变化,结果表明,受精1-和2-细胞期的细胞核具有诱导成熟卵子钙释放活性的功能,而4-和8-细胞期细胞核、融合的2或3个小细胞期的细胞核及乙醇孤雌活化的原核均不具有这种能力.结果说明,胚胎细胞核诱导卵子细胞内钙升高的能力是受精过程中产生的,是受精胚特有的,它存在于早期受精胚的特殊发育阶段.这暗示早期受精胚这一特有的能力对胚胎的正常发育具有重要意义.
- 罗晓艳黄秀英孙方臻
- 关键词：卵母细胞细胞核移植钙离子浓度钙振荡小鼠
- 大鼠早期三级卵泡中的卵母细胞能在联合培养系统中成批适当成熟(英文)被引量：3
- 2005年
- 我们建立了由离体同步未分化颗粒细胞、动情前期垂体前叶和Δ-4雄烯二酮组成的“联合培养系统”。该联合培养系统可模拟正常生理状态下各相关细胞间的协同作用,更有效地诱发经DES 刺激后所获得的大量大鼠早期三级卵泡中的卵母细胞同步达到适当成熟,从而获得符合正常生理标准的成熟卵球,使卵巢内大量卵母细胞得到充分利用。我们的实验表明,经DES刺激,每侧幼龄大鼠卵巢中平均可取得处在早期三级卵泡中的189枚卵母细胞。在联合培养系统中培养,78%的卵母细胞排出第一极体达到成熟。这些成熟的卵母细胞中88%可正常受精,93%卵裂,经体外培养96h, 有59%的受精卵可发育到桑椹或囊胚。2-细胞期胚胎移植后可发育为健康个体。因此,该联合培养系统为研究大鼠卵母细胞成熟、受精和早胚发育的分子机制提供了非常有效的实验模型。
- 颜桂军顾正孙兆贵左嘉客
- 关键词：卵母细胞卵母细胞成熟卵泡
- 卵母细胞减数分裂和受精过程中MPF和MAPK的作用和相互调节被引量：2
- 2004年
- 在卵母细胞减数分裂成熟和受精过程中,MAPK级联信号途径和MPF起着关键性的作用。这两种蛋白激酶信号途径以及它们之间协调的相互作用影响着整个动物界卵母细胞减数分裂成熟和受精过程,包括促进生发泡破裂、抑制减数分裂过程中的DNA复制、调节染色体的分离、维持MⅡ期阻滞、诱发第二次减数分裂恢复等。文中对卵母细胞减数分裂和受精过程中MPF和MAPK的作用和相互调节进行了综述。
- 霍立军范衡宇陈大元孙青原
- 关键词：卵母细胞丝裂原活化蛋白激酶成熟促进因子
- 年轻与老龄小鼠未成熟卵母细胞之间的生发泡移植被引量：2
- 2007年
- 为研究不同年龄来源的细胞质或细胞核对卵母细胞成熟、钙振荡及核型的影响，在6罐周龄（6w）小鼠与9月龄（9M）和12月龄（12M）小鼠卵母细胞之间进行了生发泡（GV）互换。通过显微操作和电融合获得了5组重组卵母细胞。重组卵母细胞和对照卵母细胞经Sr^2＋诱导后呈现相似的钙震荡模式。6WGV-6W胞质体组、6WGV-9M胞质体组和6WGV-12M胞质体组成熟卵母细胞染色单体提早分离的比率与6～8周龄对照组比较无差异（P〉0.05），但显著低于12月龄对照组（P〈0．01）。而9MGV-6W胞质体组和12MGV-6W胞质体组成熟卵母细胞染色单体提早分离的比率则明显增加。这些结果表明由年轻与老龄小鼠之间GV互换所重组的卵母细胞能够正常成熟和产生钙震荡，与衰老相关的减数分裂异常似乎归因于细胞核或染色体而不是细胞质。
- 崔龙波周雪莹黄秀英孙方臻
- 关键词：年龄卵母细胞染色体
- 猪卵母细胞体外成熟过程中p90^(rsk)未被MAPK激活被引量：1
- 2002年
- 从屠宰场获得的初情期母猪卵巢中的卵母细胞 ,在修改后的 TCM199中进行体外成熟培养。在卵母细胞发育的一定时期取样 ,利用 SDS- PAGE蛋白质电泳和免疫印迹技术 ,研究了 MAPK(丝裂原激活蛋白激酶 ,又称 ERK)和p90 rsk (ribosomal S6 kinase)对猪卵母细胞成熟的调节。结果表明 ,修改后的 TCM199可以满足猪卵母细胞成熟的需要 ,但猪卵母细胞在体外成熟过程中 ,p90 rsk未随 MAPK激活而激活 ,说明维持猪卵母细胞的 M 阻滞与 MAPK有关 ,而与 p90 rsk无关。
- 李满玉孙青原夏国良陈大元
- 关键词：卵母细胞减数分裂MAPKPSK体外成熟
- 生发泡移植过程对小鼠卵母细胞体外受精的影响被引量：1
- 2009年
- 为研究生发泡(GV)移植后的重组卵母细胞能充分在体外成熟和发育,本试验比较了GV移植过程及体外成熟对小鼠卵母细胞体外受精的影响。通过透明带切口及GV移植获得的重组GV期卵母细胞的成熟率为87.0%(147/169),体外受精后发育到原核期胚和2-细胞期胚的比率分别为76.2%(112/147)和42.2%(62/147),与仅做透明带切口但不进行GV移植的对照组相似(P>0.05),表明GV移植过程未对卵母细胞体外受精后的早期胚胎发育能力产生不利影响。但与体内成熟的卵母细胞相比,体外成熟卵母细胞的受精率和卵裂率都明显降低,表明其进一步发育的能力受到影响。
- 崔龙波周雪莹崔志峰黄秀英孙方臻
- 关键词：卵母细胞体外成熟体外受精
- 不同年龄昆明白小鼠卵母细胞的生发泡互换
- 2005年
- 为探讨卵母细胞减数分裂异常及其与年龄相关变化之间的关系,对不同年龄段昆明白小鼠卵母细胞进行了生发泡(GV)移植研究.应用显微操作和电融合技术,将6～8周龄小鼠GV期卵母细胞分别与6月龄、9月龄和12月龄小鼠GV期卵母细胞进行GV互换,所形成的6种GV-胞质体复合体的融合率(89.7%～95.6%)和6种重组卵母细胞的成熟率(83.5%～88.2%)并不因小鼠年龄的改变而有所变化.成熟的6种重组卵母细胞经体外受精后,形成原核期胚和2-细胞期胚的比率(分别为80.0%～87.3%和42.7%～50.9%)并不因不同年龄小鼠卵母细胞GV互换所带来的细胞质或细胞核的改变而受到影响.
- 崔龙波周雪莹王敏强黄秀英孙方臻
- 关键词：小鼠年龄卵母细胞核移植
- 四跨膜蛋白CD9对猪卵母细胞体外受精的影响
- CD9是与αβ(小鼠)和αβ(猪)等多种β整合素密切相关的四跨膜蛋白,由于αβ分布于小鼠卵母细胞的膜上,αβ分布于猪卵母细胞的膜上,它们能与精子膜表面的糖蛋白ADAM2(fertilinβ)等配体相互作用,所以,要研究C...
- 李永海侯毅马伟张东孙青原王维华
- 文献传递
- 哺乳动物卵母细胞生发泡移植
- 2005年
- 生发泡(GV)移植是指将GV期卵母细胞的GV移入到去核的受体细胞(GV期卵母细胞、MII期卵母细胞或受精卵)透明带下,经融合形成一个重组卵的过程。GV移植对研究卵母细胞的细胞周期调控、成熟及受精时细胞核与细胞质之间的相互作用非常重要,可用于研究卵母细胞减数分裂异常和与年龄相关变化之间的关系及细胞质衰老与卵母细胞非整倍性之间的关系。现简要介绍了GV移植的基本程序,GV核体与胞质体的融合,重组卵的培养条件,重组卵成熟后的受精、人工激活和胚胎发育能力以及GV移植的意义。
- 崔龙波孙方臻
- 关键词：GV卵母细胞核体细胞质受精
- 蛋白激酶C在卵母细胞减数分裂成熟和受精中的作用被引量：2
- 2003年
- 蛋白激酶C(PKC)是一类广泛分布在真核细胞中的单链丝/苏氨酸蛋白激酶超家族,在卵母细胞成熟和受精的多个环节发挥着重要调节作用。在卵母细胞成熟过程中,PKC的作用决定于它存在的位置:卵丘细胞中PKC的激活能够促进卵母细胞恢复减数分裂,而卵母细胞中PKC的激活却抑制自身的生发泡破裂,PKC活性在卵母细胞成熟过程中逐渐升高,在第一次减数分裂中/后期转换时活性下降,使卵母细胞得以排出第一极体,进入第二次减数分裂,在哺乳动物卵子的受精过程中,PKC可能作为钙离子的下游靶分子,引发皮质颗粒的排放,并使卵子突破MⅡ期阻滞,形成原核。PKC还参与调节其他重要蛋白激酶,如成熟促进因子(MPF)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性。目前已经在哺乳动物卵子中发现多种PKC亚型,其中经典型PKC可能在卵皮质反应中发挥最主要的作用。结合作者的工作,对目前已知的PKC在减数分裂与受精中的作用进行了评价和展望。
- 范衡宇佟超陈大元孙青原
- 关键词：蛋白激酶C卵母细胞减数分裂受精卵巢
