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江苏省卫生厅科研基金(7690008236)
作品数:
1
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石欣
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2006
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利用基因芯片技术检测BRAF基因在胰腺癌组织中的表达
被引量:2
2006年
目的:研究BRAF基因在正常胰腺与胰腺癌组织中表达的情况。方法:收集正常胰腺组织3例以及胰腺癌手术切除标本6例。后者均经病理学检查证实;用TRizol法对组织进行总RNA抽提,采用无RNA酶的DNA酶I等方法进行纯化;通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳以及Lab-on—chip对总RNA进行质控;利用寡核苷酸芯片技术检测正常胰腺和胰腺癌组织中BRAF基因的表达,并且应用逆转录聚合酶链反应(RT‘PCR)技术加以验证。结果:总RNA的OD260nm/OD280nm之值在1.8~2.0之间;琼脂糖凝胶电泳18s和28s电泳条带清晰,且28s和18s亮度之比≥2;Lab—on—chip检测显示18s和28s双峰比例及位置均正常。无降解杂峰出现。芯片杂交扫描图像信号清晰,具有较低的整体背景和较高的信噪比;Ratio分析表明,BRAF基因在胰腺癌组织中表达上调(Cy3/Cy5〉2.0)。RT—PCR验证了胰腺癌组织中BRAF mRNA表达上调。结论:BRAF基因在胰腺癌组织中表达上调,其在胰腺癌发生发展过程中的作用机制还有待于进一步探讨。
汤永辉
石欣
卫文俊
程张军
高乃荣
关键词:
胰腺癌
BRAF基因
寡核苷酸芯片
逆转录聚合酶链反应
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