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国家科技重大专项(2009zxlo004-801)

作品数:1 被引量:0H指数:0
相关作者:李秀华杜润蕾王素婷宋爱京梁米芳更多>>
相关机构:中国药品生物制品检定所中国疾病预防控制中心病毒更多>>
发文基金:国家科技重大专项更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇人类免疫
  • 1篇人类免疫缺陷
  • 1篇人类免疫缺陷...
  • 1篇人类免疫缺陷...
  • 1篇人源
  • 1篇噬菌体
  • 1篇噬菌体展示
  • 1篇缺陷病
  • 1篇免疫缺陷
  • 1篇免疫缺陷病
  • 1篇免疫缺陷病毒
  • 1篇菌体
  • 1篇抗体
  • 1篇基因
  • 1篇基因工程抗体
  • 1篇工程抗体
  • 1篇HIV-1
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇中国药品生物...
  • 1篇中国疾病预防...

作者

  • 1篇王佑春
  • 1篇许四宏
  • 1篇梁米芳
  • 1篇宋爱京
  • 1篇王素婷
  • 1篇杜润蕾
  • 1篇李秀华

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2010
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
人源抗人类免疫缺陷病毒1型基因工程抗体的初步研究
2010年
目的 构建噬菌体抗体库,筛选抗HIV-1抗体Fab,并对其进行鉴定.方法 采集无症状、HIV-1抗体滴度较高的HIV-1感染者全血,分离淋巴细胞并提取总RNA,经RT-PCR扩增人轻链基因和重链Fd基因.运用噬菌体展示技术,构建噬菌体抗体库,经过3轮"吸附-洗脱-富集"筛选,将获得的克隆进行诱导表达,表达产物经ELISA检测,筛选阳性抗HIV-1 Fab克隆 对获得的克隆进行抗体基因序列测定并分析序列同源性和互补决定区(CDRs) 对获得的阳性克隆与轻链克隆CL8进行链置换并检测链置换前后抗体亲和力的变化 对获得的克隆进行诱导表达及纯化,同时进行中和试验.结果 构建了库容为8×106的噬菌体抗体库 经3轮筛选,获得11株抗HIV-1 Fab克隆,测序和序列分析显示,获得了 10条轻链和8条重链,它们和已经申请专利的部分HIV-1 gp120抗体的基因序列有较高的同源性(轻链同源性为60%~90% 重链同源性为71%~85%) CDRs分析显示,11株抗体CDRHs均比较长(12~20aa) 链置换后的抗体亲和力并没有明显的改进 Fab诱导表达量均大于10 mg/L,利用重组HIV-1假病毒系统进行中和试验,结果显示,3株Fab具有一定的中和作用.结论 成功获得抗HIV-1抗体Fab,为进一步对其进行研究和应用奠定基础.
许四宏杜润蕾王素婷宋爱京李秀华梁米芳王佑春
关键词:HIV-1基因工程抗体噬菌体展示
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