国家自然科学基金(30610103127)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 小鼠Foxp3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2008年
- 目的:体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体。方法:从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32 a,转化E.coliBL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,N i2+-NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性。结果:成功构建了Foxp3-pET-32 a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体特异性与小鼠Foxp3蛋白结合。结论:成功表达小鼠Foxp3蛋白并制备了多克隆抗体。
- 鲍俊峰王胜军马洁崔大伟杨先知毛朝明仝佳邵启祥许化溪
- 关键词：FOXP3原核表达多克隆抗体小鼠
