国家自然科学基金(31070813)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：包琦锋谢喜秀许雪梅张婷刘艳春更多>>
- 相关机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒(HPV)58型中和单克隆抗体的制备及初步应用被引量：1
- 2012年
- 人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)58型是宫颈癌的主要诱因之一.HPV58在亚洲地区宫颈癌组织中的检出率仅次于HPV16/18.HPV58中和单克隆抗体可用于HPV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的研究,并为病毒感染入侵机制的研究提供实验材料.本研究采用HPV58 L1 VLP免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞进行杂交瘤细胞的制备,通过VLP-ELISA和假病毒中和实验筛选杂交瘤细胞株;经rProtein A纯化阳性杂交瘤细胞培养上清获得单抗;采用ELISA测定型别特异性中和单抗的亲和力,采用相加实验及变性VLP-ELISA分析单抗识别表位的性质;选取高亲和力单抗建立定量分析HPV58 L1 VLP的ELISA方法.获得了2株HPV58特异性中和单抗XM-22和XM-23,亲和常数分别为2.7×107mol-1.L和1.9×106mol-1.L,二者识别表位可能不同.同时获得2株具有交叉中和活性的单抗XM-21和XM-24,除可较高水平中和HPV58外,还可分别交叉中和亲缘关系较远的HPV18和HPV6.以XM-22建立的ELISA方法定量分析HPV58 L1 VLP的检测范围为0.05μg/mL～0.40μg/mL.本研究建立的ELISA方法可用于HPV58 L1 VLP疫苗生产的质量控制研究,获得的4株具有不同特点的中和单抗可用于HPV58感染入侵机制的研究.
- 刘艳春张婷谢喜秀包琦锋许雪梅
- 关键词：ELISA
