国家自然科学基金(30760246)
- 作品数：11 被引量：86H指数：5
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- 相关机构：广西医科大学第一附属医院广西壮族自治区人民医院广西医科大学更多>>
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- 表观遗传学干预对结直肠癌细胞株p33^(ING1b)基因表达及生物学特性影响被引量：3
- 2015年
- 目的通过表观遗传学干预,研究p33ING1b启动子甲基化和组蛋白乙酰化状态、基因和蛋白的表达及其细胞增殖能力的改变,探讨结直肠癌中p33ING1b转录抑制的表观遗传机制。方法通过曲古抑菌素A及5-氮-2′-脱氧胞苷,对结直肠癌细胞株HT29、LOVO、HCT116和COLO205行恢复乙酰化和去甲基化干预,分单独用药组和联合用药组。RT-PCR结合Real-time qPCR方法检测其p33ING1bmRNA表达的变化,nMSP法分析其p33ING1b启动子甲基化状态的改变,ChIP法检测其p33ING1b乙酰化状态的改变,蛋白质印迹法检测p33ING1b蛋白的表达,MTT法检测细胞的增殖能力。结果曲古抑菌素A及5-氮-2′-脱氧胞苷可逆转结直肠癌细胞株的甲基化及乙酰化状况。2种药物干预后,4种结直肠癌细胞株各组间p33ING1bmRNA表达,差异有统计学意义,HCT116:F=1 690.446,P<0.001;HT29:F=284.474,P<0.001;LOVO:F=2 930.284,P<0.001;COLO205:F=33.540,P<0.001;p33ING1bmRNA蛋白表达差异有统计学意义,HCT116:F=32.606,P<0.001;HT29:F=33.422,P<0.001;LOVO:F=13.975,P<0.01;COLO205:F=7.119,P<0.05,细胞增殖能力差异有统计学意义,HCT116:F=7.327,P<0.05;HT29:F=17.642,P<0.001;LOVO:F=7.035,P<0.05;COLO205:F=9.008,P<0.01。联合使用两种药物对p33ING1bmRNA的表达具有协同作用。结论 p33ING1b基因甲基化和去乙酰化可抑制抑癌基因p33ING1b转录,使用甲基化抑制剂及去乙酰化抑制剂可逆转这一效应,且两者具有协同作用,这为表观基因治疗提供了新的思路。
- 钟武李天煜张磊昌钟世彪何纯刚陈利生
- 关键词：P33ING1B
- 结直肠癌的表观遗传学研究进展被引量：4
- 2010年
- 李天煜陈利生
- 关键词：结直肠癌表观遗传学表观遗传修饰抑癌基因恶性肿瘤癌发病率
- 5-氮-2′-脱氧胞苷及TSA对人结肠癌细胞株HT29 ING1b基因表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的探讨DNA5′CpG岛去甲基化和组蛋白去乙酰化对HT29人结肠癌细胞株ING1b基因启动子区域甲基化、组蛋白乙酰化及其mRNA表达的影响。方法应用特异性DNA甲基转移酶(DNMTs)抑制剂5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-dc,以下简称Aza)及组蛋白去乙酰化酶(HDACs)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)作用人结肠癌细胞株HT29后,用甲基化特异性PCR(MSP)检测该ING1b基因核心启动子区域CpG岛甲基化情况,用染色质免疫沉淀(ChIP)检测其乙酰化组蛋白绑定的DNA情况,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测ING1bmRNA表达。结果HT29人结肠癌细胞株ING1b基因核心启动子区域存在CpG岛半甲基化,且乙酰化水平低,mRNA表达水平低。经Aza及TSA干预后,ING1b基因核心启动子区域CpG岛转为非甲基化,其乙酰化水平增加,ING1b mRNA表达亦比对照组高。结论HT29人结肠癌细胞株ING1b基因5端核心启动子甲基化及乙酰化可能是导致该基因表达沉默的主要原因,Aza逆转HT29人结肠癌细胞株ING1b基因异常甲基化,TSA能较好地提高其组蛋白乙酰化水平,并有效地激活因半甲基化所致ING1b基因沉默的再转录,诱导该基因表达,从而抑制肿瘤细胞生长。
- 李天煜陈利生何纯刚刘家旋凌志安
- 关键词：结肠癌基因表达调控
- 曲古抑菌素A对人结肠癌细胞株Colo205组蛋白乙酰化及ING1b mRNA表达的影响
- 2010年
- 目的:探讨曲古抑菌素A(TSA)对人结肠癌细胞株Colo205组蛋白乙酰化及ING1b mRNA表达的影响。方法:培养人结肠癌细胞株Colo205,对照组(A组)不加TSA干预,实验组分3组(B、C、D组),分别应用组蛋白去乙酰化酶(HDACs)抑制剂TSA50、100、200μg/L的浓度作用于人结肠癌细胞株Clol205,24h后用染色质免疫沉淀(ChIP)方法检测4组Clol205细胞乙酰化组蛋白H3结合的DNA情况,以了解抑癌基因ING1b相关组蛋白H3乙酰化的变化,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ING1b mRNA的表达,均用实时定量PCR方法分析。结果:A组人结肠癌细胞株Colo205组蛋白H3乙酰化水平及ING1b mRNA Ct值为23.25±0.08和23.32±0.05,经TSA干预后,C、D组组蛋白H3乙酰化水平较A组增加(P<0.05),2^(-ΔΔCt)值分别为4.21和4.38,ING1b mRNA表达亦比A组高(P<0.05),2^(-ΔΔCt)值分别为4.52和4.62,组蛋白H3乙酰化水平及ING1b mRNA表达C、D组间无显著性差异(P>0.05),组蛋白H3乙酰化水平及ING1b mRNA表达B组与A组比较无显著性差异(P>0.05),2^(-ΔΔCt)值分别为1.12和1.33。同时观察到C、D组Clol205细胞较A、B组细胞生长明显受抑制。结论:人结肠癌细胞株Colo205组蛋白去乙酰化可能是导致基因ING1b表达沉默的主要原因之一,100μg/L的TsA能较好地提高组蛋白乙酰化水平,并有效地激活去乙酰化所致ING1h基因转录,诱导该基因表达,从而抑制肿瘤细胞生长。
- 李天煜陈利生
- 关键词：结肠癌基因表达调控乙酰化肿瘤抑制
- Madelung病一例
- 2015年
- 患者男，52岁。因发现颈部肿物逐渐增大于2013年9月20日入院。肿物局部无红、热，无压痛等不适，逐渐增大，并围绕颈呈对称性持续生长，致体重增30斤余。同时颈部出现压迫感，转头受限，无伴疼痛、声嘶、呼吸及吞咽困难。
- 钟世彪陈利生韦建宝李振余泽炎
- 关键词：颈部肿物吞咽困难对称性压迫感
- 345例行姑息性结直肠癌手术患者的生存分析被引量：11
- 2015年
- 目的 探讨影响姑息性结直肠癌手术患者预后的相关因素.方法 回顾性分析2007年1月至2011年12月广西医科大学第一附属医院收治的345例行姑息性结直肠癌手术患者的临床资料.根据患者个体情况选择行急诊手术或限期手术,术后辅助治疗包括化疗、放疗或生物治疗.化疗方案包括：FOLFOX4（5-氟尿嘧啶/叶酸＋奥沙利铂）方案、XELOX（卡培他滨＋奥沙利铂）方案、FOLFIRI（5-氟尿嘧啶＋叶酸＋伊立替康）方案.生物治疗包括贝伐珠单克隆抗体及西妥昔单克隆抗体等生物靶向治疗.通过门诊、电话、书信等方式随访.每3个月随访1次,记录患者生存状况.随访时间截至2014年3月1日.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存率的比较和预后单因素分析采用Log-rank检验,多因素分析采用COX风险比例模型.结果 1930例结直肠癌患者中345例行开腹姑息性手术,占17.876％.104例患者急诊手术治疗,其余患者限期手术治疗.术后有178例患者接受辅助治疗,其中85例行FOLFOX4方案,32例行XELOX方案,20例行FOLFIRI方案,17例行放射治疗,24例行生物靶向治疗.本组患者中,7例患者围术期死亡,其余患者随访时间为3.0 ～82.0个月,中位随访时间为14.0个月.患者1、3、5年生存率为分别49.57％、11.88％、6.38％,平均生存时间为22.6个月.单因素分析结果显示：CEA、肠梗阻、原发灶切除、腹膜种植、远处器官转移、淋巴结转移、肿瘤分化程度、术后辅助治疗是影响行姑息性结直肠癌手术患者预后的相关因素（x2=3.742,18.795,37.641,13.470,4.228,5.835,4.108,6.875,P＜0.05）.多因素分析结果显示：肠梗阻、原发灶未切除、腹膜种植、肿瘤分化程度为低未分化、术后未行辅助治疗是影响行姑息性结直肠癌手术患者预后的独立危险因素（RR=1.674,2.273,1.947,1.582,1.342,95％可信区间：1.193 ～2.485,1.646 ～4.376,1.497～3.587,1.184～2.382,1.032 ～2.074,P＜0.05）
- 钟世彪钟武张磊昌陈利生
- 关键词：结直肠肿瘤姑息性切除预后
- p33生长抑制基因1b启动子甲基化检测方法的建立与评价被引量：5
- 2009年
- 琼脂糖珠包埋DNA修饰结合巢式．甲基化特异性PCR（nMSP）可提高检测的敏感性。我们应用该方法检测大肠癌细胞株中p33生长抑制基因1b（p33ING1b）启动子甲基化。
- 何纯刚陈利生曹云飞高枫
- 关键词：启动子甲基化甲基化检测甲基化特异性大肠癌细胞株琼脂糖
- 结直肠癌患者术前CEA、CA19-9浓度与临床病理特征及预后的关系被引量：35
- 2015年
- 目的:探讨结直肠癌患者术前CEA、CA19-9浓度与临床病理特征及预后的关系。方法:收集2007年1月—2008年7月收治并行根治性手术的356例结直肠癌患者的临床病理资料,分析血清CEA、CA19-9与临床病理特征及生存率的关系。结果:单因素分析结果显示,血清CEA浓度升高与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、病理类型、肝转移、周围脏器受累有关(均P<0.05);血清CA19-9浓度升高与肿瘤浸润深度、腹膜转移、肝转移有关(均P<0.05)。生存分析结果显示,血清CEA浓度升高患者生存率低于血清CEA浓度正常患者(P<0.05);血清CA19-9浓度升高患者与血清CA19-9浓度正常患者生存率差异无统计学意义(P>0.05);血清CEA、CA19-9浓度同时升高患者与血清CEA升高或血清CA19-9升高患者生存率差异无统计学意义(均P>0.05),但明显低于血清CEA、CA19-9均正常患者(P<0.05)。结论:血清CEA、CA19-9浓度同时升高可能是结直肠癌的晚期事件,提示患者预后不良。
- 钟武张磊昌钟世彪江志远陈利生
- 关键词：癌胚抗原CA-19-9抗原预后
- 散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况及其意义被引量：3
- 2014年
- 目的检测散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况,探讨p33ING1b在散发性结直肠癌中转录抑制的可能机制。方法选择2008年10月—2012年3月在广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科住院的散发性结直肠癌患者63例,收集其癌组织及相应癌旁组织切除标本;同时选择在我院行吻合器痔上黏膜环切术(PPH)患者13例,收集其术后痔上黏膜组织。采用巢式-甲基化特异性PCR(nMSP法)检测p33ING1b启动子甲基化情况,RT-PCR检测癌组织p33ING1b mRNA表达水平;采用5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-dC)对人结直肠癌细胞株DLD-1、Caco-2进行去甲基化干预实验。结果癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率为82.5%(52/63),癌旁组织为34.2%(27/63),痔上黏膜组织未检测出p33ING1b启动子甲基化,癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率高于癌旁组织和痔上黏膜组织(χ2=21.21,P<0.001;χ2=33.98,P<0.001)。不同性别、年龄、肿瘤位置、分化程度及有无淋巴结转移、远处转移患者癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);不同Dukes分期患者癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。p33ING1b启动子甲基化癌组织p33ING1b mRNA相对表达量为(0.62±0.15),低于p33ING1b启动子非甲基化癌组织的(0.75±0.17)(t=2.553,P<0.05)。5-aza-dC干预后,人结直肠癌细胞株DLD-1、Caco-2的p33ING1b启动子甲基化均被逆转,且p33ING1b mRNA相对表达量较干预前升高(P<0.05)。结论 p33ING1b启动子甲基化与散发性结直肠癌存在关联,并可能通过抑制p33ING1b mRNA的表达参与结直肠癌的发生和发展。
- 张磊昌何纯钢曹云飞钟武钟世彪龙军先黄永红陈利生
- 关键词：结直肠肿瘤P33ING1B甲基化脱氧胞苷
- 腹腔镜辅助直肠癌手术中转开腹的危险因素分析及预测模型建立被引量：13
- 2014年
- 目的分析腹腔镜辅助直肠癌手术中转开腹的相关危险因素,建立概率预测模型,以指导临床诊疗。方法收集2005年12月—2013年12月广西医科大学第一附属医院由同一手术团队完成腹腔镜辅助直肠癌手术患者1 037例的临床资料,127例行中转开腹手术,中转开腹率为12.25%。采用单因素分析和多因素Logistic回归分析方法,探讨影响中转开腹的危险因素,并用判别分析方法建立概率预测模型。结果 1 037例腹腔镜手术中,127例中转开腹为开腹组,余910例为腹腔镜组;开腹组手术时间、术后住院时间、术后开始进食时间均长于腹腔镜组(P<0.05),开腹组术中失血量多于腹腔镜组(P<0.05),开腹组术后肠梗阻和切口感染率高于腹腔镜组(P<0.05),两组吻合口瘘和肺部感染发生率差异无统计学意义(P>0.05)。单因素分析结果显示:肿瘤位置、腹部手术史、肿瘤大小、BMI、TNM分期、是否存在梗阻、侵犯周围器官、远处转移与中转开腹相关(P<0.05);多因素Logistic回归模型结果显示,腹部手术史、肿瘤大小、BMI、TNM分期、梗阻、侵犯周围器官进入回归模型(P<0.05);建立腹腔镜辅助直肠癌手术中转开腹的概率预测模型:P=eY/(1+eY),Y=-3.873+3.231×X1+1.025×X2+1.866×X3+0.982×X4+3.137×X5+2.381×X6,灵敏度为74.02%,特异度为76.04%。结论腹部手术史、肿瘤大小、BMI、TNM分期、梗阻、侵犯周围器官是腹腔镜辅助直肠癌手术中转开腹的危险因素,术前正确评估腹腔镜辅助直肠癌手术中转开腹的危险因素,可减少中转开腹率。
- 钟武张磊昌钟世彪江志远陈利生
- 关键词：直肠肿瘤腹腔镜检查
