深圳市科技计划项目(200811)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：黄德新陈少娟章刚王峰卢海蓉更多>>
- 相关机构：深圳市慢性病防治中心深圳大学更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 梅毒螺旋体重组抗原的表达及在梅毒血清学诊断中的应用被引量：3
- 2009年
- 目的:克隆、表达梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白TpN47、TpN17、TpN44.5和TpN15,建立双抗原夹心ELISA法,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用。方法:应用聚合酶链反应法(PCR)从Tp全基因组中扩增4个目的片段,克隆到载体pET-HT-JKM中,在BL21(DE3)plysS菌中诱导表达,Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,辣根过氧化物酶标记,双抗原夹心酶联免疫吸附法检测人血清中的特异性IgM和IgG抗体。结果:成功表达了4种重组蛋白用作ELISA包被和酶标抗原检测国家Tp参比血清,特异性和灵敏度均为100%;检测385份临床血清样本,结果与TPPA法相比符合率达到99%(P<0.01),灵敏度和特异性分别为98.2%(162/165)和99.5%(219/220)。结论:表达的4种重组抗原具有很好的生物活性,为理想的梅毒的血清学诊断用抗原。以这4种表达蛋白为基础建立的双抗原夹心ELISA法灵敏度高,特异性好,而且方法简单,结果客观,易于自动化操作,值得临床大力推广。
- 卢海蓉王晓红陈少娟王峰章刚黄德新
- 关键词：重组蛋白梅毒螺旋体
