浙江省自然科学基金(R3110155)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 相关领域：化学工程轻工技术与工程更多>>
- 拟南芥腈水解酶催化合成普瑞巴林中间体(S)-3-氰基-5-甲基己酸被引量：4
- 2014年
- 普瑞巴林是治疗神经病理性疼痛、部分癫痫发作和焦虑症的重要药物。本文以外消旋异丁基丁二腈(IBSN)为底物,筛选获得了能够立体选择性合成普瑞巴林手性中间体(S)-3-氰基-5-甲基己酸的拟南芥腈水解酶NiT。考察了该腈水解酶催化IBSN水解的最适催化温度、pH、不同IBSN浓度及金属离子对酶催化反应的影响。结果表明,该酶的最适催化温度为30℃,最适pH为8.0,最适底物浓度为250mmol/L。在此条件下反应6h,(S)-3-氰基-5-甲基己酸的产率和光学纯度分别达到43%和95%。
- 聂雅洁郑仁朝柳志强郑裕国
- 关键词：腈水解酶拟南芥
- 重组大肠杆菌产腈水解酶的培养条件优化
- 2013年
- 以产腈水解酶重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET-28b-NIT为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立5 L发酵罐上重组大肠杆菌产腈水解酶的高密度发酵工艺。通过分批补料培养工艺优化,表明碳、氮源的浓度以及诱导剂的浓度和诱导时机是影响菌体生长和酶活的重要因素。在优化条件下,对E.coli BL21(DE3)/pET-28b-NIT进行14 h的分批补料培养,菌体细胞浓度为13.7 gDCW/L,较优化前提高了4.3倍;腈水解酶体积酶活为36 990 U/L,较优化前提高了5.1倍。
- 金利群吴丛伟柳志强郑裕国沈寅初
- 关键词：重组大肠杆菌腈水解酶蛋氨酸补料分批培养
