温州市科技计划项目(Y20100182)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：陈成水陈俊杰欧阳金生李玉苹蔡畅更多>>
- 相关机构：温州医科大学温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA CD31沉默PECAM-1对鼠源血管内皮瘤细胞VEGF表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究siRNA CD31靶向沉默血管内皮细胞中血小板内皮细胞黏附分子1(platelet endothelial cell adhesion molecule 1,PECAM-1)基因对鼠源性血管内皮瘤(murine hemangioendothelioma,EOMA)细胞增殖及其VEGF表达的影响。方法:实验分为裸siRNA CD31组、siRNA CD31-FAM组、稳定阴性对照(SNC)组、空白对照(Opti-Med)组,以阳离子脂质体(RNAi-mate)为载体将化学合成的2'-O-甲基修饰的siRNA CD31转染体外培养的EOMA细胞,以激光共聚焦显微镜观察siRNA CD31的转染效果,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测siRNA CD31对EOMA细胞增殖的影响,以RT-PCR、Western blotting分别检测EOMA细胞中PECAM-1、VEGF的表达水平。结果:与SNC组和空白对照组比较,裸siRNA CD31和siRNA CD31-FAM转染的EOMA细胞中的PECAM-1 mRNA和蛋白、VEGF mRNA和蛋白的表达量均显著降低(均P<0.01)。与SNC组比较,裸siRNA CD31组、siRNA CD31-FAM组的EOMA细胞增殖抑制率明显上升[(18.82±1.46)%、(18.91±2.21)%vs(0.61±1.06)%,均P<0.01]。结论:采用siRNA CD31-脂质体复合物沉默EOMA细胞中的PECAM-1基因可抑制VEGF mRNA和蛋白的表达,从而抑制EOMA细胞的增殖。
- 欧阳金生陈成水李玉苹蔡畅叶民林全陈俊杰
- 关键词：小分子干扰RNA血管内皮细胞生长因子血管内皮瘤
- 靶向siRNA^CD31_脂质体复合物对人肺微血管内皮细胞PECAM-1表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究以血管内皮细胞为靶向的siRNA^CD31’对血小板内皮黏附分子1（PECAM-1）表达及细胞增殖的影响。方法实验分为裸siRNA^CD31组、siRNA^CD31FAM组、稳定阴性对照（SNC）组、空白对照组。实验以阳离子脂质体（RNAi-mate）为载体，将2’-O-甲基修饰的siRNA^CD31转染体外培养的人肺微血管内皮细胞（HPMVEC），四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测siRNA^CD31对HPMVEC增殖的影响，RT-PCR、Westernblot检测PECAM1的表达水平。结果裸siRNA^CD31和siRNA^CD31FAM转染的HPMVEC的PECAM-1mRNA、PECAM-1蛋白的表达量、HPMVEC的增殖率均低于SNC组和空白对照组（P值均〈0．01），裸siRNA^CD31和siRNA^CD31-FAM转染的HPMVEC的PECAM1mRNA、PECAM-1蛋白的表达量、HPMVEC的增殖率差异无统计学意义（P值均〉0．05）。结论靶向siRNA^CD31可下调HPMVEC的PECAM-1mRNA和蛋白的表达，并可抑制HPMVEC细胞的增殖，2’O甲基修饰的siRNA^CD31可作为沉默靶基因PECAM-1的有效的技术手段，RNAimate可作为siRNA^CD31的转染靶基因的载体，PECAM1可能是干预肺癌癌细胞微环境中的微血管内皮细胞功能的潜在靶标。
- 欧阳金生李玉苹陈成水蔡畅陈俊杰杨芳芳
- 关键词：小分子干扰RNA内皮细胞靶向
