吉林省科技厅基础研究项目(201115201)
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 相关作者:刘磊谭岩芦小单魏海峰方艳秋更多>>
- 相关机构:吉林省人民医院佳木斯大学更多>>
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- Akt磷酸化在A549细胞抵抗rsTRAIL蛋白诱导细胞凋亡的研究
- 2014年
- 目的:研究Akt磷酸化抵抗rsTRAIL蛋白诱导肺癌A549细胞株凋亡的作用机制。方法:rsTRAIL蛋白和哌立福新单独和联合作用于细胞株A549,Western blot检测A549细胞中Akt磷酸化水平变化、c-FLIPLL表达水平变化、caspase-8蛋白活化变化情况。流式细胞术进行细胞凋亡检测。MTT法检测A549细胞增殖率。结果:Western blot结果显示,rsTRAIL蛋白可以导致A549细胞中Akt磷酸化水平的增加,哌立福新能够抑制A549细胞中Akt的磷酸化水平及c-FLIPLL表达水平,增强A549细胞中caspase-8的活化。哌立福新能提升rsTRAIL蛋白诱导A549细胞的细胞凋亡率至(76.5±3.02)%和杀伤活性到(83.2±2.54)%。结论:Akt磷酸化是导致A549细胞对抵抗rsTRAIL诱导细胞凋亡的重要原因,抑制其活性可以促进rsTRAIL蛋白发挥抗NSCLC的活性。
- 刘磊方艳秋齐亚灵芦小单魏海峰谭岩
- 关键词:A549细胞株
- PI3K特异性抑制剂LY294002增强rsTRAIL蛋白对A549细胞的杀伤作用
- 2014年
- 目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)参与非小细胞肺癌A549细胞株抵抗重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)蛋白诱导凋亡的机制,寻找增强rsTRAIL蛋白杀伤非小细胞肺癌细胞的新方法。方法:选取对数生长期A549细胞,随机分为rsTRAIL蛋白组和PI3K特异性抑制剂LY294002联合rsTRAIL蛋白(LY294002+rsTRAIL蛋白)组。MTT法检测2组A549细胞生长抑制率,流式细胞技术检测2组A549细胞周期和细胞凋亡的变化,蛋白质印迹法检测2组A549细胞中p-Akt(Ser473)、c-FLIPL、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:与rsTRAIL蛋白组(5.16%±0.32%)比较,LY294002+rsTRAIL蛋白组A549细胞生长抑制率(74.6%±2.63%)明显升高(P<0.05)。与rsTRAIL蛋白组比较,LY294002+rsTRAIL蛋白组处理2h后G0/G1期A549细胞百分比增加(P<0.05),S期细胞百分比降低(P<0.05)。LY294002+rsTRAIL蛋白组A549细胞凋亡率为(61.50±3.02)%,显著高于rsTRAIL蛋白组(3.21%±0.96%)(P<0.05)。蛋白质印迹检测,与rsTRAIL蛋白组比较,LY294002+rsTRAIL蛋白组A549细胞中p-Akt、c-FLIPL和Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05)。结论:LY294002能够抑制PI3K活性,增强rsTRAIL蛋白对A549细胞的杀伤作用。
- 刘磊方艳秋齐亚灵芦小单魏海峰谭岩
- 关键词:A549细胞株肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体磷脂酰肌醇3激酶LY294002