广东省自然科学基金(04105449)
- 作品数:4 被引量:21H指数:2
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- BPI_(23)-haFGF融合蛋白在毕赤酵母X-33中的分泌表达及活性鉴定被引量:1
- 2009年
- 将BPI23-haFGF融合基因克隆到酵母表达载体pPICZαA中,构建出含BPI23-haFGF融合基因的重组质粒pPICZαA-BPI23-haFGF。通过电击将经SacⅠ酶切线性化的pPICZαA-BPI23-haFGF质粒转化到巴斯德毕赤酵母X-33菌中,并通过抗性与表型筛选、PCR鉴定获得高效的工程菌。收集表达上清进行SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明,在43KD有与预期大小相符的条带,占上清总蛋白的50%以上。亲和层析纯化后的融合蛋白BPI23-haFGF纯度约90%,体外活性实验结果,纯化产物具有杀死革兰氏阴性菌及促进NIH3T3细胞增殖的双重功能。
- 马艳朱家勇金小宝彭海英王艳
- 关键词:分泌表达活性鉴定
- 杀菌/通透性增加蛋白的研究现状及展望被引量:5
- 2006年
- 杀菌/通透性增加蛋白(BPI)是一种主要存在于中性粒细胞内的阳离子抗菌蛋白,具有杀菌及中和内毒素作用,在革兰阴性菌感染的治疗方面有很好的应用前景。本文主要对BPI分子结构、生物学功能、作用机制及临床应用等方面的研究进展进行综述。
- 彭海英朱家勇
- 关键词:革兰阴性菌内毒素
- 酸性成纤维细胞生长因子及其在创伤愈合中的应用被引量:14
- 2006年
- 马艳金小宝朱家勇
- 关键词:成纤维细胞生长因子创伤愈合酸性外源性生长因子愈合质量
- BPI_(23)-haFGF融合蛋白的鉴定及其生物活性研究被引量:1
- 2008年
- 目的研究BPI23-haFGF融合蛋白的生物学活性。方法将已构建的酵母重组表达菌株pPICZαA-BPI23-haF-GF/X-33进行甲醇诱导表达,通过亲和层析纯化和冻干浓缩后,观察融合蛋白BPI23-haFGF对细菌、NIH3T3细胞以及小鼠烫伤模型的作用。结果获得纯度约90%的融合蛋白BPI23-haFGF,BPI23-haFGF具有杀菌及促增殖的双重功能,BPI23-haFGF促增殖率与HaFGF标准品相当,当其浓度为0.40g/L时,促NIH3T3细胞增殖率最高(88.7%);在小鼠烫伤模型中,用药组比阴性对照组提前2~3d愈合。结论融合蛋白BPI23-haFGF能够改善小鼠烫伤创面的愈合,为其在临床上的应用奠定了基础。
- 马艳朱家勇金小宝刘雷山王艳李娟兰
- 关键词:杀菌促增殖烫伤愈合