国家自然科学基金(81271065)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 喉黏膜间充质干细胞肌向分化的实验研究
- 2014年
- 目的 将喉黏膜间充质干细胞（laryngeal mucosal mesenchymal stem cells,LM-MSC）向成肌细胞诱导分化,为声带部分或全部缺失的组织工程修复寻求优势种子细胞.方法 从正常会厌舌面黏膜分离培养获得LM-MSC,流式细胞仪检测细胞表面分子标志CD44、CD105、CD90、CD29、CD34和CD45;向成脂、成骨细胞分化鉴定细胞多向分化潜能,油红O、茜素红染色鉴定成脂、成骨分化情况;加入成肌诱导液向成肌细胞方向分化,于成肌诱导分化后1周和3周时行免疫荧光化学染色,诱导后1周、3周和6周行实时定量RT-PCR分析,以分别定性和定量分析成肌分化相关蛋白及基因Myod1、Myogenin、肌球蛋白重链（myosin heavy chain,MyHc）的表达.结果 本实验分离培养获得的LM-MSC可贴壁生长,呈长梭形;高表达间充质干细胞表面分子标志物：CD44（100.0％）,CD105（90.4％）,CD90（99.9％）,CD29 （93.0％）,低表达造血系干细胞表面分子标志物：CD34（0.4％）和CD45（1.3％）;LM-MSC在体外定向向成脂、成骨分化14 d和21 d后有大量串珠样脂滴和矿化结节生成;成肌细胞初始标志蛋白Myod1和特异性标志蛋白Myogenin,MyHc分别于成肌诱导分化后1周和3周出现,RT-PCR结果与免疫荧光化学染色结果一致,并且相关基因持续表达于成肌诱导分化后6周.结论 LM-MSC符合间充质干细胞的特性,并可定向分化为成肌细胞,有潜能成为声带组织工程修复的优势种子细胞.
- 杨润琴明磊国邓志宏金岩
- 关键词：喉黏膜间充质干细胞声带成肌细胞细胞分化
- 炎症对声带间充质干细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2014年
- 目的研究炎症对声带间充质干细胞(vocal fold mesenchymal stem cells,VF-MSCs)生物学行为的影响,为炎症声带损伤修复提供一定的理论依据。方法正常和慢性炎症声带组织分别取自于下咽癌喉全切除的正常声带组织及水肿型声带息肉手术患者切除的标本,所取组织大小约1mm×1mm,每种组织3例,对其行HE、Masson三色染色和Elastin Van Gieson(EVG)染色,观察炎性声带组织较正常组织胶原纤维和弹性纤维改变情况;通过细胞克隆形成实验和MTT细胞生长曲线实验研究炎症对VF-MSCs增殖能力的影响;通过VF-MSCs定向向成骨和成脂细胞分化,研究炎症对VF-MSCs多向分化能力的影响。结果 Masson三色和EVG染色结果显示炎性声带组织固有层细胞外基质(extracellular matrix,ECM)胶原纤维变粗,含量增多,弹力纤维变细,含量减少;细胞克隆形成实验和MTT细胞生长曲线结果显示炎性声带间充质干细胞(inflammatory vocal fold mexenchymal stem cells,I-VF-MSCs)较正常声带间充质干细胞(normal vocal fold mesenchymal stem cells,N-VFMSCs)增殖能力增强;细胞成骨和成脂分化实验结果显示I-VF-MSCs较N-VF-MSCs多向分化能力减弱。结论炎性声带组织较正常声带组织弹性减弱,抗压力增强,炎症促进VF-MSCs增殖能力,抑制VF-MSCs多向分化能力。
- 杨润琴梁媛媛邓志宏
- 关键词：炎症EXTRACELLULARVOCALMESENCHYMAL
