刘龙丁
作品数： 167被引量：231H指数：7
  • 所属机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
  • 所在地区:云南省 昆明市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

李琦涵
作品数：272被引量：560H指数：10
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
研究主题：单纯疱疹病毒 肠道病毒71型 疫苗 HSV-1 恒河猴
王丽春
作品数：105被引量：250H指数：7
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
研究主题：肠道病毒71型 单纯疱疹病毒 灭活疫苗 HSV 人二倍体细胞
王晶晶
作品数：72被引量：113H指数：6
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
研究主题：肠道病毒71型 人二倍体细胞 恒河猴 腮腺炎减毒活疫苗 腮腺炎病毒
董承红
作品数：78被引量：150H指数：6
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
研究主题：肠道病毒71型 单纯疱疹病毒 灭活疫苗 免疫原性 人二倍体细胞
廖芸
作品数：59被引量：83H指数：5
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
研究主题：肠道病毒71型 灭活疫苗 人二倍体细胞 恒河猴 疫苗
作品列表
一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法
本发明公开了一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法。提取EV‑D68病毒基因组RNA，通过反转录和PCR扩增反应得到VP1基因的cDNA，将其克隆到克隆载体，再将转入表达载体得到重组表达质粒，转化宿主菌并用IPTG诱...
刘龙丁郑惠文孙明王晶晶郭磊李冰香龙海亭李洪哲范海涛杨泽宁储曼曼黄星
文献传递
EV71灭活疫苗(人二倍体细胞)在恒河猴婴猴模型中的免疫保护性分析被引量：6
2011年
肠道病毒71型作为引起儿童群体常见传染性手足口病（HFMD）的主要病原，具有导致少量感染个体出现脑炎等神经系统病变以及相关心肺功能衰竭的病理学特性．因此其预防性疫苗的研发具有重要的公共卫生意义．在前期工作的基础上，一种EV71灭活病毒疫苗（人二倍体细胞）在本研究中基于恒河猴婴猴模型进行了相应的免疫保护性分析．以160EU剂量对2～3月龄婴猴进行0，4周免疫后，动物在第4周接受了剂量为10。～CCID50的病毒经呼吸道的攻击．对病毒攻击后动物在14天内的临床症状、血液生物学、器官病原学分布以及病理学检测的动态观察表明，经疫苗免疫的动物未出现对照动物所具有的特征性临床表现，其血液生物学及病理学检测均无异常．同时，器官病原学分布亦呈阴性．结合动物中和抗体的明确增长及对照动物的综合表现分析，本文的工作证实了该EV71灭活病毒疫苗（人二倍体细胞）在恒河猴婴猴体内的免疫保护性．
李龙刘尚允董承红赵红玲王晶晶张莹纳锐雄谢忠平崔萍芳王丽春廖芸唐东红高家红刘龙丁李琦涵
关键词：肠道病毒71型
SIV/HIV嵌合病毒在猕猴体内的连续传代和分离
为了评价SIV/HIV嵌合病毒SHIV-CN97001的复制能力和感染致病性，进行猕猴体内连续传代适应性研究。实验：使用16只无特定病原体(SIV，STLV21，SRV和BVfree)猕猴分5次传代。前病毒DNA质粒经肌...
刘龙丁王晶晶孙晓梅代解杰李琦涵
关键词：病毒分离DNA质粒
文献传递
IFN-α刺激相关细胞蛋白TIIMPSC和S24v2的功能分析
干扰素具有广泛的生物学功能，如抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、调控细胞增殖和分化等。IFN-α作为Ⅰ型干扰素家族的重要成员，主要产生于非免疫细胞，其功能的多样性是通过诱导细胞表达多种蛋白质而实现的。IFN-α作用于细胞可启动一...
刘龙丁
关键词：干扰素-Α差异基因蛋白功能
文献传递
DNA实验性疫苗应用技术研究
刘龙丁董承红马绍辉王丽春姜莉王炯李琦涵赵红玲和绍清孙明王晶晶施海晶
以恶性疟原虫子孢子（CSP）DNA疫苗作为引导题目，重点探索了DNA免疫途径、单基因免疫效果分析、多基因线性联合体免疫学效果分析，和治疗性DNA免疫在肿瘤抑制效应中的效果分析。其中从DNA免疫的途径及单基因免疫后的效果分...
关键词：
关键词：DNA疫苗多表位基因
HSV-1突变株M6感染人支气管上皮细胞后对巨噬细胞介导的免疫反应的影响
2024年
目的探究1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)突变株M6感染人支气管上皮细胞(16HBE细胞)后对巨噬细胞介导的免疫反应的影响。方法用HSV-1感染16HBE细胞分析培养液中细胞因子的变化;将巨噬细胞与被HSV-1毒株感染的16HBE细胞的上清液共培养并通过尾静脉回输至小鼠体内,分别在第1、3、7、28、56、90天对小鼠淋巴结细胞因子表达水平、脾脏T细胞比例变化、小鼠中和抗体表达水平以及特异性T细胞反应进行检测。结果16HBE细胞被HSV-1突变株感染后,上清液中募集和激活巨噬细胞相关的细胞因子均较高水平表达但略低于野毒株组;尾静脉回输实验后,突变株组小鼠淋巴结炎症因子、趋化因子和T细胞的比例随时间发生了不同的变化,并引起了弱于野毒株组的体液免疫和强于野毒株组的特异性T细胞免疫反应,且仅极少数与野毒株组具有显著性差异(P<0.05)。结论16HBE细胞被HSV-1突变株M6感染后能够释放募集和激活巨噬细胞的细胞因子,使巨噬细胞携带HSV-1突变株的特异性活化信息,激活了宿主的免疫系统,诱导了宿主的体液免疫和细胞免疫。
张振潇张晶晶廖芸李丹丹李丹丹刘龙丁
关键词：1型单纯疱疹病毒人支气管上皮细胞巨噬细胞突变株
与HSV-1 UL31相互作用的宿主蛋白TMEM140生物学功能研究
管莹刘龙丁李琦涵
CXCL4基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定
2016年
目的饲养、繁殖并鉴定CXC趋化因子配体4[chemokine(C-X-C motif)ligand 4,CXCL4]基因敲除小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定基础。方法将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,剪取繁殖成功的子代小鼠耳朵,提取其基因组DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型;比较野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的体重变化及结直肠的长度,通过HE染色观察野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的结直肠形态结构;采用ELISA法验证CXCL4野生型和纯合子小鼠血清中CXCL4的表达。结果繁殖成功的子代小鼠有3种基因型:野生型、杂合子及纯合子;4、10周龄雌性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P<0.05),6、10周龄雄性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P<0.05);6周龄雌性纯合子小鼠结直肠长度明显长于同周龄的野生型小鼠(P<0.05),但结直肠的形态结构无显著改变;纯合子小鼠血清中CXCL4的表达量明显低于WT小鼠(P<0.05)。结论成功获得了CXCL4基因敲除纯合子小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定了基础。
宋杰胡云光胡雅洁王艳翠李嘉祺刘龙丁
关键词：基因敲除小鼠基因型
IL1R1基因敲除对于柯萨奇病毒A10感染C57BL/6乳鼠的影响
2024年
本研究通过柯萨奇病毒A组10型(Coxsackievirus A10, CV-A10)感染C57BL/6野生型乳鼠和白细胞介素-1受体1型(Interleukin 1 Receptor 1,IL-1R1)缺失的C57BL/6乳鼠,比较两者之间的临床症状、病毒体内增殖特征和病理特征差异,以探讨IL-1R1基因缺失对于CV-A10感染乳鼠的影响。本研究采用颅内方式感染C57BL/6野生型和IL-1R1^(-/-)乳鼠,每日记录乳鼠临床症状及死亡情况;两组乳鼠感染后于1、3、5、7、9d处死,并采集各组织样本。通过实时荧光定量PCR(Real-time reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测组织内病毒基因拷贝数;使用HE染色检测乳鼠组织的病理学变化;RT-qPCR检测病毒感染乳鼠后的不同时间点组织内的细胞因子mRNA转录水平;利用免疫荧光分析对IFN-γ、IL-1β、IL10的细胞因子表达进行分析。结果发现相比于空白对照组,随着感染进程的增加,两组乳鼠均表现出发育迟缓、肢体麻痹等症状;另外在感染后第5d,与野生型乳鼠相比,IL-1R1^(-/-)乳鼠心脏、肺脏和肾脏组织的CV-A10病毒载量均高于野生型乳鼠,且差异具有统计学意义;通过HE染色分析发现,在感染后期IL-1R1^(-/-)乳鼠的肺组织病变严重程度高于同时期野生型乳鼠。在CV-A10感染中后期IL-1R1^(-/-)乳鼠的细胞因子mRNA转录水平明显升高,然而野生型乳鼠的细胞因子mRNA主要在感染后1-2天呈现一过性增加。综上表明,C57BL/6野生型和IL-1R1^(-/-)乳鼠均对CV-A10病毒易感;与野生型乳鼠相比,IL-1R1^(-/-)乳鼠的组织损伤更严重,特别是肺组织的损伤主要发生在CV-A10病毒感染的中晚期;此外,IL-1R1缺陷小鼠在感染后期的各组织器官中检测到持续性的细胞因子表达。
刘长坤贺雅娜张子寒胡云光郑惠文刘龙丁
空肠弯曲菌鞭毛蛋白FlaA的原核表达及免疫原性分析被引量：1
2009年
目的:空肠弯曲菌鞭毛抗原FlaA蛋白人工表达及免疫原性的分析。方法:使用PCR方法获得flaA编码的基因,经确证后将该基因克隆到谷胱甘肽转移酶融合表达载体(pGEX-5x-1)中,构建了pGEX-flaA表达质粒,在大肠杆菌BL21中获得了相应表达,并采用Glutathione Sepharose4B进行纯化后获得目的蛋白,用该蛋白免疫小鼠制备了特异性抗血清,利用经培养获得CJ菌体的裂解液做为抗原,通过用最基本的免疫凝集及免疫扩散方法对该抗血清进行初步的分析。结果:pGEX-flaA重组菌株具有明显的表达带,其分子量与预期的结果相同,该表达蛋白占总蛋白的20%,使用裂解的CJ抗原粗纯液,免疫凝集试验观察阳性。结论:利用基因克隆-原核表达所获得FlaA融合蛋白是具有相应的免疫原性的。
杨庆文马绍辉刘龙丁李琦涵
关键词：空肠弯曲菌免疫原性
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