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国家自然科学基金(81172337)
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高尔基磷酸化蛋白-3基因过表达对胰腺癌细胞迁移的影响
2013年
目的构建高尔基磷酸化蛋白-3(GOLPH-3)基因过表达的胰腺癌稳定细胞株BxPC-3,观察GOLPH-3基因过表达对胰腺癌细胞迁移能力的影响。方法制备逆转录病毒pMSCV—GOLPH-3和pMSCV—vector,并分别感染胰腺癌细胞株BxPC-3,用0.5mg/L嘌呤霉素筛选得到GOLPH-3过表达及空载对照稳定细胞株。Westernblot技术在蛋白水平上检测BxPC-3稳定细胞株中GOLPH.3及β-连环蛋白(13-catenin)的蛋白表达水平,细胞迁移实验(Transwell)检测GOLPH-3对胰腺癌细胞迁移能力的影响。结果胰腺癌细胞BxPC-3表达GOLPH-3蛋白;空白对照组、空载对照组及过表达组的GOLPH.3蛋白相对含量分别为0.32±0.13、0.46±0.12、1.02±0.30,过表达组较空载对照组上调50.9%,其差异有统计学意义(P〈0.05)。β-catenin蛋白相对含量分别为0.42±0.06、0.63±0.34、1.77±0.19,与空载对照组比较,上调GOLPH.3能明显促进过表达组β-catenin蛋白的表达,且上调64.4%(P〈0.01)。每200倍随机计数5个视野下空白对照组、空载对照组、过表达组穿膜胰腺癌细胞数分别为(14.33±6.30)个、(16.25±10.45)个、(83.08-4-62.57)个,过表达组的迁移细胞数明显多于空载对照组(P〈0.001),而两对照组间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论上调GOLPH-3能影响胰腺癌细胞的迁移能力,GOLPH-3过表达增强胰腺癌细胞的迁移机制可能是上调Wnt/β-eatenin信号通路B—eatenin表达的结果。
张娈景
夏金堂
简卫华
陈连周
刘龙山
李雯
汪谦
关键词:
胰腺癌
细胞迁移
Β-连环蛋白
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