广东省自然科学基金(9451051501002540)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：牛红心龙海波刘章锁闫菲菲白坤昊更多>>
- 相关机构：南方医科大学郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NADPH氧化酶在次氯酸修饰白蛋白诱导血管内皮细胞炎性反应中的作用
- 2010年
- 目的 阐明次氯酸修饰白蛋白（HOC1-Alb）诱导血管内皮细胞炎性反应的机制.方法 用体外制备的HOCl-Alb与人脐静脉内皮细胞共同培养;用光泽精增强化学发光法测定NADPH氧化酶活性;用免疫沉淀和Western印迹法测定p47phox磷酸化及p47phox与p22phox结合;用免疫荧光化学染色法观察p47phox膜迁移;分别用RT-PCR和Western印迹法测定细胞间黏附分子1（ICAM-1）mRNA和蛋白表达.为了解NADPH氧化酶在HOCl-Alb上调ICAM-1表达过程中的作用,在HOCl-Alb刺激细胞前,在细胞培养液中预先加入NADPH氧化酶特异性抑制剂夹竹桃麻素（apocynin）,观察ICAM-1表达的变化.结果 HOCl-Alb激活NADPH氧化酶具有剂量和时间依赖性,200 mg/L HOCl-Alb刺激15 min使NADPH氧化酶活性增加的量是牛血清白蛋白组的6.16倍（P＜0.01）,并可诱导p47phox磷酸化和膜迁移,及其与p22phox结合.HOCl-Alb上调ICAM-1表达的作用可被夹竹桃麻素抑制,500μmol/L夹竹桃麻素对HOCl-Alb诱导的ICAM-1表达的抑制率为68.97%（P＜0.01）.结论 NADPH氧化酶是HOCl-Alb诱导ICAM-1高表达的重要途径,与血管内皮炎性反应关系密切.
- 牛红心刘章锁
- 关键词：次氯酸白蛋白类糖尿病
- 罗格列酮对高糖诱导的血管内皮细胞炎症的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的阐明罗格列酮对糖尿病血管并发症保护作用的分子机制。方法用凝胶迁移分析和免疫荧光法测定不同浓度罗格列酮干预前后高糖诱导的血管内皮细胞核因子κB激活和血管细胞黏附分子1表达的改变。结果 25mmol/LD-葡萄糖刺激30min可诱导细胞核因子κB向核内迁移(与基础水平相比,P<0.001);5、25μmol/L罗格列酮以剂量依赖的方式抑制了D-葡萄糖诱导这种效应,抑制率分别为25.17%(P=0.001)和51.79%(P<0.001)。罗格列酮还抑制了D-葡萄糖诱导的血管细胞黏附分子1高表达。结论罗格列酮通过抑制血管内皮细胞炎症起到直接保护血管作用,可能是其延缓和改善糖尿病血管并发症的机制之一。
- 牛红心刘章锁龙海波
- 关键词：糖尿病罗格列酮血管内皮细胞
- 非同位素标记DNA探针和凝胶迁移分析法测定NF-κB激活实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨地高辛标记DNA探针和凝胶迁移分析法测定NF-κB激活的优势。方法:用地高辛标记NF-κB基序DNA探针,检测标记效率,探针与核蛋白的结合反应产物经过聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜,高温干燥后,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体杂交,加入CSPD检测化学发光强度。结果:按照上述方法标记DNA探针,标记效率较高。样品核蛋白与地高辛标记的NF-κB基序DNA探针共同孵育,两者相互结合,进行凝胶迁移分析,出现高密度的迁移带。在反应体系中额外加入过量未标记的NF-κB基序DNA探针或抗NF-κB/P65或NF-κB/P50抗体后,抑制了两者的结合,迁移带消失,而加入过量未标记的Oct2A基序DNA探针,不能抑制两者结合,迁移带密度无明显降低,证实了核蛋白NF-κB与DNA探针结合的特异性。结论:本方法无放射性污染,无需特殊设备,操作简便、稳定性好、敏感性强,图像清晰、背景低。
- 牛红心
- 一种核蛋白提取方法在血管内皮细胞NF-κB活性研究中的作用
- 2011年
- 目的探讨改良核蛋白提取方法在血管内皮细胞核因子-κB(NF-κB)活性研究中的作用及其优势。方法配制核蛋白提取液,提取血管内皮细胞核蛋白,用Bradford法测定样品蛋白含量,用凝胶迁移实验和Western blotting检测NF-κB活性。结果提取的血管内皮细胞核蛋白样品蛋白含量约2.5 g·L-1,受刺激核蛋白样品中有明显的NF-κB激活。结论本方法操作简便、快捷、经济,所提取的核蛋白,蛋白含量高,NF-κB活性好,适合大量细胞核蛋白提取和进一步对样品中NF-κB活性的分析研究。
- 牛红心
- 关键词：核因子-ΚB核蛋白血管内皮细胞
- 晚期氧化蛋白产物在糖尿病肾病中作用的研究进展被引量：5
- 2012年
- 晚期氧化蛋白产物(AOPP)是中性粒细胞髓过氧化物酶来源的氯氧化剂次氯酸作用于蛋白质而形成的蛋白质氧化交联产物。AOPP通过选择性氨基酸残基的修饰、某些特异性氨基酸含量的改变、双酪氨酸、蛋白羰基和戊糖素的形成等,对细胞和组织产生广泛的作用,包括由于蛋白质生化和结构改变导致的生物功能受损或丧失、通过对炎症细胞的活化和与受体相互作用对细胞信号通路的激活而产生促炎症作用等。AOPP与DN关系密切,通过对糖尿病动物还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的激活,导致氧化应激和炎症因子的释放,引起肾小球肥大和蛋白尿产生。AOPP通过氧化应激对足细胞的促凋亡和对肾小管上皮细胞的促炎症和纤维化反应的作用,可能是其参与DN发生和发展的重要机制。
- 白坤昊闫菲菲祝火盛龙海波牛红心
- 关键词：糖尿病肾病晚期氧化蛋白产物氧化应激
