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付远辉
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- 所属机构:北京交通大学
- 所在地区:北京市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 何金生
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- 作品数:142被引量:424H指数:9
- 供职机构:北京交通大学
- 研究主题:呼吸道合胞病毒 人呼吸道合胞病毒 阿尔茨海默病 重组腺病毒 单克隆抗体
- 彭向雷
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- 作品数:39被引量:34H指数:3
- 供职机构:北京交通大学
- 研究主题:呼吸道合胞病毒 呼吸道合胞病毒疫苗 阿尔茨海默病 人呼吸道合胞病毒 反向遗传学
- 郑妍鹏
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- 作品数:66被引量:214H指数:8
- 供职机构:北京交通大学
- 研究主题:毛细管电泳 电导检测 呼吸道合胞病毒 阿尔茨海默病 人呼吸道合胞病毒
- 洪涛
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- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
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- 张梅
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- 作品数:49被引量:110H指数:6
- 供职机构:安徽医科大学
- 研究主题:人呼吸道合胞病毒 呼吸道合胞病毒 真核表达 华蟾素 F
- 人呼吸道合胞病毒感染HEp-2细胞差异表达基因的生物信息学分析
- 2021年
- 目的分析人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)感染HEp-2细胞后差异性表达的基因,为发现HRSV防治的潜在靶点提供线索。方法在公共基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中收集HRSV感染的HEp-2细胞表达谱数据。运用R语言分析在HRSV感染4、8、12和15 h均表现出差异表达的基因,对其进行GO分析、KEGG通路分析、蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络构建等。以HRSV感染HEp-2细胞4 h后,随机选择PPI中参与蛋白互作相对较高的基因在转录水平进行qRT-PCR验证。结果筛选出101个差异表达基因,其中表达上调的有92个,表达下调的有9个。功能富集分析发现HRSV感染引起HEp-2细胞中免疫应答及其信号转导等多条信号通路产生明显变化。选择的6个差异表达基因qRT-PCR验证结果与转录组数据趋势一致。结论HRSV感染HEp-2细胞引起的基因差异表达及信号通路变化,对HRSV致病分子机制及防治策略研究具有一定意义。
- 苏彦斌刘勇王烨王朔薛君宇张天笑彭向雷郑妍鹏张丽姝付远辉何金生
- 关键词:人呼吸道合胞病毒生物信息学信号通路
- 人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法
- 本发明公开了一种人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法。该方法通过以RSV感染HEp-2细胞或Vero细胞,待细胞出现完全病变后,收获细胞及培养基,离心,取上清,PEG6000沉淀,获得的沉淀物经溶解后通过蔗糖密度梯度离心进一...
- 何金生郑妍鹏唐亚宁付远辉
- 文献传递
- 免疫磁珠纯化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立被引量:1
- 2011年
- 目的利用免疫磁珠分离技术(IMS)建立快速纯化人呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F)的方法。方法表达RSV F的重组腺病毒FGAd/F感染293细胞,收获细胞裂解液,利用兔抗人RSV多抗包被表面活化的免疫磁珠富集和纯化F蛋白,同时建立夹心ELISA,检测纯化的F蛋白浓度以及F蛋白的回收率。结果采用IMS成功纯化分子量为145~170 ku区间的二聚体RSV F蛋白,SDS-PAGE分析结果显示F蛋白得到很好的纯化,纯化所得RSV F蛋白浓度为116 mg/L,回收率为41.1%。结论利用IMS可有效地富集和纯化RSV F蛋白。
- 方璇何金生唐亚宁付远辉王小波郑妍鹏
- 关键词:免疫磁化分离
- 抗人呼吸道合胞病毒融合糖蛋白单克隆抗体的制备及体外鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的:获得能稳定分泌抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)融合糖蛋白(fusion glycoprotein,F)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株,以期用于RSV感染的早期诊断和被动免疫治疗研究。方法:通过杂交瘤技术制备可特异性识别RSV F的单抗,体外鉴定生物学特性。结果:获得了可分泌抗RSV F蛋白的杂交瘤细胞株F8,体外连续传代培养2个月,能稳定分泌抗体F8,培养上清效价为1∶1000,亲和常数(Ka)为6.8×108L/mol。F8属IgG1型抗体,可特异性识别RSV F1亚单位的AA 205-222。免疫酶法蚀斑减少中和实验证实F8具有体外中和活性及融合抑制活性。结论:获得具有中和活性的抗RSV F蛋白的单克隆抗体,为RSV感染的早期诊断及被动免疫治疗等奠定了基础。
- 张梅王小波付远辉方璇王鑫张莹何金生
- 关键词:人呼吸道合胞病毒单克隆抗体杂交瘤技术
- 靶向树突状细胞的呼吸道合胞病毒F重组蛋白的构建与体外活性分析
- 2016年
- 分析以人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,RSV)融合糖蛋白(fusion glycoprotein,F)为抗原靶向DEC205/CD205受体策略对重组F蛋白表达及活性的影响.F蛋白是RSV的重要中和抗原,克隆RSV F蛋白胞外区的编码基因至可识别鼠树突状细胞(Dendritic cells,DCs)DEC205受体的单链抗体(single chain antibody of anti-DEC205,scDEC)的C端,构建可表达重组F蛋白(scDECF)的质粒pVAX1/scDECF,Western blot方法检测scDECF的表达,免疫荧光法和流式细胞术检测表达的scDECF与DEC205受体的结合活性.经Western blot证实在pVAX1/scDECF转染的293T细胞成功表达了scDECF.将所获得的细胞培养上清与表达鼠DEC205受体的细胞CHOmDEC205孵育,用免疫荧光和流式细胞术证实:与作为对照的重组F蛋白scISOF相比,所获得的scDECF与CHOmDEC205细胞呈现明显的结合.本研究成功表达了重组蛋白scDECF,且所获得的重组蛋白scDECF具有与表达DEC205受体的细胞特异性结合的活性.
- 华颖彭向雷付远辉郑妍鹏洪涛何金生
- 关键词:呼吸道合胞病毒树突状细胞
- “统计学方法选择及SPSS实现”思政内涵挖掘
- 2024年
- “生物统计学”是生物学研究生重要的“工具性”专业课程,对其科研和综合素质的培养及完成科研课题具有重要的作用。通过“统计学方法选择及SPSS实现”课程教学实践,探索建立适合于生物学专业研究生“生物统计学”课程思政教育模式,并进一步挖掘课程思政教育内涵。对北京交通大学的2020级、2021级和2022级生物专业参与“统计学方法选择及SPSS实现”任选课程的43名研究生进行授课前后的问卷调查及分析。结果表明,超过95%的研究生迫切希望掌握生物统计学知识,通过“生物统计学”课程学习,研究生对生物统计学的基本概念、统计学方法选择及SPSS软件使用等掌握程度显著提高。在课程中融入思政教学案例,挖掘生物统计学思政教育内涵,使学生接受全方位、立体化的生物统计学思政教育,培养学生严谨务实的态度、实事求是的工作作风和理性实证的探索精神。
- 付远辉何金生
- 关键词:生物统计学爱国主义情怀
- 辅助病毒依赖型腺病毒载体转基因的体外表达效率被引量:1
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- 构建可表达增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的辅助病毒依赖型腺病毒载体(Helper-dependent adenoviral vector,HDAd),并完成大量制备、纯化和体外表达鉴定。荧光显微镜证实HDAd/EGFP可表达,电镜下观察到经CsCl纯化后的腺病毒的典型形态。分光光度计法测定病毒的浓度为4.0×1012颗粒数(Virus particle,vp)/mL。与可表达EGFP的第一代腺病毒载体(First generation adenoviral vector,FGAd)FGAd/EGFP进行了体外感染和转基因表达效率的比较研究,分别用约2000vp/细胞的HDAd/EGFP和FGAd/EGFP感染A549细胞,流式细胞仪检测EGFP的表达情况。通过相同时间点流式细胞仪分析EGFP的表达情况,可见HDAd/EGFP感染早期的A549细胞较FGAd/EGFP有更高的荧光表达率及更高的表达强度,显示HDAd载体具有转基因瞬时高表达的特性,是一种更有价值的疫苗载体。
- 郑娴娴何金生付远辉徐少华谢灿石长信张梅王小波洪涛
- 关键词:增强型绿色荧光蛋白转基因表达
- 表达人呼吸道合胞病毒融合蛋白的重组腺病毒的免疫保护作用
- 人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,RSV)广泛分布于世界各地,是导致婴幼儿严重下呼吸道感染的最重要的病毒病原之一,老年人和免疫缺陷病人也易遭受RSV引起的严重感染。RS...
- 付远辉
- 关键词:疫苗载体重组腺病毒辅助病毒博士学位论文滴鼻免疫
- 文献传递
- 呼吸道合胞病毒载体疫苗研究进展被引量:4
- 2012年
- 人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染的最重要的病毒病原,RSV载体疫苗可在人细胞内从头合成,形成的蛋白质构象与RSV自然感染后表达的完全相同,不会导致抗原表位的丧失或变化,形成的免疫力更利于抵抗随后的自然感染;经黏膜途径免疫不会产生疾病增强作用,且能突破母传抗体的干扰,因而受到广泛关注。对近年来RSV载体疫苗的研究进展进行了综述。
- 付远辉何金生洪涛
- 关键词:呼吸道合胞病毒载体疫苗
- 呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品
- 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品。该全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列包括S155C、S190F、V207L和S290C四个突变位点,保留了融合糖蛋白的跨膜区及胞内区,...
- 何金生付远辉刘美琴彭向雷郑妍鹏黄蕾
- 文献传递