山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2010YY035)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：杨玲玲毕文祥郭元芳孙高英郝建荣更多>>
- 相关机构：北京市红十字血液中心山东大学更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人参皂苷Rb1对NEP基因启动子活性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建NEP启动子缺失体-荧光素酶报告基因质粒,探查神经内肽酶(NEP)基因启动子中与人参皂苷Rb1影响NEP启动子活性有关的位点。方法用NEP基因5'上游启动区2.4 kb片段和荧光素酶报告基因载体pGL3-basic构建NEP启动子-荧光素酶报告基因质粒pGL3-nep2.4;用Erase-a-Base System对pGL3-nep2.4质粒2.4 kb DNA插入片段5'端进行缺失,构建NEP启动子缺失体-荧光素酶报告基因质粒;用Rb1处理NEP启动子缺失体转染的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,检测双荧光素酶活性,观察Rb1对NEP启动子活性的影响。结果成功构建了含NEP启动子DNA序列的重组质粒pGL3-nep2.4。荧光素酶活性检测显示,转染pGL3-nep2.4质粒的SH-SY5Y细胞荧光素酶活性是转染pGL3-basic的13.1倍(P<0.01)。Rb1处理可使转染pGL3-nep2.4质粒的SH-SY5Y细胞荧光素酶活性增加,其是对照组的2.9倍(P<0.01);细胞荧光素酶活性检测亦显示,NEP基因上游启动区-894^-857 bp(RegionⅠ)及-100^-82 bp(RegionⅣ)片段缺失后,启动子活性分别是缺失前的29%(P<0.01)和25%(P<0.01),-559^-534 bp(RegionⅡ)及-223^-179 bp(RegionⅢ)片段缺失后,启动子活性分别是缺失前的5.12倍(P<0.01)及1.81倍(P<0.01)。Rb1处理后,RegionⅠ、Ⅱ和Ⅲ缺失体质粒转染细胞荧光素酶活性均与对照组无统计学差异(P>0.05),RegionⅣ缺失质粒pGL3-226转染细胞荧光素酶活性也与对照组无明显差异(P>0.05),而含RegionⅣ质粒pGL3-244转染细胞荧光素酶活性则是对照组的1.61倍(P<0.01)。结论 NEP基因5'上游2.4 kb DNA片段有较强的启动子活性,Rb1能明显增加其活性。NEP基因2.4 kb DNA片段有2个正调控区(RegionⅠ和RegionⅣ)和2个负调控区(RegionⅡ和RegionⅢ),Rb1通过RegionⅣ发挥正调控作用。
- 张晓金孙高英杨玲玲郭元芳郝秀玉郝建荣毕文祥
- 关键词：人参皂苷RB1启动子
- 人参皂苷Rb1对SweAPP-SK细胞保护作用的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察人参皂苷Rb1对SweAPP-SK细胞的保护作用。方法用Rb1处理SweAPP-SK细胞,用MTT分析、酶联免疫分析和流式细胞术观察Rb1对SweAPP-SK细胞增殖、Aβ分泌量、细胞活性氧(ROS)水平和Ca2+水平的影响。结果较SK-N-SH细胞,SweAPP-SK细胞增殖明显延迟,细胞ROS及Ca2+水平增加。用Rb1处理SweAPP-SK细胞后,细胞增殖加快,细胞外Aβ40浓度明显降低,细胞ROS及Ca2+水平明显降低。结论 Rb1对SweAPP-SK细胞有保护作用,该保护作用的发挥可能与其能减少Aβ分泌及降低细胞内ROS和Ca2+水平有关。
- 杨玲玲孙高英郝建荣魏玉平郭元芳崔行毕文祥
- 关键词：Β-淀粉样肽人参皂苷RB1活性氧CA2+
