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尿IgG亚类的分离纯化和鉴定被引量：1: 2006年; 目的:建立一种简便快捷的分离纯化肾病患者尿IgG亚类的方法。方法:收集的肾病患者24h尿液经硫酸铵盐析、DEAE-cellu lose离子交换层析和葡萄球菌A蛋白(SPA)亲和层析等3步分离纯化,即可得到IgG1、IgG2、IgG3、IgG44种亚类,最后用W estern b lotting和SDS-PAGE电泳的方法鉴定样品及其纯度。结果:SPA亲和层析洗脱曲线显示有4个独立的洗脱峰,W estern b lotting和SDS-PAGE方法鉴定表明提纯的样品为高纯度的IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。结论:本方法通过3步即可一次性将样品中的4种不同的IgG亚类全部分离纯化,且纯度高,简便快捷,效果良好。; 梁伟陈伟英余学清方芳彭晖李晓艳董秀清; 关键词：IGG亚类

MIF反义寡核苷酸对巨噬细胞表达MIF的影响被引量：2: 2006年; 目的:研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)反义寡核苷酸对体外巨噬细胞表达MIF的影响。方法:设计特异性MIF寡核苷酸,其序列为:反义:5’-TACGGATACAAGTAGCAC-3’;正义:5’-ATGCCTATGTTCATCGTG-3’;错义:5’-CTCTCAGACTCGATCTGT-3’。通过脂质体包裹后将其分别转染至小鼠巨噬细胞,观察MIF反义寡核苷酸对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞表达MIF的影响。结果:LPS刺激后6h,巨噬细胞表达MIFmRNA和合成分泌的MIF量增加,9-12h达高峰。MIF反义寡核苷酸转染巨噬细胞后,可见LPS刺激的MIFmRNA和MIF的表达均明显少于LPS刺激组、LPS刺激+转染正义寡核苷酸组和LPS刺激+转染错义寡核苷酸组(P<0.05),与非LPS刺激组无显著差异。结论:LPS可刺激小鼠巨噬细胞合成和表达MIF。MIF反义寡核苷酸可显著抑制巨噬细胞MIF的过度表达。; 李广然陈伟英余学清李晓艳阳晓; 关键词：巨噬细胞巨噬细胞游走抑制因子反义寡核苷酸类细胞表达

尿IgG亚类对人肾小管上皮细胞表达巨噬细胞移动抑制因子的调节作用: 2008年; 目的:探讨微小病变型(MCD)及膜性肾病型(MN)肾病患者尿IgG亚类对人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的影响。方法:收集MCD和MN肾病患者的尿液,分离纯化尿IgG1、IgG2、IgG3、IgG44个亚类纯品,并加以鉴定。将这两种病理类型肾病患者的尿IgG3、IgG4分别刺激HK-2细胞,用Westernblotting的方法检测HK-2细胞MIF蛋白表达的量效关系(0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0g/L,刺激HK-2细胞24h)和时效关系(1g/L刺激HK-2细胞0h、1h、6h、12h、24h、48h)。结果:MN和MCD肾病患者的尿IgG3、IgG4均可上调HK-2细胞表达MIF蛋白,并呈明显的剂量和时间依赖关系。MN患者尿IgG3刺激HK-2细胞随着剂量的增加,MIF蛋白表达逐渐增强,到1.0g/L时达到峰值,时间效应则在1h即明显升高,12h达到峰值;IgG4在0.1g/L时即达到峰值,时间效应则6h即明显升高,12h达峰值。而MCD患者尿IgG3刺激HK-2细胞表达MIF蛋白,在1.0g/L时才开始明显升高,5.0g/L达峰值,时间效应上则在12h才明显升高;IgG4在0.1g/L时开始明显升高,0.5g/L时达峰值,时间效应上则在48h时才出现明显升高,并达峰值。结论:MN及MCD肾病患者的尿IgG3、IgG4均可上调HK-2细胞表达MIF蛋白,且MN患者尿IgG3、IgG4的作用强于MCD患者,提示这两种病理类型肾病患者尿IgG亚类可能存在结构或功能上的差异。; 陈伟英梁伟方芳余学清; 关键词：膜性微小病变型巨噬细胞游走抑制因子

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广东省自然科学基金(04009432)

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