深圳市罗湖区科技计划项目(2008068)
- 作品数：1 被引量：12H指数：1
- 相关作者：陈传德莫艳玲杨贵清李晖周晓红更多>>
- 相关机构：广东省疾病预防控制中心深圳市罗湖区疾病预防控制中心暨南大学更多>>
- 发文基金：深圳市罗湖区科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 荧光定量RT-PCR定量检测诺如病毒方法的建立及其评价被引量：12
- 2010年
- 目的：建立荧光定量RT-PCR快速检测诺如病毒GⅠ、GⅡ的方法,以用于患者标本的检测、分型及绝对定量。方法：经过优化筛选出最佳反应体系及反应条件,建立荧光定量RT-PCR快速检测诺如病毒的方法;制作两种不同型号的荧光定量PCR仪的绝对定量标准曲线,并从灵敏度、特异性、重复性、对患者标本检测能力等方面对建立的方法进行综合评价。结果：该方法在两种不同型号的仪器上对108-101copy/μl范围内的病毒,具有良好的线性关系,最低灵敏度为101copy/μl。与容易引起腹泻症状的轮状病毒、腺病毒、星状病毒、肠道病毒均无交叉反应;诺如病毒GⅠ、GⅡ两种常见感染人类的亚型之间无交叉反应。批内及批间重复性实验的标准差在0.10～0.59、变异系数在0.43%-2.84%之间,显示该方法重复性较好。用该方法共检测腹泻患者粪便标本181份,其中33份诺如病毒阳性,随机抽取10份阳性标本测序分析,结果证实均为诺如病毒。结论：本研究建立的诺如病毒荧光定量RT-PCR检测方法,灵敏度、特异性、重复性、对患者标本的检测能力等均显示较好的结果,且能快速区分GⅠ、GⅡ两种感染人类的重要亚型,在诺如病毒的快速检测中有着实际推广意义。
- 陈传德周晓红莫艳玲李晖杨贵清卓菲
- 关键词：荧光定量RT-PCR诺如病毒灵敏度特异性
