湖南省自然科学基金(06JJ20080)
- 作品数：12 被引量：34H指数：4
- 相关作者：李桂源武明花李小玲唐运莲黄琛更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原发性脑瘤的分子遗传学研究进展被引量：5
- 2007年
- 原发性脑瘤是发生于神经系统常见的疾病,高度恶性的胶质瘤占原发性脑瘤的40%,主要分为Ⅰ型胶质母细胞瘤(继发性胶质母细胞瘤)和Ⅱ型胶质母细胞瘤(原发性胶质母细胞瘤),二者的产生有着不同的遗传学改变。Ⅰ型胶质母细胞瘤的产生途径是从一种恶性程度较低的星形细胞瘤(Ⅱ级,主要为p53基因突变和血小板来源的生长因子/受体过表达)至恶性的间变型星型细胞瘤(Ⅲ级,主要为Rb基因突变,CDK4基因扩增,9p、11p、13q和19q的等位基因缺失),再到胶质母细胞瘤(Ⅳ级,最常见的遗传学改变是7号和20号染色体的获得,10号染色体的丢失以及PTEN和LRRC4基因的缺失,PDGFα及其受体的过表达)的渐进的发展过程;而Ⅱ型胶质母细胞瘤则是一种没有恶性程度渐进过程的原发性胶质母细胞瘤,表皮生长因子受体基因的扩增是最常见的遗传学改变。
- 武明花王洁如李桂源
- 关键词：脑胶质瘤遗传学表皮生长因子受体LRRC4
- SDF-1/CXCR4生物学轴与肿瘤关系的研究进展被引量：8
- 2007年
- 趋化因子SDF-1,又称CXCL12,PBSF,与其特异性受体CXCR4广泛表达在多种组织和器官上,它们所构成的SDF-1/CXCR4生物学轴在多种肿瘤的发生,发展以及转移中都发挥重要作用,其可能是通过MAPK,AKT通路发挥作用。对这一特殊生物学轴的研究可能为肿瘤防治找到新的突破口。
- 陈琼武明花李桂源
- 关键词：CXCR4肿瘤
- LRRC4通过MAPK信号通路阻滞U251细胞于G_0/G_1期
- 2007年
- 目的:探讨脑胶质瘤抑瘤基因LRRC4通过MAPK信号通路阻滞U251细胞于G0/G1的机制。方法:通过脂质体转染法将LRRC4基因转染至U251细胞,G418筛选构建稳定转染的LRRC4/U251细胞株并验证LRRC4的阳性表达;通过Western-blot检测LRRC4对MAPK信号通路的关键分子ERK,JNK及P38的表达影响;流式细胞仪、荧光素酶活性检测分析LRRC4对U251细胞周期及细胞周期素(cyclinD1)的影响。结果:LRRC4能够下调磷酸化ERK的表达,上调总蛋白JNK2和磷酸化c-Jun的表达。LRRC4下调了U251细胞中突变型P53的表达,以及cyclinD1的启动子活性和它的表达。LRRC4的重表达将U251细胞阻滞于G0/G1期。结论:LRRC4主要通过MAPK通路的关键分子JNK2上调磷酸化的c-Jun,抑制突变型的P53的表达,进而下调cyclinD1的启动子活性和cyclinD1的表达,将U251细胞阻滞于G0/G1期。
- 武明花黄琛李小玲周鸣周艳宏张祖平李桂源
- 关键词：胶质瘤LRRC4MAPK信号通路U251细胞
- LRRC4基因在脑胶质瘤细胞系中表达缺失被引量：2
- 2007年
- 目的:研究LRRC4基因在恶性脑胶质瘤细胞系中的表达情况。方法:采用RT-PCR结合Northern-blot检测LRRC4基因在U251,U87,SF126,SF767,BT325及M17等6种恶性脑胶质瘤细胞系中的表达;并应用聚合酶链反应结合DNA直接测序法检测LRRC4基因在恶性胶质瘤细胞系中的突变情况;进一步结合生物信息学分析研究LRRC4基因在U251细胞系中表达缺失的原因。结果:LRRC4基因在6种恶性胶质瘤细胞系中均表达缺失。通过对胶质瘤细胞系基因组DNA中LRRC4的ORF序列的PCR扩增和测序分析,发现SF126,SF767,M17细胞中,ORF序列第279位氨基酸的第3个密码子存在同义点突变(3/5),而U251和U87细胞基因组DNA中发生了LRRC4基因的缺失突变(2/5)。结论:LRRC4基因在恶性胶质瘤细胞中表达缺失,染色体7q32-ter的纯合性缺失是LRRC4基因在U251细胞中表达缺失的原因。
- 武明花李小玲黄琛唐运莲张祖平李桂源
- 关键词：脑胶质瘤细胞基因突变
- LRRC4通过LRR结构域抑制脑胶质母细胞瘤U251细胞的生长和侵袭被引量：2
- 2007年
- LRRC4基因是候选的脑胶质瘤抑制基因,其细胞外区域含有一个保守的LRR和一个IgC2结构域.本研究结合生物信息学分析,通过一步PCR法构建了不同结构域缺失的突变体(pcΔLRR,pcΔIgC2或pcΔTm).并将全长LRRC4(pcLRRC4)和各突变体转染至U251细胞,构建了稳定表达的U251细胞系.通过MTT,软琼脂集落形成及Transwell体外侵袭模型检测发现,全长LRRC4能够抑制U251细胞的生长和侵袭;LRR结构域缺失的突变体不再抑制U251细胞的生长和侵袭;而IgC2或Tm区缺失的突变体仍然可以抑制U251细胞的生长和侵袭.该结果表明,LRRC4抑制U251细胞的生长和侵袭依赖于它的LRR结构域,而不是IgC2或Tm结构域.
- 武明花唐运莲李小玲曹利李桂源
- 关键词：脑胶质瘤U251细胞
- 5-Aza-CdR对胶质瘤细胞生长及LRRC4基因异常甲基化的影响被引量：10
- 2009年
- LRRC4是一个新发现的胶质瘤抑瘤基因,它在多种胶质瘤细胞系和胶质瘤组织表达缺失或下调,前期研究结果表明胶质瘤细胞和组织中LRRC4的编码区未发生突变、缺失或重排.为了获得LRRC4作为胶质瘤抑瘤基因的进一步证据,采用去甲基化制剂5-Aza-CdR处理LRRC4表达缺失的SF126和SF767胶质瘤细胞,MSP和RT-PCR检测表明,LRRC4的启动子在表达缺失的SF126和SF767细胞存在完全的甲基化,而5-Aza-CdR能逆转LRRC4启动子的甲基化状态,恢复LRRC4的表达.MTT法测定显示,5-Aza-CdR使SF126和SF767胶质瘤细胞增殖受到明显抑制,并呈时间和剂量的依赖性.同时流式细胞仪检测显示,5-Aza-CdR使SF126和SF767胶质瘤细胞周期阻滞于G0/G1期.因此,5-Aza-CdR能抑制胶质瘤细胞SF126和SF767增殖并干扰其细胞周期,LRRC4启动子异常甲基化是其在胶质瘤细胞中表达缺失的重要机制,5-Aza-CdR能逆转LRRC4基因的甲基化,恢复LRRC4的表达,为LRRC4作为胶质瘤去甲基化治疗的靶标提供了科学依据.
- 张祖萍武明花唐海林王蓉李丹李小玲李桂源
- 关键词：5-AZA-CDR胶质瘤细胞DNA甲基化
- 全反式维甲酸对C6胶质瘤细胞增殖分化的影响
- 2008年
- 目的:研究全反式维甲酸对C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响。方法:用5 mg/L全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导C6胶质瘤细胞,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验绘制细胞生长曲线以考察ATRA对细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞仪、光镜、透射电镜和免疫组织化学染色鉴定细胞的分化状况。结果:C6胶质瘤细胞经全反式维甲酸诱导后,细胞增殖受到明显抑制,并且密度明显减少(P<0.01)。细胞周期受阻,G0/G1期延长,S期细胞比例明显减少(P<0.01)。光镜观察到诱导前的C6胶质瘤细胞呈正常的成纤维细胞形态,而诱导后的C6胶质瘤细胞变细长,中间呈圆形或卵圆形,两端形成长尖突起。流式细胞仪的凋亡率检测显示,未见明显的凋亡;透射电镜观察显示,细胞有早期凋亡改变,且胞浆内空泡增多,线粒体和内质网丰富,细胞结构基本趋向正常。C6胶质纤维酸性蛋白表达明显增强。结论:全反式维甲酸能抑制胶质瘤细胞的增殖,并能诱导C6细胞分化。
- 唐珂曹利范松青武明花黄河周艳宏周鸣唐运莲王蓉曾芳廖萍李小玲李桂源
- 关键词：分化全反式维甲酸胶质纤维酸性蛋白胶质瘤
- LRRC4通过SDF-1α/CXCR4生物学轴抑制脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)通过SDF-1α/CXCR4(stromal cell-derivedfactor-1α/CXC receptor 4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将LRRC4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实验、侵袭实验、细胞运动试验、划痕标记荧光染料示踪实验,研究SDF-1α干预前后LRRC4对U251细胞迁移能力的影响。结果:将LRRC4基因转入脑胶质瘤细胞U251,通过RT-PCR实验发现CXCR4的表达下调。用CXCR4的特异配体SDF-1α干预后,肿瘤黏附内皮实验、侵袭实验、细胞迁移实验、划痕标记染料示踪实验表明脑胶质瘤细胞迁移能力增强,LRRC4可以抑制细胞的这种侵袭迁移能力。SDF-1α能够改善细胞间的通讯能力,LRRC4可以进一步增强这种通讯能力。结论:SDF-1α/CXCR4的相互作用可以增强脑胶质瘤细胞U251的运动迁移能力,LRRC4基因可以通过调控SDF-1α/CXCR4生物学轴有效地抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力。
- 陈琼武明花周艳宏唐运莲黄琛李小玲李桂源
- 关键词：LRRC4SDF-1Α/CXCR4脑胶质瘤
- 启动子区CpG岛高甲基化诱导LRRC4基因在胶质瘤中的表达沉默
- LRRC4(leucine—rich repeat C4)是一个脑组织相对特异性表达基因,也是一个胶质瘤抑制性基因。LRRC4在原发性脑胶质瘤组织中表达下调或缺失,但序列分析表明,LRRC4基因无点突变,重排,以及染色体...
- 武明花张祖平刘恩伊李夏雨李小玲李桂源
- 关键词：LRRC4胶质瘤启动子甲基化
- 文献传递
- 脑组织特异性基因/脑胶质瘤抑瘤基因LRRC4的功能研究进展被引量：4
- 2007年
- LRRC4是一个脑组织相对特异性表达基因,是采用表达序列标签(EST)介导的定位-候选克隆策略结合5′-RACE技术从染色体7q31～32区域克隆出来的一个富亮氨酸重复(LRR)超家族的新成员.LRRC4是神经系统发育与轴突生长的功能基因.LRRC4的表达与胶质瘤的级别进展呈负相关,其表达缺失参与脑胶质瘤进展的晚期事件.LRRC4能够下调一系列神经生长因子或受体(如IGF,EGF,PDGF,CNTF,bFGF,GDNF和BDNF等)的表达,通过调控多种信号转导通路(K-Ras/c-Raf/ERK/MAPK,PI-3K/AKT/NF-κB,p70S6/PKC,STAT3以及JNK2/c-Jun/mp53等)将U251细胞阻滞在G1晚期,抑制脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭,而且这种抑制作用依赖于它的LRR结构域.LRRC4不能诱导胶质瘤细胞的凋亡,而是诱导胶质瘤细胞向胶质样细胞分化.
- 武明花李小玲李桂源
- 关键词：LRRC4脑胶质瘤信号转导
