国家自然科学基金(30871544)
- 作品数：12 被引量：75H指数：6
- 相关作者：王晶珊隋炯明乔利仙王晓杰黄玲更多>>
- 相关机构：青岛农业大学中国农业科学院作物科学研究所济宁市农业科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 花生组织培养及高频率植株再生被引量：16
- 2009年
- 以14个花生品种为材料，对花生组织培养及植株再生进行了研究。将花生成熟胚幼叶、子叶和下胚轴外植体接种到添加0—2mg／LNAA和0～10mg／LBAP的MSB，（MS无机盐＋B5有机）培养基上诱导愈伤，再转到添加0～10mg／LBAP的分化培养基上诱导不定芽。结果表明，诱导培养基中添加的激素及其浓度对以后在分化培养基上不定芽分化有重要作用，以添加1mg／LNAA和6mg／LBAP最利于不定芽分化；分化培养基中添加4mg／LBAP利于不定芽伸长及植株再生；幼叶外植体分化不定芽频率明显高于子叶和下胚轴；不同基因型不定芽分化率存在明显差异，白沙1016和花育23幼叶外植体获得了较高的不定芽分化率，分别达到91．8％和88．5％。再生苗经生根培养和驯化后，移栽花盆可正常开花结果。
- 雷萍萍李美芹张力凡黄玲赵健王晶珊
- 关键词：花生不定芽分化植株再生
- 花生不定芽分化及植株再生的研究被引量：2
- 2013年
- 为进一步探索和完善高频植株再生体系并扩大基因型的研究,以8个花生品种为材料,对幼叶不同部位(叶片顶端、中间切段、叶片基部)的切段、子叶、上胚轴和下胚轴外植体,接种到添加1 mg/L NAA和6 mg/L BAP的MSB5培养基上,10天后将形成的愈伤组织转移至添加10 mg/L BAP或添加3 mg/L BAP和1 mg/L ABA的再分化培养基上进行培养,诱导不定芽分化。结果表明,6天叶龄叶片中间切段不定芽分化频率达到了91.4%,上胚轴26.7%,下胚轴12.5%和子叶0%;花生品种8823幼叶外植体获得了的91.4%不定芽分化率,生根植株经驯化后移至砂土中,正常开花结果。因此,幼叶外植体分化不定芽频率明显高于子叶、上胚轴和下胚轴;6天叶龄的叶片中间切段为最佳;不同基因型不定芽分化率存在明显差异。
- 黄玲岳增辉缪蕾赵凯周静
- 关键词：花生不定芽分化植株再生
- 平阳霉素对花生体细胞胚胎发生的影响被引量：11
- 2011年
- 本文对花生离体培养高频率体细胞胚(体胚)诱导方法,及平阳霉素(PYM)对体胚发生的抑制作用进行了研究,旨在为以PYM作为化学诱变剂进行花生离体诱变提供有效方法。以花生品种花育20号和花育22号成熟种子的胚小叶为外植体,在添加不同浓度2,4-D(0,5,10,15,20mg/L)的MSB5(MS无机盐+B5有机成分)培养基上诱导体胚培养。结果表明:当24,-D浓度为10mg/L时,体胚诱导率高,极显著高于其他处理(除花育20号添加10mg/L与5mg/L无极显著差异),花育20号和花育22号体胚诱导率分别高达80.1%和92.9%。将形成体胚的外植体转接到添加4mg/L BAP的体胚萌发培养基上,成苗率达85%以上。以此培养方法为基础,在诱导培养基中添加不同浓度的PYM(0,1,2,3,4,5mg/L),进行体胚的诱导。结果显示:PYM对体胚发生有显著的抑制作用,随着平阳霉素浓度的增大,体胚诱导率显著下降,外植体褐化率急剧上升。2个供试品种的PYM抑制浓度不同,综合褐化率和体胚形成率,确定花育20号和花育22号适宜的PYM离体诱变浓度分别为3～4mg/L和4～5mg/L,诱变培养时间为30d。
- 赵明霞隋炯明王晓杰乔利仙郭宝太王晶珊
- 关键词：平阳霉素诱变体细胞胚2,4-D
- 花生组培苗嫁接技术的研究被引量：14
- 2010年
- 为解决花生组培再生苗及转基因苗驯化移栽成活率低的难题,本试验以花生实生苗作为砧木,对花生嫁接技术进行了研究。试验结果表明:超净台内无菌嫁接效果较好,以再生苗或实生苗为接穗进行无菌嫁接,其成活率均达90%以上,明显高于室内嫁接成活率(71%～72%);无菌嫁接时12～15d苗龄的砧木效果最好;将无菌嫁接苗在培养基中培养3～5d后进行驯化移栽为最佳时期;不同花生基因型嫁接苗成活率在87%～95%;嫁接苗移栽田间后,其成活率高达94%,且100%结果。
- 郝世俊隋炯明乔利仙王晓杰王晶珊
- 关键词：花生实生苗再生苗嫁接
- 快中子辐照对花生胚小叶体细胞胚胎发生的影响被引量：21
- 2011年
- 以花生品种鲁花11号成熟干种子为试材,经快中子0、9.7、14.0和18.0Gy辐照后,取胚小叶外植体接种于添加10.0mg/L 2,4-D的MSB5诱导培养基上诱导体细胞胚胎发生。培养4周后,将其转移到添加4.0mg/L BAP的培养基上进行培养。结果表明,快中子辐照处理对胚小叶组织培养及体细胞胚胎发生有很大影响。未处理的对照,体细胞胚(体胚)形成较早,培养15d开始观察到体胚的形成,并且体胚全部是在诱导培养基上直接从外植体形成,几乎未经过愈伤组织。经辐照处理的种子,其外植体只有少部分在诱导培养基上直接形成体胚,而大部分先形成愈伤组织,当转移到添加4.0mg/L BAP的培养基上后,部分愈伤组织进一步形成体胚。体胚诱导率因辐照剂量的大小存在很大差异,随辐照剂量的增加,体胚诱导率呈明显下降趋势。对照体胚诱导率高达80%以上,而辐照剂量由9.7Gy增加到14.0和18.0Gy时,体胚诱导率则由约55%降低到约40%和30%。本研究结果说明,快中子辐照对诱导花生基因突变是有效的,推断14.0Gy为适宜的诱变剂量。
- 王莉莉赵明霞乔利仙王晶珊隋炯明刘录祥
- 关键词：快中子辐照离体诱变体细胞胚胎发生
- 黄曲霉菌和水杨酸对花生几丁质酶诱导的研究被引量：2
- 2011年
- 选取花生品种群育54和蓬莱一窝猴的种子,进行黄曲霉菌接种和不同浓度水杨酸溶液的诱导处理,测定两个品种几丁质酶活性。结果表明,经诱导处理后,两个品种的几丁质酶活性均有所提高,群育54酶活性水平提高幅度高于蓬莱一窝猴。几丁质酶活性在黄曲霉菌侵染后192h仍呈上升趋势;水杨酸处理后72h达到峰值。不同浓度水杨酸对花生种子几丁质酶活性诱导效果有较大差别1,.0mmol/L水杨酸溶液诱导处理酶活性水平提高最为明显。经诱导处理后几丁质内切酶活性明显高于几丁质外切酶活性。
- 乔利仙刘晓琳隋炯明徐丽娟王晶珊
- 关键词：花生几丁质酶活性黄曲霉菌水杨酸
- 花生fw2.2基因的克隆及遗传转化被引量：8
- 2011年
- fw2.2基因是影响番茄果重的一个重要数量性状基因,在心皮的细胞分裂中起负调控作用。本研究以番茄fw2.2基因的序列为探针,从花生EST数据库中筛选同源序列。根据花生的EST拼接序列设计引物对花生进行扩增,目标产物测序后,将推测的氨基酸序列与其他植物fw2.2基因编码的氨基酸序列进行比对,同源性为34.78%～66.85%。半定量RT-PCR结果表明,该基因在野生种和栽培种中的表达存在差异。将fw2.2基因连接到植物表达载体,通过农杆菌介导法转化花生品种花育23号,获得了12个PCR阳性的独立转化子。
- 刘强王晶珊乔利仙赵春梅隋炯明
- 关键词：花生克隆
- 花生原生质体分离与培养被引量：3
- 2009年
- 以花生(Arachis hypogaeaL.)品种花育20为材料,探讨不同的酶液浓度、酶解时间及渗透压对花生原生质体分离的影响。结果表明:原生质体分离的适宜酶液配比是2%纤维素酶(Cellulase Onozuka RS)、0.2%果胶酶(Pectolyase Y-23),甘露醇渗透压调节剂的浓度为0.7mol/L,暗处理10h,叶片原生质体产量为4.86×105个/ml,存活率75.6%,愈伤组织原生质体产量为4.97×105个/ml,存活率75.4%。将分离的原生质体培养在添加1mg/LNAA和4mg/LBAP的改良MS液体培养基中。培养约2～3天后,细胞开始分裂。然后部分细胞继续分裂,并形成细胞团。培养5～6周后,将培养物转移到添加2mg/L2,4-D和3mg/LBAP的MS液体培养基(pH5.8)中进行培养。7～8周后,将形成的直径为1～2mm的小愈伤组织转移到添加1mg/LNAA和5mg/LBAP的MS固体培养基上培养,小愈伤组织迅速生长。转移3～4周后,愈伤组织长至7～9mm。
- 黄玲赵凯孔贺周红梅王晶珊
- 关键词：花生原生质体分离
- 花生TRAP-PCR分析体系的建立被引量：2
- 2010年
- 目标区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)是通过一个依据EST序列设计的固定引物和一个针对外显子或内含子特点设计的随机引物对开放阅读框(open reading frames,ORFs)进行扩增。本研究首次建立了适于花生TRAP分析的PCR扩增体系:在15μl总反应体系中,模板DNA50ng,引物浓度1.0μmol/L,dNTPs浓度0.25mmol/L,Taq DNA聚合酶1U。利用该体系对24个花生品种DNA进行扩增,得到了清晰稳定的条带,且这些条带具有一定的多态性,说明所建立的体系可用于花生遗传多样性分析。
- 徐磊王晶珊隋炯明隋炯明王晓杰
- 关键词：花生
- 花生ASR基因的扩增和生物信息学分析被引量：1
- 2011年
- ASR基因（脱落酸、胁迫、成熟诱导基因）是近年来从植物中发现的一类基因,该基因参与植物对低温、干旱、渗透压、脱落酸的胁迫应答。目前在多个植物中克隆了ASR基因,研究以番茄ASR1基因的序列为探针,从花生EST数据库中筛选同源序列并进行拼接。根据花生的EST拼接序列设计引物进行RT-PCR扩增,获得一条大小为641bp的条带。与其它物种的氨基酸序列进行比对,同源性为46.41%~69.38%。
- 刘强李瑞王晶珊乔利仙赵春梅隋炯明
- 关键词：花生逆境胁迫同源序列
