国家自然科学基金(30171159)
- 作品数:16 被引量:209H指数:10
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- 薄层色谱法分离僵蚕中蛋白质和氨基酸类成分的研究被引量:13
- 2005年
- 目的建立僵蚕蛋白质和氨基酸类成分的薄层色谱分离鉴别方法,为僵蚕的质量控制提供依据。方法用不同的展开剂、硅胶薄层板的干燥温度等对僵蚕化学成分进行分离。结果以羧甲基纤维素钠(CMC—Na)为粘合剂制备的硅胶G薄层板,2 0℃以下自然干燥,用含0 .1 %的茚三酮的正丁醇—冰醋酸—水( 4∶1∶1 )作展开剂,展开90min,60℃左右烘烤2min,分离得到1 0个不同组分的斑点,与氨基酸对照品在相同位置上有相同颜色的斑点。结论薄层色谱法稳定、重现性好、操作方便、快速。
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- 关键词:僵蚕蛋白质薄层色谱法
- 僵蚕的现代研究进展被引量:91
- 2003年
- 黄海英彭新君彭延古
- 关键词:僵蚕
- 僵蚕注射液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶平衡的影响被引量:16
- 2007年
- 目的:观察不同浓度僵蚕注射液对凝血酶诱导血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)活性的影响。方法:培养新生儿脐带静脉,选取生长良好的第2~5代脐静脉内皮细胞用于实验。将大、中、小剂量僵蚕注射液(浓度分别为600、300和150mg/L)加入5kU/L凝血酶诱导的内皮细胞中,培养12h后收集细胞液,用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测细胞培养液中PAI-1和t-PA的活性。结果:单用5kU/L的凝血酶组具有诱导内皮细胞分泌PAI-1增加、抑制t-PA释放作用,与无凝血酶和僵蚕的空白对照组比较差异均有显著性(P均〈0.01)。与凝血酶组比较,僵蚕大、中、小剂量组均能明显增加t-PA活性、降低PAI-1活性,差异均有显著性(P均〈0.01);僵蚕大、中、小剂量组对凝血酶诱导内皮细胞释放t-PA的影响率分别为96,8%、95.6%和55.1%,对PAI-1的影响率分别为92.5%、85。4%和29.3%。结论:大剂量僵蚕注射液可明显抑制凝血酶诱导的内皮细胞释放作用,并能抗血栓形成。
- 郝晓元苏云彭延古
- 关键词:血管内皮细胞凝血酶纤溶酶原激活物
- 僵蚕抗凝成分对内毒素休克伴弥散性血管内凝血大鼠的保护作用研究被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨僵蚕抗凝成分(ACBB)对大鼠内毒素休克伴弥散性血管内凝血(DIC)的保护作用。方法:60只雄性SD大鼠被随机分为空白对照组、模型组及ACBB高、中、低剂量组,每组12只。采用静脉注射脂多糖(LPS)的方法复制大鼠内毒素休克伴DIC模型。ACBB高、中、低剂量组于注射LPS即刻分别由静脉注射ACBB 36、18和9 mg/kg;空白对照组给予等量生理盐水。注射LPS前及LPS后1、3和6 h记录大鼠平均动脉压(MAP);并于LPS后6 h经颈总动脉取血,测定血浆副凝实验(3P实验)阳性率、D-二聚体含量、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(Fbg)含量及抗凝血酶(AT-)活性。结果:与空白对照组比较,随时间延长,模型组MAP显著下降,6 h PLT、Fbg、AT-均显著降低,D-二聚体、3P实验阳性率均明显升高,各指标比较差异均有显著性(P均<0.01)。与模型组比较,ACBB各剂量组可明显抑制LPS引起的MAP降低,抑制3P实验阳性率,增加D-二聚体含量,防止休克后PLT、Fbg、AT-活性降低,两组比较差异均有显著性(P均<0.01),且ACBB高剂量组各指标几乎接近于空白对照组。结论:ACBB对内毒素休克伴DIC大鼠具有保护作用。
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- 关键词:内毒素休克
- 僵蚕提取物的质量研究被引量:5
- 2005年
- 目的研究僵蚕提取物的质量,为其质量控制提供依据。方法采用薄层色谱法(TLC)鉴别氨基酸,经典化学法测定草酸铵和蛋白质等的含量。结果僵蚕提取物中总氮、铵态氮、酰胺态氮、蛋白质和草酸铵含量分别为11.31%,2.73%,0.107%,53.65%和9.97%,RSD分别为0.87%,0.43%,1.40%,1.01%和0.79%。结论该定性定量方法准确、可控。
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- 关键词:僵蚕薄层色谱法蛋白质氨基酸
- 僵蚕提取液中蛋白质和草酸铵等成分的定量分析被引量:30
- 2005年
- 目的对僵蚕提取液中三种形态的含氮物质、草酸盐、总离子浓度和还原性物质进行含量测定。方法采用离子交换和经典化学分析方法。结果僵蚕提取液中固形物含量为38.52%,RSD=0.92%(n=3);总氮、铵态氮和酰胺态氮含量分别为5.798%、0.868%、0.196%,蛋白质含量为29.74%,占总固形物的77.2%;草酸铵含量为3.85%(不包括0.96%的草酸根对应的其他盐),占总固形物的9.98%;总离子浓度按一价离子计为1.099mol/L;能被高锰酸钾在酸性条件下氧化的还原性物质含量相当于1.015mol/L的草酸盐浓度,其中阳离子型、阴离子型和非离子型还原物质浓度占总还原物质的摩尔百分率分别为7.84%、64.16%和不低于28.0%。结论本研究为进一步研究僵蚕提取液的抗凝作用和药理作用机理奠定了一定的物质基础。
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- 关键词:蛋白质离子浓度还原性物质
- 僵蚕抗凝活性及其成分的分析被引量:24
- 2005年
- 目的对僵蚕不同部位抗凝活性及其主要成分的含量进行测定 ,为僵蚕的质量控制和用药提供依据。方法用凝血酶时间 (TT)和经典化学方法为指标测定生、制僵蚕以及制僵蚕的不同部位的抗凝血活性大小以及总氮、铵态氮、蛋白质和草酸铵的含量。结果制僵蚕的抗凝活性、蛋白质和草酸铵含量均大于生僵蚕。制僵蚕不同部位凝血酶时间和蛋白质含量比较 ,其顺序是 :透明胶状物 >全药 >僵蚕皮 >绿褐色物。结论生、制僵蚕以及僵蚕不同部位抗凝活性和蛋白质等成分含量不一致 ,建议根据用药目的选择生、制僵蚕 ,作为抗凝药物应用时 。
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- 关键词:僵蚕凝血酶时间蛋白质
- 僵蚕抗内毒素所致红细胞膜损伤作用的研究被引量:5
- 2004年
- 目的观察僵蚕对内毒素所致红细胞膜损伤的抑制作用。方法以内毒素 (ET)损伤红细胞膜 ,观察不同浓度的僵蚕液对血浆游离血红蛋白 (PHb)含量的影响。结果 3个不同浓度的僵蚕液对内毒素所致全血溶血具有明显的对抗作用 ,PHb含量明显低于内毒素组 (P <0 .0 1 )。
- 彭延古曾序求徐爱良付灿云彭新君黄海英
- 关键词:僵蚕红细胞膜内毒素血红蛋白动物实验
- 僵蚕抗凝活性成分的稳定性和提取工艺研究被引量:3
- 2006年
- 目的研究僵蚕提取液的抗凝活性成分的稳定性和提取工艺。方法以凝血酶时间(TT)为指标,考察僵蚕提取液中抗凝物质对酸、碱、热及反复融冻的稳定性;以紫外分光光度法测其蛋白含量为指标,用L9(34)正交试验考察僵蚕的提取工艺。结果僵蚕水提液的抗凝活性成分对酸、碱、热及反复融冻均具有较高的稳定性;僵蚕水提液的凝血酶时间与蛋白质含量成正相关(P<0.01);以蛋白质含量作为指标,僵蚕用8倍量水润湿15 min,提取2次,每次30 min,即为水煎提取优化工艺。结论为僵蚕抗凝活性成分的水煎提取和后续分离的样品处理提供了实验依据。
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- 关键词:僵蚕稳定性
- 高效液相色谱法测定僵蚕中草酸铵的含量被引量:25
- 2006年
- 目的 建立高效液相色谱法测定僵蚕中草酸铵的含量。方法 用CaCl2沉淀法作样品前的处理;色谱条件为色谱柱:Sino Chrom ODS-BP(250mm×4.6mm,5μm);流动相:磷酸氢二铵水溶液(5g·L^-1,pH2.50);流速:0.5mL·min^-1;柱温:25℃;检测波长:214nm。结果草酸铵在15.0~150.0μg·mL^-1范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,r=0.995(n=6),平均回收率为96.5%,RSD为1.5%(n=5)。结论 方法简便可靠,灵敏,专属性好,可用于僵蚕中草酸铵的含量测定。
- 彭新君许光明李明娟江星明
- 关键词:僵蚕高效液相色谱法