国际科技合作与交流专项项目(2008DFA32080)
- 作品数:7 被引量:79H指数:3
- 相关作者:王欣刘伟董世雷皮雄娥谢秀枝更多>>
- 相关机构:浙江省农业科学院内蒙古工业大学浙江师范大学更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- iTRAQ技术及其在蛋白质组学中的应用被引量:63
- 2011年
- 近年来随着蛋白质组学的迅速发展,其相应的方法学研究也取得了巨大的进步,一系列新技术融入了蛋白质组学研究中,极大地促进了这门学科的发展.相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术与高度敏感性和准确性的串联质谱及多维液相色谱联用技术已成为蛋白质定性和定量研究的主要工具之一.该技术可对复杂样本、细胞器、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究,具有较好的定量效果、较高的重复性.由于其能够同时对多达8种样品进行标记分析,故在生命科学的各个领域得到了广泛的应用.本文对iTRAQ的原理、实验流程、优缺点及近几年的应用进展进行综述.
- 谢秀枝王欣刘丽华董世雷皮雄娥刘伟
- 关键词:蛋白质组学串联质谱生物标记物
- 抗菌肽及其应用前景概述被引量:8
- 2011年
- 抗菌肽是生物体产生的一种具有抗菌活性的多肽类物质,它对细菌、真菌和病毒等都具有明显的杀伤作用。抗菌肽有望开发成为防治人和动物疾病的药物,应用前景广阔。文章对抗菌肽的结构特征、作用机制及应用前景进行了综述,以期为抗菌肽的更深层次的研究与应用提供参考。
- 董世雷刘伟谢秀芝YU Hong-wei王欣
- 关键词:抗菌肽结构特征
- 噬菌体及其内溶素的应用研究进展被引量:5
- 2010年
- 抗生素的滥用使越来越多的病原菌产生抗药性,因此寻求新的抗菌素已经变得极为迫切。噬菌体以及噬菌体编码的内溶素的发现和应用,为耐药性细菌的治疗和预防开辟了新的途径。文章综述了近几年噬菌体和内溶素的研究进展及其应用。
- 刘伟王学琴董世雷朱立颖王欣
- 关键词:抗性噬菌体病原菌
- 抗菌肽Caseicin A氨基酸排列顺序改变对其抑菌活性的影响被引量:2
- 2013年
- Caseicin A是一种细菌发酵生产酪蛋白酸钠时产生的次级代谢产物,目前已有报道证明其对革兰氏阴性和阳性致病菌具有一定的抑菌活性。本试验通过对Caseicin A的氨基酸进行重排,得到了比原始抗菌肽抑菌活性更高的突变体。结果表明,改变抗菌肽氨基酸的排列顺序会引起其抗菌活性的变化,但对于不同的受试菌具有不同的影响。
- 谢秀枝刘丽华皮雄娥刘伟陈荣庆王欣
- 关键词:酪蛋白抑菌活性最小抑菌浓度
- 大肠杆菌外膜蛋白酶基因OmpT的克隆及表达被引量:1
- 2011年
- OmpT(Outer-membrane proteases T)是革兰氏阴性细菌分泌到细胞表面具有丝氨酸蛋白酶活性的一种重要蛋白。利用大肠杆菌OmpT降解抗菌肽特性来筛选和改造新型抗菌肽,可以为开发抗OmpT蛋白酶水解新抗菌肽序列提供新的思路和创造条件。根据大肠杆菌外膜蛋白酶OmpT的基因序列设计一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法,从大肠杆菌K12基因组中扩增获得一段为954 bp的序列,测序结果显示此序列与已公布序列同源性达99.99%。将其序列定向克隆到原核表达载体pET28a上构建重组表达质粒pET28a-OmpT。经IPTG诱导后,在表达宿主菌中特异性的表达出分子量约为36 kDa且具有生物活性的OmpT蛋白。生长曲线试验显示,抗菌肽LL37对带重组表达质粒pET28a-OmpT的大肠杆菌生长没有影响,而对照组的生长明显受到抗菌肽的抑制作用。
- 董世雷刘伟朱立颖王学琴于宏伟王欣
- 关键词:OMPT抗菌肽
- 抗菌肽在养猪生产中的应用
- 2013年
- 当今我国饲料质量安全水平整体逐步提高,但仍有个别饲料企业违法添加违禁物质、饲料配方不合理、掺杂使假等,更有甚者,一些企业片面夸大产品功效,拿枯草芽孢杆菌添加剂来说,枯草杆菌并不能包治百病,只是能够改善肠道微生态,不能完全取代抗生素的功效。本文就目前抗菌肽尤其是枯草芽孢杆菌产抗菌肽在养猪业上的应用进行综述,以期能够给养殖户和企业提供参考。
- 刘伟张蕴才尹业师王欣
- 关键词:抗菌肽养猪生产枯草芽孢杆菌饲料质量安全肠道微生态
- 新型抗菌蛋白内溶素在大肠杆菌中的融合表达与纯化
- 2014年
- 抗菌蛋白E17G是一种通过基因改造获得的高效杀菌蛋白。为高效表达抗菌蛋白E17G并减少E17G的抗菌活性对大肠杆菌宿主菌的致死作用,将E17G基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建的重组原核表达载体pGEX-6P-1-E17G在低温下经IPTG诱导,E17G蛋白在大肠杆菌BL21中以GST-E17G融合蛋白的形式表达,采用GST亲和层析纯化和收集GST-E17G融合蛋白。SDS-PAGE和Western blotting检测结果显示,GST-E17G能在大肠杆菌中正确表达,为进一步研究E17G抗菌蛋白的生物学活性奠定了基础。
- 李佳刘伟王华严成其王欣陈剑平
- 关键词:大肠杆菌纯化