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急性心肌梗死患者可溶性Tie-2的检测及其对血管新生作用的研究被引量：3: 2005年; 目的探讨急性心肌梗死患者血清中血管生成素-1(Ang-1)及可溶性酪氨酸激酶受体Tie-2(sTie-2)的浓度变化及重组人可溶性Tie-2/Fc嵌合体对内皮细胞存活及管状形成的作用。方法ELISA法检测急性心肌梗死患者(AM I组,入院当天、发病48、72 h及1周时分别取血)和健康对照组血清中VEGF、Ang-1及sTie-2浓度变化。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察重组Ang-1及Tie-2/Fc对内皮细胞存活及管状形成的影响。结果AM I组VEGF及Ang-1浓度与对照组相比无显著差异。AM I组sTie-2浓度显著高于对照组,其中以发病48 h的浓度最高,男性血清sTie-2浓度显著高于女性。重组Ang-1能够协同VEGF促进内皮细胞管状形成,重组Tie-2/Fc诱导内皮细胞凋亡,抑制管状形成。结论AM I时血清sTie-2浓度升高并随病程发展而变化,Tie-2/Fc抑制管状形成可能提示AM I患者急性期存在血管新生减低。; 王春玲李宏伟傅攀峰修瑞娟; 关键词：血管新生急性心肌梗死

剪切流动法研究表面固定化配基与目标分子的相互作用力: 2005年; 基于剪切流动腔技术,以微球作为受力载体,设计了一套可用于研究表面固定化配基与目标分子特异性相互作用力的实验和分析方法,并以人免疫球蛋白G(humanIgG)和羊抗人免疫球蛋白G(goatanti-humanIgG)分别作为模型配基和模型目标分子进行了研究.基于平面Poiseuille层流模型设计了流场参数,以数值计算结果验证了设计的合理性.使用牛血清白蛋白(BSA)作为非特异性对照,判断微球与基片表面的结合力来自配基和目标分子的生物特异性相互作用,并由进一步的目标分子灭活对比实验确认了这一结论.实验观察到微球与基片表面的结合力受到配基面密度的影响,说明发生结合的是多对而非单对蛋白质分子.将95%的微球被剥离时对应的壁面剪切率设定为临界剪切率,由大量实验结果拟合得到了临界剪切率与配基面密度间的定量关系.在受力分析模型中,考虑到多分子的结合,以及分子键位置不同造成的力臂长度的差异,最终计算得到单对配基与目标分子的平均结合力约为342pN.; 高波靳刚

Sonic Hedgehog在血管新生中的作用被引量：1: 2005年; Sonic Hedgehog介导的信号传导通路是血管生成中一个重要调节环节,可调控血管直径加粗、变长和分叉,影响基质细胞分泌众多的血管新生因子以及动脉血管的发生。Sonic Hedgehog可能通过3种机制(COUP-TF Ⅱ、SHH／GLI／SMO、P13K通路)调控血管生成,并有望成为血管新生研究的新靶向因子。; 罗昭华修瑞娟; 关键词：HEDGEHOG 血管新生肿瘤

人循环内皮细胞的分离和鉴定被引量：14: 2006年; 目的建立从外周血中获取循环内皮细胞（CECs）的免疫磁珠分离技术。方法取1 mL全血按1： 2稀释；加入20 μL抗CD146磁珠抗体；4℃孵育；再加入等体积缓冲液；置于磁架上；吸弃液体；用100 μL缓冲液重悬磁珠。用吖啶橙或Giemsa染色在荧光倒置相差显微镜下计数与磁珠结合的细胞；并用抗-vWF及CD31进行免疫细胞化学鉴定。结果经抗-vWF及CD31鉴定所分选的CECs是内皮细胞。正常健康体检者的CECs数量为10.5（6～16.5）个/mL。使用此法对正常人脐静脉内皮细胞（HUVECs）混合于正常人全血中的最高回收率为91%。结论用CD146免疫磁珠技术分离CECs；具有客观、准确、省时、特异性强及回收率高、取血量少和对内皮细胞损伤小的特点；本方法可用于不同疾病患者血液中CECs的定量检测及其功能状态分析。; 李宏伟王春玲修瑞娟; 关键词：循环内皮细胞免疫磁珠 CD146

冠心病患者循环内皮细胞与炎性相关因子的研究被引量：17: 2005年; 目的应用免疫磁珠分离急性心肌梗死(AMI)及不稳定性心绞痛(UA)患者外周血中循环内皮细胞(CECs),探讨与炎性相关因子C反应蛋白质(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNFα)的相关性.方法 AMI及UA患者入院时取静脉血,用携带抗CD146抗体的免疫磁珠分离外周血CECs;遗传性血友病因子(vWF)、CD31免疫组化及透射电镜对分选细胞进行鉴定;应用Annexin V-FITC/PI检测其凋亡状态;酶联免疫法检测各种炎性相关因子.结果 AMI组(n=37)及UA组(n=12)的CECs数量[中位数(四分位数间距)分别为52(28～81.5)个/ml,29(18～61)个/ml]和血清CRP水平显著高于正常对照组(n=42,P<0.001).AMI加UA组剔除合并糖尿病的患者后(n=26),CECs数量与CRP水平仍显著高于对照组(P<0.001);AMI及UA组CECs的坏死率显著高于对照组(P<0.01);分选出的细胞vWF因子、CD31表达阳性;以研究对象作为整体分析时,CECs数量与CRP及IL-6水平呈显著相关(r=0.677, 0.316,P=0.000, 0.002),多元线性回归分析显示CRP水平及糖尿病对CECs数量有显著影响(OR=0.620, 0.164, 95%CI:3.985～6.751, 0.301～21.877, P=0.000, 0.044).结论 AMI及UA患者CECs数量增加与炎症引起的血管内皮损伤有关.; 王春玲李宏伟傅攀峰张抒杨高润霖修瑞娟; 关键词：循环内皮细胞 C反应蛋白质冠心病患者多元线性回归分析

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中国科学院知识创新工程(KJCX1-SW-07)