浙江省教育厅科研计划项目(20041044)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：吴淑珍杨雷张洪勤毕云天包其郁更多>>
- 相关机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SARS冠状病毒核衣壳蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化被引量：1
- 2006年
- 目的:构建重组表达质粒pYES6-N,诱导SARS冠状病毒核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein)在酿酒酵母中的表达和纯化。方法:逆转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR获得核衣壳蛋白基因互相重叠的两部分片段,酶切连接成全长,在E.coliJM109中构建重组表达克隆pYES6-N,在酿酒酵母中诱导表达并纯化。结果:重组克隆pyes6-N经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得一个完整的核衣壳蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量近45000。结论:成功克隆SARS冠状病毒核衣壳蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究。
- 杨雷张洪勤吴淑珍
- 关键词：严重急性呼吸综合征SARS病毒核衣壳蛋白
- 严重急性呼吸综合征冠状病毒刺突蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化
- 2007年
- 目的构建重组表达质粒pYES6-S,诱导SARS冠状病毒刺突蛋白(spike protein)在酿酒酵母中的表达并纯化。方法反转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR法获得刺突蛋白基因互相重叠的四部分片段,酶切连接成全长,在大肠埃希菌E.coli JM109中构建重组表达克隆pYES6- S,在酿酒酵母中诱导表达并纯化。结果重组克隆pYES6-S经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得1个完整的刺突蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量大小近110 000。结论成功克隆SARS冠状病毒刺突蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究。
- 杨雷张洪勤吴淑珍毕云天包其郁
- 关键词：SARS病毒刺突蛋白反转录聚合酶链反应酵母
