江苏省科技支撑计划项目(BE2011786)
- 作品数:12 被引量:47H指数:4
- 相关作者:虞伟李晓军张晶夏海萍周莹更多>>
- 相关机构:南京军区南京总医院南京大学东南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
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- 类风湿关节炎血清免疫复合物的质谱鉴定与差异蛋白分析被引量:3
- 2017年
- 目的类风湿关节炎(RA)是一种典型的Ⅲ型超敏反应,可在滑膜组织中发现大量的免疫复合物及补体的沉积,但具体的致病机制尚不清楚。文中旨在探究RA血清免疫复合物中抗原谱的表达情况。方法血清样本取自2013年1月至2015年12月南京军区南京总医院门诊和住院RA患者共55例为RA组。RA组分为2个亚组,其中抗CCP抗体(+)RA亚组41例,抗CCP抗体(-)RA亚组14例。同时选取SLE患者41例血清样本为疾病对照组,健康体检人群41例血清样本为健康对照组。用PEG沉淀法从4组混合血清中提取免疫复合物,然后通过免疫共沉淀、胶内酶解后进行质谱分析。用Vennny2.1.0进行各组之间总蛋白差异比对,结果以RA组蛋白FOT值大于疾病对照组、健康对照组FOT值的2倍即判定为上调蛋白,小于疾病对照组、健康对照组FOT值0.5倍判定为下调蛋白。利用STRING软件对差异蛋白进行进一步功能分析。结果在RA患者血清免疫复合物中共鉴定出277种蛋白,其中抗CCP抗体(+)RA亚组有162种蛋白,抗CCP抗体(-)RA亚组有248种蛋白。相对疾病对照组与健康对照组,仅在RA组出现共有129种蛋白,其中,抗CCP抗体(+)RA亚组有38种蛋白,抗CCP抗体(-)RA亚组有109种蛋白,2亚组共有18种蛋白。RA组与对照组共有蛋白中,抗CCP抗体(+)RA亚组有2种蛋白上调,抗CCP抗体(-)RA亚组有11种蛋白上调。下调蛋白中,抗CCP抗体(+)RA亚组有17种蛋白表达下调,抗CCP抗体(-)RA亚组共计21种蛋白表达下调。结论抗CCP抗体(-)RA亚组相对抗CCP抗体(+)RA亚组鉴定出更多的差异蛋白,差异蛋白的鉴定为探究RA发病机制寻找新的生物学标记物提供新的思路和方向。
- 管晓龙王海永周莹徐羽中李昂宋淑圣李晓军虞伟
- 关键词:类风湿关节炎质谱免疫复合物
- 组织细胞内瓜氨酸化蛋白的鉴定方法被引量:1
- 2017年
- 瓜氨酸化是指精氨酸在钙离子存在的情况下,由肽酰基精氨酸脱亚胺酶介导引起的一种翻译后修饰。蛋白质瓜氨酸化修饰的上调参与体内多种疾病的发病机制,并具有重要的病理生理学意义。组织细胞中瓜氨酸化位点的鉴定依然迫切需要多种具有更高敏感性和特异性的定量和高通量的检测方法,随着化学衍生技术和质谱技术的发展,新的快速精准的蛋白质组学技术依然具有较好的发展和应用前景。文章主要通过介绍显色剂分析、免疫识别、质谱分析等多种瓜氨酸化多肽的检测方法,以期为复杂生物样本中瓜氨酸位点的鉴定提供新的思路和方向。
- 管晓龙周莹李晓军虞伟
- 关键词:瓜氨酸质谱类风湿关节炎
- 抗氨基甲酰化蛋白抗体的临床应用被引量:3
- 2016年
- 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的,以关节慢性炎症性病变为主要临床表现的自身免疫病。抗氨基甲酰化蛋白(carbamylated proteins,Car P)抗体作为一种新发现的自身抗体指标在RA诊断、RA疾病前期筛查中具有潜在的研究价值和重要的应用前景。文中就抗Car P抗体在RA以及相关自身免疫病中的研究进展做一综述,以期为临床相关疾病的诊断及治疗提供新的研究方向。
- 管晓龙虞伟
- 关键词:类风湿关节炎自身免疫病
- 检测抗CCP自身抗体在类风湿关节炎诊治中的作用被引量:6
- 2012年
- 类风湿关节炎(RA)是一种全身性的自身免疫病,以滑膜血管翳形成为特征,最终导致软骨破坏、骨侵蚀和关节残疾。早期诊断和治疗可以改善RA的结局。迄今,对RA诊断价值最高的生物学标志物是抗环瓜氨酸肽自身抗体(ACCP)。本文对ACCP的形成及其在RA发病中的作用进行简要综述。
- 刘阳李晓军
- 关键词:类风湿关节炎环瓜氨酸肽自身抗体
- 婴幼儿感染金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因研究被引量:2
- 2014年
- 目的调查婴幼儿感染标本分离的金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因携带状况。方法收集南京市儿童医院2013年10-12月婴幼儿感染标本分离出的金黄色葡萄球菌20株,首先采用K-B法和E-test法做抗菌药物敏感性试验,再用聚合酶链反应(PCR)的方法分析β-内酰胺类药物耐药基因(blaZ、mecA)及大环内酯类药物耐药基因(ermA、ermB、ermC、mphC、msrA)。结果 20株金黄色葡萄球菌对头孢西丁、青霉素、红霉素、克林霉素的耐药率,分别为50.0%、100.0%、40.0%、40.0%;耐药基因共检出mecA基因11株占55.0%、ermB基因1株占5.0%、ermC基因7株占35.0%;该组菌中17号株对头孢西丁敏感,检出mecA基因,其他菌株头孢西丁药敏结果耐药株均能检出mecA基因,头孢西丁敏感株均未检出mecA基因。结论 mecA、ermB、ermC基因是该组菌对β-内酰胺类和大环内酯类药物耐药的重要原因,对婴幼儿感染标本分离的金黄色葡萄球菌进行β-内酰胺类药物耐药基因(blaZ、mecA)及大环内酯类药物耐药基因(ermA、ermB、ermC、mphC、msrA)检测研究尚为国内首次。
- 谈华徐嘉昌刘雪梅迟富丽徐飞曹波赵呈元常勇虞伟
- 关键词:金黄色葡萄球菌耐药性Β-内酰胺类大环内酯类
- 不同TNM分期小细胞肺癌患者血清神经烯醇化酶水平及预后分析被引量:4
- 2015年
- 目的探讨小细胞肺癌(SCLC)患者神经烯醇化酶(NSE)水平与TNM分期的关系及对预后的影响。方法采用电化学发光法检测61例SCLC患者血清NSE水平,回顾性分析其TNM分期,电话随访患者并计算生存期。Kendall's tau法行NSE值与TNM分期相关分析,Kaplan-Meier法计算生存率并描绘生存曲线,Cox比例风险回归筛选影响生存的因素。结果 SCLC患者血清NSE水平为35.06(14.87,57.31)ng/m L,其中Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期SCLC患者血清NSE水平分别为13.34(8.23,27.32)ng/m L、36.47(18.85,61.65)ng/m L、51.55(35.06,96.61)ng/m L,差异有统计学意义(P<0.01)。Ⅰ+Ⅱ期组与Ⅲ期或Ⅳ期组比较,差异均有统计学意义(P=0.000),但Ⅲ和Ⅳ期组比较差异无统计学意义(P=0.054)。相关分析结果显示,血清NSE值与TNM分期呈中等正相关性(rK=0.472,P<0.01)。生存分析结果显示,TNM分期、血清NSE水平、治疗前体能状态(PS)评分均为影响SCLC的预后因素(P均<0.01);而PS评分及TNM分期则为SCLC的独立预后因素。结论 SCLC患者血清NSE水平与TNM分期呈正相关,两者与PS评分均为影响SCLC预后的因素。
- 虞红珍梁春梅江冬瑞李晓灿虞伟
- 关键词:小细胞肺癌TNM分期血清预后
- 量子点标记链酶亲合素-生物素系统用于抗核抗体检测的对比研究与评价被引量:1
- 2015年
- 目的对比研究不同颜色量子点(QDs)标记链霉亲合素(SA)-生物素系统在抗核抗体(ANA)间接免疫荧光实验(IIFA)检测中的效果,评价其在临床样本检测中的应用价值。方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素化羊抗人Ig G(生物素化二抗),用IIFA检测临床样本血清ANA,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记二抗(FITC-二抗)为对照。比较和评价3种QDs-SA的应用效果。结果对114例患者血清研究发现,QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素二抗检测可见与FITC-二抗检测ANA结果相同或类似的荧光模式,阳性结果符合率均为100%,平均抗体滴度均高于FITC-二抗标记检测结果(P<0.01)。尤其对核仁型、核均质型与核点型ANA荧光模式检测效果优于FITC-二抗结果。相关分析结果显示:QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA与FITC-二抗标记ANA定性结果高度一致(Kappa=0.979),滴度均呈高度正相关(P均<0.01)。结论 QDs-SA用于IIFA法检测ANA总体结果稳定、灵敏、可行,可获得较FITC-二抗检测更加敏感和稳定的实验结果。
- 张晶虞伟夏海萍李晓军张宇顾宁
- 关键词:抗核抗体
- 胶原诱导关节炎模型小鼠CCP抗原特异性T细胞的量子点标记检测及其与CCP特异性淋巴细胞增殖的关系
- 2014年
- 目的建立基于量子点(quantum dots,QDs)标记环瓜氨酸肽(CCP)抗原特异性T细胞(CCP-AST)的流式细胞分析术(FCM),研究胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠CCP-AST的阳性率及其与CCP抗原特异性淋巴细胞增殖的关系。方法构建CIA小鼠模型,用QDs标记链霉亲合素(QD705-SA)结合生物素化的CCP对CCP-AST(CD4+CD8-CCP-TCR+)进行体外标记与FCM检测,同时将CCP与小鼠脾单个核细胞(MSMC)进行共培养,并对其增殖刺激指数(SI)、CCP-AST阳性率及其他参数做相关分析。结果成功建立检测QDs标记CCP-AST的FCM术,发现CIA组小鼠CCP-AST阳性率[中位数(第25分位数,第75分位数)]为0.575%(0.475%,1.185%),显著高于PD2B对照肽的0.165%(0.113%,0.240%)和健康组小鼠的0.085%(0.000%,0.205%),差异均有统计学意义(P均<0.01)。CIA组小鼠经CCP刺激,MSMC出现明显的增殖反应,SI值为4.710,高于健康组小鼠CCP刺激的SI值0.860,差异有统计学意义(P<0.01)。相关性分析显示,CIA组小鼠CCP-AST阳性率与CCP刺激MSMC的SI值呈显著正相关关系(r=0.734,P<0.05),与关节炎症指数之间亦呈正相关(r=0.611,P<0.05)。结论 QD705-SA结合生物素化的CCP,可实现对CCP-AST的有效标记和FCM检测,CIA组小鼠CCP-AST阳性率与CCP抗原刺激的特异性淋巴细胞增殖结果显著相关,并与CIA小鼠关节肿胀和炎症程度关系密切。
- 张敏杰张晶夏海萍刘国瑞严孝岭虞伟李晓军
- 关键词:量子点环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞
- 血小板/淋巴细胞比值与类风湿关节炎系统受累和疾病活动相关分析被引量:15
- 2020年
- 目的监测病情活动及合并症对治疗类风湿关节炎(RA)至关重要。文中通过评估RA患者外周血血小板/淋巴细胞比值(PLR)水平,探讨其与RA患者系统受累情况、实验室指标和疾病活动的关系。方法回顾性分析2013年9月-2017年5月在东部战区总医院首诊为RA的患者123例,按照性别年龄1∶1分别匹配123例同期体检健康者(健康对照组)及其他自身免疫病患者(疾病对照组)123例。根据类风湿关节炎疾病活动指数(DAS28-CRP)将RA患者分为高活动度者和低活动度者,并分别对高、低活动度者以及健康对照组、疾病对照组PLR水平进行比较。评估RA患者系统受累情况与PLR水平关系;对PLR与DAS28-CRP及传统的炎症指标行Spearman相关性分析;通过受试者工作特征曲线(ROC)评价其在诊断RA及在区分RA病情活动程度中的应用效果。结果RA组患者外周血PLR[180.05(132.95,249.49)]显著高于健康对照组[133.63(103.17,140.99)]及疾病对照组[133.63(103.17,140.99)],差异均有统计学意义(P<0.01)。RA患者高活动度者PLR水平显著高于低活动度者[200.00(150.00,264.50)vs 137.00(116.50,183.25),P<0.01];RA合并循环系统受累[198.91(139.99,261.18)vs 146.26(117.61,185.71)]及感染性疾病患者PLR水平[219.28(176.54,468.17)vs 171.90(127.39,247.21)]均显著高于非合并患者(P<0.05)。RA患者类风湿因子(RF)阳性者PLR水平显著高于RF阴性者[189.77(147.18,252.20)vs 142.35(115.17,231.96),P<0.05];但抗环瓜氨酸肽抗体(A-CCP)阳性与阴性组间PLR水平差异无统计学意义[181.92(139.03,250.13)vs 149.16(114.94,248.66),P>0.05]。RA患者PLR与DAS28-CRP、C反应蛋白、血沉呈显著正相关(r分别为0.433、0.501、0.592,P<0.01)。PLR诊断RA和区分RA病情高度活动的AUC分别为0.68和0.73;当cut-off值分别为134.47和147.61时,敏感性分别为74.8%和77.5%,特异性分别为56.5%和63.2%。结论RA患者外周血PLR水平升高,并与疾病活动密切相关;且在合并循环系统受累、感
- 王子铭周莹李晓军虞伟
- 关键词:类风湿关节炎疾病活动度
- 自身抗体能否预测自身免疫病?被引量:5
- 2012年
- 与疾病相关的自身抗体(AuAb)是一类重要的血清生物标志物,某些特定的AuAb除可协助自身免疫病(AIDs)的诊断、活动程度评估、预后判断及疗效监测外,还可作为疾病风险预测指标,对健康人群特别是有遗传家族史的易感个体进行AIDs风险评估。对特定AuAb阳性个体及早实施预防性干预治疗,可使患者较早得到治疗或延缓疾病的发生发展。
- 李晓军
- 关键词:自身抗体自身免疫病