国家自然科学基金(81000803)
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
- 相关作者：张伯勋陈华魏均强唐佩福王岩更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
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- 诱导hBMSCs成骨分化中微小RNA和靶基因表达水平的变化被引量：3
- 2012年
- 目的明确萎缩性骨不连组织中表达上调的数种微小RNA(micro RNA,miRNA)与其相应靶基因mRNA、蛋白在hBMSCs成骨分化过程中的表达变化趋势和生物学功能。方法取自体髂骨植骨手术患者的髂骨骨髓血,采用密度梯度离心法分离培养hBMSCs。取第4代hBMSCs以成骨诱导培养液诱导成骨分化,分别提取0、12 h,1、2、4、7、14 d时的细胞总RNA和蛋白,进行miRNA的实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、相应靶基因mRNA的qRT-PCR和蛋白Western blot检测。结果诱导hBMSCs成骨分化时,成骨性靶基因碱性磷酸酶(alkalinephosphatase liver/bone/kidney,ALPL)、PDGF-α多肽(PDGF-αpolypeptide,PDGF-A)和BMP-2的mRNA和蛋白表达在多数时间点同对照(0 h)相比增加(BMP-2在12 h和1 d时下降),1～7 d变化最为显著。不同时间点的miRNA、靶基因mRNA和蛋白表达水平存在差异,其中hsa-miRNA-149*和hsa-miRNA-654-5p miRNA含量的变化趋势与各自靶基因ALPL和BMP-2的mRNA及蛋白表达水平总体上成负相关(P<0.05),hsa-miRNA-221与其靶基因PDGF-A的变化趋势无明显负相关关系(P>0.05)。结论诱导hBMSCs成骨分化过程中,hsa-miRNA-149*和hsa-miRNA-654-5p对其相应靶基因ALPL和BMP-2的mRNA及蛋白存在密切调控关系。
- 魏均强张伯勋郑晓飞陈华田学忠唐佩福宋青黎檀实
- 关键词：微小RNA靶基因HBMSCS成骨诱导分化
- hsa-miR-654-5p通过抑制骨形态发生蛋白2调控人骨髓基质干细胞成骨分化被引量：10
- 2012年
- 目的明确萎缩性骨不连组织水平表达上调的hsa-miR-654-5p在人骨髓基质干细胞(hBMSCs)中对其预测靶基因骨形态发生蛋白2(BMP2)mRNA和蛋白的抑制作用,探索其在成骨分化过程中的生物学调控功能。方法分离培养hBMSCs,将第4代hBMSCs培养16 h后分别按相应体系转染细胞,再培养48 h后取六孔板内细胞提取总RNA和总蛋白,进行实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting,取24孔板内细胞进行双荧光素酶报告基因检测。结果当hBMSCs中hsa-miR-654-5p过表达时,BMP2的mRNA和蛋白表达水平均发生明显下调;双荧光素酶报告基因检测提示,BMP2的预测靶位点直接受hsa-miR-654-5p的抑制调控,该靶位点被突变后hsa-miR-654-5p对BMP2的抑制作用消失。结论 hsa-miR-654-5p可通过作用于BMP2的特定靶位点而直接抑制BMP2的mRNA和蛋白表达。hsa-miR-654-5p的变化在成骨分化调控过程中具有重要作用。
- 魏均强陈华郑晓飞张伯勋王岩唐佩福佘飞宋青黎檀实
- 关键词：骨形态发生蛋白2成骨分化蛋白印迹荧光素酶报告基因
- MicroRNA与间充质干细胞成骨分化的研究进展
- 2013年
- MicmRNA（miRNA）是一类长度约22bp的非编码单链RNA分子，广泛存在于动植物等各类生物体内。Lee等[1]在秀丽隐杆线虫（Caenorhabditiselegans）体内首先发现了一种代号为lin-4的短链非编码RNA分子，其能够与lin-14基因的3’非编码区特异性结合，并且能够降低LIN-14蛋白表达水平，而对lin-14基因的mR-NA水平无明显影响，lin-4是第一个被发现的miRNA。
- 佘飞张伯勋陈华
- 关键词：微RNAS干细胞骨生成骨髓细胞细胞学间充质干细胞成骨分化
- 萎缩性骨折不愈合的研究新进展被引量：12
- 2012年
- 萎缩性骨折不愈合形成是一个复杂过程,既往研究认为萎缩性骨折不愈合主要是由于骨折断端血运缺乏引起,但也有研究发现萎缩性骨折不愈合的中晚期血运并不缺乏,更可能是由于早期成骨性因素降低和血运减少引起,具体发病机制有待进一步研究。目前有效治疗萎缩性骨折不愈合的措施,主要有植骨和固定、物理治疗、局部注射疗法等。多方位的预防则能有效减少萎缩性骨折不愈合的发生,但萎缩性骨折不愈合仍是骨科临床工作中的棘手问题,应给予充分的重视,并进行合理有效地防治。本文通过回顾分析近年萎缩性骨折不愈合的相关文献,对萎缩性骨折不愈合相关的病因、诊断和防治措施作一综述。
- 魏均强张伯勋陈华唐佩福王岩
- 关键词：骨折
