国家自然科学基金(30871231)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 烟草微丝结合蛋白Fimbrin-ABD1结构域的表达及纯化
- 2011年
- 微丝骨架在细胞生命活动中发挥着重要作用,微丝结合蛋白通过调控微丝骨架达到调节细胞生理过程的作用,Fimbrin是重要的微丝结合蛋白,目前对其调控机制还不清楚。以烟草Fimbrin基因为模板,首先通过PCR技术获得了其肌动蛋白结合域(actin-binding domain,ABD1)基因,随后构建了蛋白表达载体pET28a-Fimbrin-ABD1,经IPTG诱导获得了Fim-brin-ABD1包涵体,通过摸索包涵体复性的条件得到了有活性Fimbrin-ABD1结构域,并对其功能进行了初步研究,为进一步探讨其作用机制奠定了基础。
- 徐宁陈志玲
- 关键词：肌动蛋白包涵体
- C24(28)-甾醇还原酶参与粗糙脉孢菌极性生长及早期发育被引量：2
- 2012年
- 麦角甾醇是真菌细胞膜的主要固醇类物质,其生物合成是一个复杂的酶促反应过程,其中C24(28)-甾醇还原酶是麦角甾醇合成途径中的关键酶,对C24(28)-甾醇还原酶功能的研究有助于阐明麦角甾醇对真菌极性生长的影响.本文对粗糙脉胞菌C24(28)-甾醇还原酶蛋白(Erg-2基因编码)序列的同源性分析表明,在子囊菌门的3个物种中,C24(28)-甾醇还原酶具有很高的保守性.根据同源重组基因敲除原理,通过电转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法获得了Erg-2基因缺失突变株(Erg-2KO),进一步利用斜面生长法并结合细胞壁染色进行突变株表型分析发现,与野生型相比,Erg-2KO(Ku70RIP背景)在生长初期菌丝生长缓慢,而后期与野生型无显著差异.这些结果表明,C24(28)-甾醇还原酶对N.crassa早期的生长和发育至关重要.
- 赵会珍吴迪陈志玲
- 关键词：粗糙脉孢菌
- 形成素结合蛋白调节粗糙脉孢菌菌丝极性生长发育被引量：1
- 2013年
- 微丝骨架在真菌菌丝极性生长中具有重要的功能,而其动态解聚-聚合特性是其实现功能的前提.形成素作为肌动蛋白结合蛋白,是微丝骨架动态调控因子之一,而形成素结合蛋白对于形成素发挥功能非常关键,但是对其在真菌极性生长发育中的功能还未见报道.本文以丝状真菌粗糙脉孢菌为材料,利用同源重组基因敲除技术,通过电击转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法,获得了形成素结合蛋白基因缺失突变菌株(FBPKO).进一步利用平板生长方法并结合细胞壁染色对突变菌株的表型进行分析.结果显示,与野生型相比,在分生孢子接种后24 h内突变菌株FBPKO的菌丝生长明显减慢且分支异常.这些结果表明,形成素结合蛋白调节着粗糙脉孢菌菌丝早期的极性生长发育.
- 李娜陈丹丹陈志玲
- 关键词：肌动蛋白粗糙脉孢菌
- 微管骨架在丝状真菌极性生长中的作用
- 2010年
- 细胞极性的确立是真核生物发育过程中的关键环节,丝状真菌作为微生物具有典型的极性生长模式,微管骨架在极性生长中具有重要的作用。对近年来微管骨架在丝状真菌极性生长中的作用进行了综述。
- 梁蒙陈志玲
- 关键词：丝状真菌微管骨架
