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郭菲
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- 所属机构:南昌大学
- 所在地区:江西省 南昌市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
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- 汪涟郭菲闵定宏廖新成余绍青龙星星丁香郭光华
- 关键词：压力性溃疡糖尿病足细胞因子类慢性难愈性创面
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- 郭菲何凤娄远蕾汪泱李国辉胡意
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- 目的建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系。方法取第3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果(1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核/质比高。RT-PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB)。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。
- 冯年花谢安娄远蕾阮琼芳郭菲吴珏邓志锋汪泱
- 关键词：细胞培养饲养层
- miRNA-92a在缺血再灌注肾损伤中的表达变化被引量：14
- 2010年
- 目的观察miRNA-92a在缺血再灌注(I/R)损伤4h、24h后小鼠肾组织的表达变化,探讨肾脏缺血损伤后血管生成的可能机制。方法采用双侧夹闭小鼠肾蒂的方法制备急性缺血再灌注肾损伤模型,术后灌注24h后收集血清和肾脏标本,分别检测肾功能及观察肾组织病理学改变。实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)的方法检测小鼠I/R损伤4h和24h组中miRNA-92a的表达水平。结果(1)采用血清肌酐(Scr)和尿素氮(UN)评估肾功能,肾脏I/R24h组与假手术组(sham)比较有显著性差异(P<0.05);HE染色观察肾组织病理改变明显,肾缺血再灌注模型成功。(2)而I/R4h和24h后,miRNA-92a的表达上调,其上调倍数分别为3.23±0.74,1.53±0.33(P<0.05)。结论小鼠I/R损伤中miRNA-92a表达显著上调,miRNA-92a可能参与缺血再灌注肾组织损伤的血管再生的调控过程。
- 吴珏刘芬阮琼芳娄远蕾郭菲杨阳汪泱
- 关键词：微小RNA小鼠肾脏缺血再灌注损伤
- TNF-α诱导宫颈癌细胞增殖、转移和耐药相关基因表达的时效分析被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)对宫颈癌Hela细胞增殖、转移和化疗耐药相关基因表达的影响。方法以外源性TNF-α作用于宫颈癌Hela细胞,作用不同时间点(0-24h)取样分析细胞周期蛋白cyclinD1,锌指蛋白A20,钙调神经磷酸酶CaN,基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-9),金属硫蛋白(MT-1,MT-2)等表达的时间-效应。结果TNF-α作用宫颈癌Hela细胞不同时间段(20min,1h,6h,24h),cyclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达都有不同程度改变。RT-PCR检测宫颈癌Hela细胞经TNF-α作用后cyclinD1、MMP-1、MT-2 mRNA的表达6小时达高峰24小时回落,A20、CaN、MMP-9、MT-1 mRNA表达1小时达高峰24小时回落。结论TNF-α诱导宫颈癌Hela细胞cyclinD1、A20、CaN、MMP-1、MMP-9、MT-1、MT-2 mRNA的表达具有时效性。TNF-α可能促进宫颈癌Hela细胞增殖、转移及耐药。
- 缪丽芳陆丹汪泱刘丝荪郭菲
- 关键词：宫颈癌肿瘤坏死因子-Α耐药基因
- TNF-α体外诱导rMSC向神经细胞分化的研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。方法采用密度梯度离心法分离rMSCs,取培养至3～5代的rMSCs以含TNF-α 5ng/ml的培养基培养,镜下观察细胞诱导后形态的变化,采用免疫荧光细胞化学染色法检测神经前体细胞标志物巢蛋白nestin和神经元特异性烯醇化酶在细胞中的表达强度和分布。结果rMSCs经TNF-α诱导6h后基本表现为典型神经样细胞形态,nestin和NSE呈阳性表达。结论TNF-α具有体外诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的作用。
- 娄远蕾邓志锋赖贤良谢安冯年花郭菲汪泱
- 关键词：神经细胞分化
- 吸入性损伤患者血浆中ANP、BNP的临床意义
- 2008年
- 目的探讨烧伤吸入性损伤患者伤后早期血浆中心房肽(ANP)、脑钠肽(BNP)浓度变化的临床意义。方法55例烧伤患者根据临床诊断,分成吸入性损伤组和非吸入性损伤组,吸入性损伤组中再根据损伤轻重程度分非气管切开与气管切开2组。用酶联免疫吸附法(ELSA)检测患者血浆中ANP、BNP浓度,同时查动脉血氧分压(PO2)。比较吸入性损伤与非吸入性损伤患者ANP、BNP、PO2差异,比较气管切开组与非气管切开组血浆ANP、BNP、PO2差异,比较气管切开组术前、术后ANP、BNP、PO2差异。健康成人作为对照组。结果55例烧伤患者血浆中ANP、BNP浓度均高于对照组(P<0.001);吸入性损伤组ANP、BNP浓度高于非吸入性损伤组(P<0.001),PO2差异无统计意义(P>0.05);气管切开组ANP、BNP高于非气管切开组(P<0.01),PO2差异无统计学意义(P>0.05);气管切开组术前、术后ANP浓度变化不大,差异无统计意义(P>0.05),BNP浓度下降、PO2升高,差异有显著性意义(P<0.05)。结论烧伤后血浆中ANP、BNP浓度明显上升;合并吸入性损伤的患者早期ANP、BNP浓度明显高于非吸入性损伤,ANP、BNP浓度的变化比PO2早且敏感,能较好的反映吸入性损伤程度,指导临床诊断治疗。
- 赵英钟荣梅郭菲潘小云余于荣李国辉
- 关键词：吸入性损伤心房肽脑钠肽动脉血氧分压
- 可注射性藻酸锶凝胶应用于骨组织工程的体外研究被引量：1
- 2013年
- 目的体外研究藻酸锶凝胶作为骨组织工程支架材料的应用潜力，为可注射骨组织工程支架材料的制备提供依据。方法制备2．0wt％藻酸钠溶液，分别与0．2mol／LSrCl2及CaCl2胶凝液离子交联形成藻酸锶和藻酸钙凝胶，扫描电镜观察微观结构并测其压缩模量、溶胀率及降解率。采用全骨髓培养法分离培养兔BMSCs并鉴定，将第5代BMSCs分别接种于藻酸锶凝胶（实验组）和藻酸钙凝胶（对照组），观察其生长、黏附及增殖情况；两组凝胶来源的细胞成骨诱导后采用细胞化学法检测ALP活性，荧光定量RT-PCR检测成骨相关基因Osterix（OSX）、I型胶原、Runx2mRNA表达，茜素红染色、VonKossa染色检测钙盐沉积情况，并设同法制备的藻酸钙凝胶来源的BMSCs作为空白对照组。结果藻酸锶与藻酸钙凝胶微观结构相似，均有均匀的孔隙结构；藻酸锶及藻酸钙凝胶压缩模量分别为（186．53-4-8．37）、（152．14-4-7．45）kPa，比较差异有统计学意义（t=6．853，P=0．002）；溶胀率分别为14．32％±1．53％和15．25％±1．64％，比较差异无统计学意义（t=-0．737，P=0．502）；两种凝胶的体外降解性均较好，第20、25、30天藻酸锶凝胶的降解率明显低于藻酸钙凝胶（P〈0．05）。BMSCs于两组凝胶中1～4d时呈悬浮生长，之后逐渐黏附生长并形成大量细胞集落。三维培养第21天，实验组细胞的DNA含量为（4．38±0．24）g，显著高于对照组的（3．25±0．21）g（t=-8．108，P=0．001）。成骨诱导培养第12天，实验组ALP活性为（15．28±1．26）U／L，显著高于对照组的（12．07±1．12）U／L（P〈0．05）。实验组OSX、I型胶原、Runx2mRNA相对表达量均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。成骨诱导培养第21天，两组茜素红染色及VonKossa染色均可见钙盐沉积，实验组的钙结节数量及磷酸盐沉积面积均显著高于对照�
- 涂以济吴添龙叶爱芳徐浚怀郭菲程细高
- 关键词：骨组织工程藻酸钙凝胶
- 大鼠骨髓源性血管内皮祖细胞的体外培养与鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的：目前内皮祖细胞主要从骨髓、脐带血和外周血获取,但其分离培养方法尚不成熟,外周血来源因损伤小、易获取而被普遍使用,但得到的内皮祖细胞纯度较低。实验拟探讨大鼠骨髓来源内皮祖细胞体外培养、诱导扩增和生物学特性鉴定方法。方法：实验于2006-08/2007-08在南昌大学第一附属医院泌外研究所完成。①实验材料：2周龄SD大鼠由南昌大学医学院动科部提供,雌雄不拘,清洁级,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：应用梯度离心法采集大鼠骨髓单个核细胞,贴壁筛选法分离内皮祖细胞,置于添加了血管内皮细胞生长因子、人碱性成纤维细胞生长因子、白血病抑制因子、表皮生长因子的M199培养液中扩增培养,对培养2周的细胞采用免疫荧光染色鉴定细胞标志物血管性血友病因子、血管内皮生长因子受体-2、CD34、CD133,采用RT-PCR法检测内皮细胞特异性分子标志血管性血友病因子、FLK-1、Tie-2、CD34、CD133、eNOS基因表达。结果：①培养4d,光电显微镜下可见细胞集落形成,梭形贴壁细胞从集落中央以放射状向外周生长。培养7-10d,细胞集落相互连接,呈典型的＂鹅卵石＂样外观。2周左右可见细胞排列成条索状结构并可呈“微血管样”排列生长。②贴壁细胞免疫荧光染色鉴定细胞标志物血管性血友病因子、FLK-1、CD34、CD133阳性,RT-PCR法检测内皮细胞特异性分子标志血管性血友病因子、FLK-1、Tie-2、CD34、CD133、eNOS基因阳性表达。结论：采用梯度离心法从骨髓中分离单个核细胞,经诱导培养可实现内皮祖细胞的分离培养和体外扩增。
- 邓志锋鲁友明汪泱娄远蕾郭菲谢安
- 关键词：内皮祖细胞骨髓源性体外培养
- 氯化镧对脂多糖与单核细胞的结合及CD14表达的影响被引量：2
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- 用流式细胞术检测氯化镧(LaCl3)对内毒素(LPS)与单核细胞的结合及CD14表达的影响。结果显示LPS能够与单核细胞结合,LaCl3具有抑制LPS与单核细胞结合的作用;LPS可以上调全血单核细胞表面CD14的表达,并在一定范围内呈剂量依赖关系,LaCl3对LPS上调单核细胞表面CD14的表达具有一定的抑制作用,但不能完全阻断。
- 汪泱郭菲王共先胡峰黄学明张红艳
- 关键词：细胞生物学氯化镧CD14单核巨噬细胞
