国家自然科学基金(31000162)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：王潮岗胡章立张雪芹韩燊陈甄倩更多>>
- 相关机构：深圳大学武汉大学呼伦贝尔学院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 莱茵衣藻在本科实验教学中的应用被引量：1
- 2013年
- 以莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)为实验对象,研究醋酸钠和硝酸钠胁迫对其生命活动的影响。实验结果表明醋酸钠可能会抑制衣藻的生长,而硝酸钠则无明显的促进作用。醋酸钠和硝酸钠对衣藻的胁迫效应差异很大,醋酸钠胁迫可以明显提高SOD和CAT的酶活性,硝酸钠则无明显作用,甚至有一些抑制作用。通过该研究,探索了衣藻在本科教学实践中的应用,对丰富本科实验具有重要意义。
- 王潮岗王菲胡章立
- 关键词：莱茵衣藻酶活性CATSOD
- 雨生红球藻抗氧化系统对活性氧的清除机制被引量：9
- 2012年
- 雨生红球藻（Haematococcus pluvialis）是一种淡水单细胞绿藻,隶属绿藻门、团藻目、红球藻科、红球藻属。它受强光、氮饥饿、高盐等胁迫时积累大量的虾青素,含量可高达细胞干重的6.0%以上[1]。相关研究也显示来虾青素具有极强的抗氧化活性[2—4],它的抗氧化活性较α-生育酚强千倍[5],比维生素E高近百倍[6]。
- 王潮岗韩燊陈甄倩罗尹清胡章立
- 关键词：雨生红球藻抗氧化系统活性氧虾青素总抗氧化能力
- 莱茵衣藻基因组文库的构建
- 2013年
- 以莱茵衣藻CC-849为材料，提取基因组DNA，利用BamHⅠ和Bgl Ⅱ对基因组DNA进行酶解，获得了可用于构建基因组文库的6—12kb的基因组片段，并浓缩至200ng／pL。该片段与λDNA载体连接，经噬菌体蛋白包装、侵染大肠杆菌XL1-blue后，获得了莱茵衣藻基因组文库。该文库的滴度为2．12×10^5pfu／mL，共有转化子4．26×10^4个，插入片段的平均长度约为9kb，扩增后基因组文库滴度为9．5×10^6pfu／mL。
- 王潮岗陈爱娜胡章立于珊珊
- 关键词：莱茵衣藻基因组文库噬菌体
- 雨生红球藻基因组文库的构建及鉴定被引量：1
- 2013年
- 本研究以雨生红球藻34—1n为材料，提取其基因组DNA，利用限制性内切酶Sau3AI对基因组DNA进行酶解，回收6～8kb的基因组DNA片段，并浓缩至200ng／i,zL。该片段与经BamHI酶切和去磷酸化处理后的pUC18载体连接，然后电击转化到受体菌Escherichia.coliDH5仅中，获得雨生红球藻34-1n的基因组文库。该文库的平均插入片段长度约为6．5kb，获得6x10s个克隆数。通过PCR筛选，由雨生红球藻基因组文库中获得含bktl序列的单克隆菌，与β-胡萝卜素氧化酶序列（GenBank：DQ086233．1）进行比对，结果表明bktl基因组序列含有6个外显子。本研究为进一步鉴定雨生红球藻相关基因提供了一个文库平台。
- 王潮岗张雪芹胡章立
- 关键词：雨生红球藻基因组文库质粒载体
- 雨生红球藻遗传转化试剂的筛选被引量：2
- 2013年
- 以雨生红球藻(Haematococcus plauvialis)34-1n和192.80为研究材料,采用细胞计数法对它们的生长特性进行分析。在BBM培养基中加入不同浓度的Zeomycin、腐草霉素和巴龙霉素等常用筛选试剂,通过细胞计数和显微镜观察等方法对各抗生素对藻细胞的作用进行分析,结果表明,雨生红球藻34-1n更适合作为遗传转化的受体藻株;进一步分析表明,它对巴龙霉素会产生回复突变,而对Zeomycin敏感,8μg/mL Zeomycin为最适的筛选试剂浓度。因此,Zeomycin相应的抗性基因ble可作为雨生红球藻遗传转化的筛选标记基因。
- 樊庆德张雪芹王潮岗
- 关键词：雨生红球藻抗性分析
- 一种莱茵衣藻启动子功能检测系统的构建被引量：1
- 2012年
- 选用莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)作为检测微藻启动子功能的生物系统,以pSP124质粒为基础,雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因bkt1的启动子片段(450 base pair,记作450 bp)为间隔序列,引入两个Eam 1105Ⅰ限制性内切酶位点,构建莱茵衣藻启动子功能检测T载体.将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的1 986 bp的bkt1启动子片段直接克隆到T载体上,通过"珠磨法"转化到莱茵衣藻CC-849中,经Zeomycin筛选获得了TranB-0.45和TranBle转基因藻,而1 986 bp的bkt1启动子无转化子,原因可能是其含有负调控元件.PCR结果显示,ble可稳定存在于转基因藻中,bkt1启动子的450bp片段具有启动子活性,能正确表达BLE蛋白.该研究表明,莱茵衣藻和pB-0.45T载体所组成的检测系统可用于藻类启动子研究,为启动子功能的研究提供了一条新途径.
- 王潮岗黄惠珠孙海珊胡章立雷安平
- 关键词：基因工程T载体莱茵衣藻启动子功能克隆
