安徽省自然科学基金(KJ2010A106)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 茶愈伤组织实时定量PCR分析中内参基因的选取被引量：2
- 2014年
- 为了选取合适的内参基因来分析培养基中前体物诱导及对照的茶愈伤组织中茶氨酸代谢相关基因的差异表达,利用Gen Bank上登录的茶树基因序列以及通过构建文库测序所得的基因(具有完整的阅读框)共7个持家基因设计引物。在分析这些引物的扩增效率和特异性后,测定了它们在茶愈伤组织生长过程中(对照和愈伤培养基中添加含氮外源物的情况下)的表达水平。利用ge Norm和Norm Finder软件分析了这些持家基因的稳定性,确定在该条件下合适的内参基因为β-actin和GAPDH。
- 史成颖李正国徐乾宛晓春
- 关键词：实时定量PCR内参基因基因表达茶树
- 培养基中添加相关外源物对茶氨酸生物合成的影响被引量：3
- 2011年
- 以龙井43的嫩叶等为材料,考察在培养基中添加茶氨酸合成前体物、代谢中间物及NO供体硝普钠对愈伤组织中茶氨酸含量的影响,并研究水培苗中添加一定浓度的硫酸铵对茶氨酸含量的影响。结果表明：培养基中添加25 mmol/L的盐酸乙胺可促进茶氨酸的合成,特别是在培养的第6-12天,愈伤组织中茶氨酸的含量增加明显,培养至第12天时,茶氨酸的含量最高,为108.96μmol/g（以干质量计）,是对照的7.72倍;培养基中分别添加低浓度的谷氨酰胺、丙氨酸及谷氨酸钠可在一定程度上提高愈伤组织中的茶氨酸含量,其中添加5 mmol/L的谷氨酰胺时增加最为明显,茶氨酸含量是对照的近7倍;培养基中添加0.05或0.075 mmol/L的硝普钠时,茶氨酸的含量有所增加,但总体水平较低。水培苗营养液中添加硫酸铵至100 mg/L时,茶苗培养3 d时的茶氨酸含量是对照的2.25倍。
- 史成颖徐乾金璐杨华张正竹宛晓春
- 关键词：茶氨酸愈伤组织前体物硝普钠水培
- 茶树中精氨酸脱羧酶基因的cDNA克隆及序列分析被引量：2
- 2013年
- 通过SMARTRACE PCR技术获得了茶树中精氨酸脱羧酶(ADC)的cDNA全长序列,并登录GenBank(登录号为JQ653274)。ADC基因cDNA全长为2 988 bp,开放阅读框(ORF)全长为2 163 bp,共编码720个氨基酸,编码的蛋白质的分子量为77.430 kDa,理论等电点为5.373,其序列中不存在卷曲螺旋结构。ADC蛋白为亲水性非分泌不稳定蛋白,不跨膜运动,无信号肽序列存在,共有41个可能的磷酸化位点,存在于叶绿体基质中,是细胞质蛋白。精氨酸脱羧酶的基因cDNA全长序列的获得,对于进一步研究精氨酸在茶树氮代谢中的作用及茶氨酸代谢途径提供基础。
- 徐乾史成颖宛晓春汤志近
- 关键词：全长CDNA基因克隆
