北京市科技新星计划(2005B39)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：张伟安莹屈思萌宋旭东董冰更多>>
- 相关机构：首都医科大学内布拉斯加大学更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 花生四烯酸参与人晶状体上皮细胞中超氧阴离子的生成
- 2008年
- 目的以花生四烯酸为刺激因子,研究人晶状体上皮细胞中是否存在超氧阴离子生成体系。设计实验研究。研究对象人晶状体上皮细胞B3(HLE B3)。方法用花生四烯酸及其衍生物刺激HLE B3细胞,超氧阴离子用化学发光法定量检测。用超氧阴离子歧化酶和山梨醇与细胞预培养作为阴性对照;以3%乙醇(花生四烯酸及其衍生物的溶剂)刺激细胞作基线;测定超氧阴离子前,所有抑制剂先与细胞预培养30分钟。花生四烯酸对丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)磷酸化影响的时间依赖实验和剂量依赖实验用蛋白质印迹杂交进行检测。主要指标超氧阴离子的含量,MAPK磷酸化的变化。结果30～150mM花生四烯酸能刺激HLE B3细胞迅速产生超氧阴离子,超氧阴离子歧化酶(SOD)和山梨醇抑制了该反应,尼克酰胺二磷酸腺苷(NADPH)氧化酶抑制剂DPI也抑制了超氧阴离子的产生。花生四烯酸的衍生物二十碳二烯酸、二十碳三烯酸以及硬脂酸、亚油酸不能引起超氧阴离子的产生。环氧合酶、细胞色素p450的抑制剂对超氧阴离子的产生无影响,提示花生四烯酸这两条代谢途径不参与超氧阴离子的生成。脂氧合酶,尤其是5-脂氧合酶的抑制剂完全阻断了该反应。30～150mM花生四烯酸能在2.5～30分钟瞬间激活ERK和JNK,并有剂量和时间依赖性。结论抑制超氧离子的生成可能是抑制品状体上皮细胞增殖、预防后发发障的新途径。
- 董冰安莹张伟Marjorie Lou
- 关键词：花生四烯酸超氧阴离子晶状体
- NADPH氧化酶参与人晶状体上皮细胞增殖及其表达
- 2009年
- 目的观察烟酰胺二磷酸腺苷(NADPH)氧化酶的抑制剂能否抑制人晶状体上皮细胞增殖,探讨NADPH氧化酶亚单位NOX的同源异构体在人晶状体上皮细胞mRNA的表达情况。设计实验性研究。研究对象人晶状体上皮细胞永生系(SRA01/04)。方法实验分为4组,SRA01/04中加入表皮生长因子(EGF)(EGF组),加入NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘(DPI)(DPI组),先后加入DPI和EGF(DPI+EGF组),不加入上述物质为对照组。利用酶标仪和活细胞计数CCK-8试剂盒检测各组人晶状体上皮细胞OD450值。用RT-PCR方法检测NOX的同源异构体在SRA01/04中的表达,将RT-PCR产物测序,利用NCBIBLAST软件对测序结果与cDNA进行序列对比。主要指标人晶状体上皮细胞的OD450值,NOX的同源异构体表达情况及其与人其他组织的序列对比。结果加入CCK-83.5小时后,EGF组比对照组OD450值升高了12.0%(P=0.000);DPI组比对照组OD450值下降了25.5%(P=0.000);DPI+EGF组OD450值比EGF组降低了26.1%(P=0.000)。RT-PCR结果表明,NOX蛋白的5种同源异构体[包括NOX1、NOX2(gp91phox)、NOX3、NOX4、NOX5]的mRNA在SRA01/04中均有表达。人晶状体上皮细胞中的NOX1-5的序列与人其他组织的相似性分别为100%、100%、99.7%、100%、100%。结论NADPH氧化酶可能促进人晶状体上皮细胞的增殖;NOX同源异构体NOX1、NOX2、NOX3、NOX4、NOX5的mRNA在人晶状体上皮细胞SRA01/04中均有表达,其中NOX1明显弱于其他四种NOX。
- 屈思萌张伟安莹宋旭东
- 关键词：晶状体上皮细胞增殖
- NADPH氧化酶参与兔晶状体上皮细胞中超氧阴离子的生成被引量：1
- 2007年
- 目的:观察兔晶状体上皮细胞内是否存在内源性超氧阴离子生成机制。方法:用不同浓度的花生四烯酸作用于兔晶状体上皮细胞N/N1003A,利用化学发光检测仪测定超氧阴离子的浓度变化,观察超氧阴离子歧化酶(Superoxide anion dismutase,SOD)和NADPH氧化酶抑制剂DPI对超氧阴离子的影响;用RT-PCR方法检测NADPH氧化酶(NADPH oxidase)亚单位NOX家族在N/N1003A细胞中的表达。结果:花生四烯酸可以刺激兔晶状体上皮细胞N/N1003A迅速生成超氧阴离子,该活性氧能被SOD有效清除,黄素蛋白抑制剂DPI能显著抑制N/N1003A细胞生成超氧阴离子。RT-PCR结果表明,NOX蛋白的5种同源异构体[包括NOX1、NOX2(gp91phox)、NOX3、NOX4、NOX5]的mRNA在兔晶状体上皮细胞中都有表达。结论:NADPH氧化酶参与兔晶状体上皮细胞中超氧阴离子的产生,NOX蛋白5种同源异构体的mRNA都在N/N1003A细胞中表达。眼科学报2007;23:199-204.
- 屈思萌安莹宋旭东张伟Marjorie Lou
- 关键词：晶状体超氧阴离子NADPH氧化酶
