陕西省教育厅科研计划项目(12JS029) 作品数:6 被引量:24 H指数:3 相关作者: 程佳 祁珊珊 冯自立 吴婕 张波 更多>> 相关机构: 陕西理工大学 西安交通大学 更多>> 发文基金: 陕西省教育厅科研计划项目 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
丹参酮Ⅱ_A联合维生素D_3对维甲酸诱导骨质疏松大鼠骨组织的影响 被引量:9 2017年 目的:探讨丹参酮Ⅱ_A(TanshinoneⅡ_A)联合维生素D_3(Vitamin D_3,Vit D_3)对维甲酸诱导的雌性骨质疏松大鼠骨组织的影响,观察二者联合给药是否优于丹参酮Ⅱ_A单独给药。方法:12周龄SPF级健康雌性SD大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、丹参酮Ⅱ_A组、丹参酮Ⅱ_A+Vit D_3组。除正常对照组外,其余各组每日给予维甲酸80 mg/kg灌胃造模21 d。造模21 d后除模型组外,其余各组进行给药,给药70 d后,检测各组大鼠体质量,测定血清雌二醇(Estradiol,E_2)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、破骨细胞异化因子(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、血钙、血磷含量。采集股骨干骺端组织进行石蜡包埋、HE染色,并用病理图像分析系统进行组织形态计量学测定。结果:模型组大鼠血清E_2含量较正常对照组显著降低,丹参酮Ⅱ_A与联合用药组较模型组显著升高。模型组血清OPG含量较正常对照组显著降低,联合用药组血清OPG含量较模型组显著升高,RANKL、ALP、血钙、血磷含量模型组较正常对照组显著升高,联合用药组较模型组显著降低。通过股骨干骺端组织形态计量学分析显示,联合用药组骨小梁厚度、骨小梁间距、骨小梁面积百分率均优于丹参酮Ⅱ_A组。结论:丹参酮Ⅱ_A+Vit D_3对维甲酸诱导骨质疏松大鼠骨组织的修复作用优于丹参酮Ⅱ_A单独给药。 雒志恒 祁珊珊 吴婕 冯自立 王永吉关键词:维生素D3 维甲酸 骨组织 植物雌激素 葛根素和丹参酮ⅡA对维甲酸诱导骨质疏松大鼠生殖系统的修复作用 被引量:4 2017年 目的探讨和比较葛根素(puerarin,PUE)、丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA)两种植物雌激素对维甲酸诱导的雌性骨质疏松大鼠生殖系统的修复作用。方法 12周龄SPF级健康雌性SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、葛根素组[50 mg/(kg·d)]、丹参酮ⅡA组[200 mg/(kg·d)]、苯甲酸雌二醇阳性对照组[40μg/(kg·d)]。除正常组外,其余各组每日给予维甲酸80mg/(kg·d)灌胃,建模21 d。建模21 d后除模型组外,其余各组进行给药,给药70 d后,检测各组大鼠体重,生殖系统(子宫、阴道、卵巢)湿重,ELISA测定血清雌二醇(estradiol,E2)含量,采集子宫、阴道组织进行石蜡包埋、HE染色,观察子宫及阴道形态,并用病理图像分析系统进行组织形态计量学测定。结果通过生殖系统脏器指数计算、血清雌二醇检测以及子宫和阴道组织形态计量学分析显示,模型组脏器指数、血清E2含量较正常组显著降低(P<0.05),模型组大鼠子宫腔径、管径厚度、上皮厚度、肌层厚度、腺体数量较正常组显著减少(P<0.01),阴道出现不同程度萎缩,阴道上皮厚度较正常组显著降低(P<0.01);葛根素组上述指标较模型组显著增加(P<0.05);丹参酮ⅡA组上述指标较模型组显著增加(P<0.01);丹参酮组与葛根素组相比,丹参酮组子宫管径厚度,阴道上皮厚度,显著高于葛根素组(P<0.01)。结论葛根素和丹参酮ⅡA均对维甲酸诱导的骨质疏松大鼠生殖系统损伤具有修复作用,且丹参酮ⅡA对生殖系统的修复作用优于葛根素。 雒志恒 祁珊珊 冯自立 吴婕 王永吉关键词:葛根素 维甲酸 骨质疏松 生殖系统 鉴定活性维生素D细胞模型的构建 2017年 本文构建了维生素D受体(Vitamin D receptor,VDR)融合蛋白的真核表达载体,并获得稳定表达VDR融合蛋白的细胞体系,为含有活性维生素D食品及药物的鉴定建立成熟的细胞模型。设计并合成特异性引物扩增VDR基因,将扩增产物克隆至pcDNA3.1/His真核表达载体上,将其转染HEK293细胞。采用免疫沉淀(IP)技术鉴定VDR融合蛋白的表达效率。在构建pcDNA 3.1/VDR-His成功的基础上,用活性1,25(OH)_2D_3处理转染的细胞,收集总蛋白和m RNA,分别利用免疫印迹(Western blot,WB)和实时定量PCR(q RT-PCR)技术,检测VDR融合蛋白以及其下游基因CYP24A1基因的表达。IP结果证实VDR融合蛋白具有转录活性。WB和q RT-PCR结果显示,1 nmol/L浓度的活性1,25(OH)_2D_3处理转染细胞能有效激活VDR蛋白的表达,以及显著增强CYP24A1的m RNA表达(p<0.01)。利用该细胞模型检测维生素D类药物的活性,结果显示不同药物中维生素D的活性与药物种类有关。pcDNA3.1/VDR-His融合表达载体构建成功,并以此构建了鉴定活性维生素D的细胞模型。 程佳 王永吉关键词:维生素D受体 融合蛋白 细胞模型 维生素D功能的再认识 被引量:8 2014年 维生素D(vitamin D)发现于20世纪20年代,它在临床上的成功应用彻底解决了少儿的佝偻病(rickets)和成年人的软骨症(osteomalacia)。对其结构解析发现,它属于脂溶性甾醇化合物。研究显示,维生素D不仅能调节机体内钙磷代谢的平衡,影响骨骼生长,而且还能调节机体的免疫功能及细胞增殖分化。由于维生素D具有多种生理功能,因此它的缺乏与多种人类疾病的产生和发展有关。在维生素D经典功能的基础上集中讨论了维生素D的新功能,尤其是在甲状旁腺激素合成、糖尿病以及癌症方面的作用。 程佳 王永吉关键词:钙 维生素D受体 甲状旁腺激素 疾病 维生素D受体检测方法的研究进展 被引量:2 2015年 维生素D不仅能够调节钙磷代谢,影响骨的生长,还能调节机体的免疫活性和细胞生长与分化。维生素D的功能是通过激活细胞核内的维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)来实现的,因此,VDR是靶细胞响应维生素D反应的决定因素。VDR高表达的组织,如肠、肾脏、骨和甲状旁腺等,是维生素D的主要靶组织。过去40年中,为了测定VDR在机体各个组织中的分布,建立了多种检测方法。然而,这些测定方法的应用也产生了一些具有争议的结果,这可能是由检测方法的特异性不同导致的。近年来,本研究团队建立了一套特异性强、灵敏性高的免疫测定方法,并将其成功应用于测定组织中VDR。本文将对这些检测方法的的优点和各自的局限性进行讨论,并指出测定方法的选择是成功鉴定靶组织中VDR的关键。 李游山 祁珊珊 王永吉关键词:维生素D受体 钙磷代谢 免疫组织化学 骨质疏松患者FGF23与Crosslaps血清浓度检测与分析 被引量:1 2018年 目的:探讨骨质疏松症(Osteoporosis,OP)患者外周血成纤维生长因子23(Fibrobalst growth factor-23,FGF23)、Ⅰ互型胶原交联C末端肽(Crosslaps)与25-(OH)D代谢水平与骨质疏松症的关系.方法:选择骨质疏松女性患者32名,年龄48~90岁(OP组),与21名健康人年龄31~50岁(对照组).采用酶联免疫吸附法检测外周血FGF23,Crosslaps及25-(OH)D水平.采用全自动血液生化分析仪检测血钙、血清无机磷、碱性磷酸酶(Alkaline phosphates,ALP)水平,并对OP患者25-(OH)D与FGF23、Crosslaps、血钙、血磷的相关性进行分析.对53名受试者进行骨密度(Bone mineral density,BMD)测量及医学影像学检测.采集OP患者及健康人股骨骨样进行石蜡包埋、切片、H&E染色并观察,采用病理学图像分析系统进行形态计量学分析.结果:与对照组比较,OP组患者血清中FGF23、Crosslaps水平显著升高(P<0.05);OP患者血清中25-(OH)D水平与FGF23相关系数为-0.012 2,与Crosslaps相关系数为-0.231 7;通过骨组织形态计量学分析,OP患者骨小梁平均厚度、骨小梁面积百分率较对照组显著减少(P<0.05),OP组骨小梁间距较对照组显著增大(P<0.05).OP患者左侧股骨颈(Femeralneck,FN),Ward's三角(Ward's)骨密度值与对照组均有显著减少(P<0.05).通过影像学检测发现OP组X光片透光度有所增加,骨小梁变细,骨皮质变薄.结论:骨质疏松症患者血清中FGF23,Crosslaps因子水平与25-(OH)D水平存在一定相关性.提示其在骨代谢所引起的血清水平变化,以及三者之间的关系可为骨质疏松症的诊断和治疗提供参考. 雒志恒 李雅莉 王永吉 吴婕 张波关键词:骨质疏松 形态计量学