浙江省科技攻关计划(2004C12027)
- 作品数:5 被引量:19H指数:3
- 相关作者:张雪娟卢福庄付媛冯尚连程菊芬更多>>
- 相关机构:浙江省农业科学院四川省动物防疫监督总站湖南农业大学更多>>
- 发文基金:浙江省科技攻关计划国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的敏感性和特异性被引量:6
- 2006年
- 研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法(DIGFA)诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体,比病原体检查法提早28d查出病畜,达到早期诊断的要求;同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体,证实DIGFA具有较高的敏感性。血吸虫与肝片吸虫、锥虫、蛔虫、囊虫和旋毛虫病之间未见交叉反应现象,说明本法具有较强的特异性。
- 张雪娟卢福庄刘恩勇方兰勇阳爱国何永强付媛项美华
- 关键词:家畜血吸虫抗体敏感性特异性
- 检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法研究被引量:6
- 2006年
- 将待检家畜血纸浸出液点在硝酸纤维素膜上,以金标记的血吸虫虫卵可溶性抗原为探针(以下简称血吸虫抗原胶体金),建立了检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法(Two-step Dot Immunogold Filtration Assay,T—DIGFA)。家畜血吸虫病阳性血样在50-90S形成肉眼可观察的红色斑点,可进行快速诊断。该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴7d和7d以上的阳性牛和兔血纸抗体,与肝片吸虫、锥虫、蛔虫病之间无交叉反应。T—DIGFA检测粪孵血吸虫毛蚴阳性牛血纸139份、阴性牛血纸130份,与粪孵法阳性符合率为100%,阴性符合率为99.2%;T—DIGFA与斑点酶联SPA法阳性符合率和阴性符合率完全相同。血吸虫抗原胶体金在4~8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。试验证实,T-DIGFA有很高的敏感性、特异性、重复性和稳定性,适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断、普查和检疫。
- 卢福庄方兰勇张雪娟刘恩勇毛光琼朱家新樊茂华郑海平俞国乔冯尚连方萍萍陈伟杰付媛程菊芬周永学
- 关键词:血吸虫病抗体家畜
- 日本血吸虫22.6ku膜相关蛋白基因的克隆及原核表达被引量:3
- 2007年
- 为了得到重组的日本血吸虫22.6 ku膜相关蛋白,研究设计了1对引物,以日本血吸虫mRNA为模板,用RT-PCR方法克隆了576 bp的22.6 ku膜相关蛋白基因片段,测序结果表明,该片段与已公布的Sj22.6基因序列(U75510)同源性达到99%。将该基因片段插入原核表达载体pGEX-KG构建了原核表达质粒pGEX-Sj22.6,在大肠杆菌BL21 codn plus中表达获得了约48 ku的融合蛋白,经Western-blot检测,该重组蛋白具有良好的免疫原性。
- 付媛张雪娟赵俊龙何永强刘恩勇卢福庄江涛冯尚连
- 关键词:日本血吸虫克隆表达
- 日本血吸虫病快速粪便毛蚴孵化法检测研究被引量:8
- 2004年
- 本试验通过快速法、尼龙筛法和直孵法检测粪便毛蚴孵出率,结果表明快速法毛蚴相对孵出率为100%,而传统的尼龙筛法为81.2%~84.6%,直孵法为4.0%~36.9%。经生物学统计,快速法和尼龙筛法毛蚴孵出率极显著地高于直孵法(P<0.01),而快速法与尼龙筛法之间的毛蚴孵出率差异不显著(P>0.05)。快速法比较简便实用。
- 张雪娟程天印卢福庄方兰勇朱家新程菊芬
- 关键词:毛蚴
- 日本血吸虫22.6kD重组抗原二步金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的初步研究被引量:1
- 2011年
- 以胶体金标记的日本血吸虫重组抗原GST-Sj22.6为探针,检测家畜血吸虫抗体,建立重组抗原金标免疫渗滤法(RAg-T-DIGFA)。该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴28 d和21 d以上的阳性牛和兔血纸抗体,用该法检测肝片吸虫、蛔虫、弓形虫、旋毛虫病血清抗体,无交叉反应。与T-DIGFA法阳性符合率为100%,阴性符合率为100%。血吸虫抗原胶体金在4~8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。重组蛋白金标免疫渗滤法具有抗原容易制备和良好的敏感性、特异性、重复性和稳定性,适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断。
- 付媛何永强卢福庄顾昀石团员冯尚连张雪娟
- 关键词:日本血吸虫病