荣俊
作品数： 82被引量：136H指数：6
  • 所属机构:长江大学
  • 所在地区:湖北省 荆州市
  • 研究方向:农业科学
  • 发文基金:湖北省教育厅资助项目

相关作者

程太平
作品数：124被引量：230H指数：6
供职机构：长江大学动物科学学院
研究主题：传染性法氏囊病 仔猪 IBDV 猪病 新城疫病毒
匡红艳
作品数：33被引量：61H指数：4
供职机构：长江大学生命科学学院
研究主题：尿酸氧化酶 尿酸 维生素C 转铁蛋白 肾病综合征
李国攀
作品数：16被引量：24H指数：3
供职机构：长江大学
研究主题：蛋白 病毒样颗粒 流行病学调查 ELISA检测试剂盒 多杀性巴氏杆菌
刘晓娜
作品数：14被引量：11H指数：2
供职机构：长江大学动物科学学院
研究主题：传染性法氏囊病 IBDV 传染性法氏囊病毒 基因工程亚单位疫苗 油乳剂疫苗
杨待建
作品数：63被引量：108H指数：6
供职机构：长江大学
研究主题：猪病 传染性法氏囊病 仔猪 母猪 疫苗
作品列表
猪圆环病毒3型抗体的ELISA检测试剂盒及其制备方法与应用
本发明提供了重组猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白、ELISA检测试剂盒及其制备方法与应用。该重组PCV3Cap蛋白的制备包括重组猪圆环病毒3型Cap蛋白基因的克隆及目的基因的筛选；重组猪圆环病毒3型Cap蛋白基因改造...
荣俊李国攀匡红艳徐保娟王席
文献传递
接种传染性法氏囊病基因工程重组亚单位油乳剂疫苗的产蛋鸡血清抗体与蛋黄抗体的相关性分析被引量：1
2006年
用笔者研制的传染性法氏囊病(IBD)基因工程重组亚单位油乳剂疫苗免疫产蛋鸡,接种后第22d及以后每周进行一次无菌采血,分离血清,用琼脂免疫扩散试验(AGID)检测IBD血清抗体水平;每周用同样的方法检测蛋黄中IBD抗体水平。对血清抗体水平和蛋黄中抗体水平进行相关性统计分析,得出两者之间的相关系数,并进行显著性检验。统计分析结果表明,相关系数r=0.7782,表明血清抗体水平和蛋黄中抗体水平相关关系属于强正直线相关;t值为14.02,t>t(∞)=2.576,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关系数极显著;F值为190.55,F>F0.01(1,128)=6.84,差异极显著(P<0.01),即血清抗体水平和蛋黄中抗体水平之间的相关关系极显著。
程太平荣俊彭本英曹志刚
关键词：IBD血清抗体蛋黄抗体AGID
重组猪尿酸氧化酶在血浆尿酸浓度测定中的应用
2012年
目的:探讨纯化重组猪尿酸氧化酶在人血浆尿酸检测中应用的可行性。方法:尿酸测定方法为酶比色法。每个测定样品做3个平行管,取平均值计算测定结果。比较自制血尿酸检测试剂与商品试剂的准确性、回收率、批间差、批内差和线性误差等主要性能指标。用自制试剂测定医院血浆样品,将测定结果与医院测定结果进行比较。结果:自制试剂与商品试剂的主要性能指标接近,自制试剂测定的血浆尿酸值与商品试剂测定值高度相关(R2=0.9741)。结论:重组猪尿酸氧化酶可用于酶比色法检测血浆尿酸含量。
匡红艳荣俊姜孝芳蔡联燊
关键词：尿酸
猪圆环病毒2b型病毒样颗粒表面可用于外源肽展示的位点分析
2022年
为了分析猪圆环病毒2b型病毒样颗粒(virus-like particles of Porcine circovirus type 2b,PCV-2b VLPs)表面具有外源肽展示潜力的位点,试验通过PyMol软件分析了PCV-2b VLPs表面的位点分布,并以高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Gp5的中和表位B(Epitope B,EpB)为外源肽,通过重叠PCR方法将表面位点替换为EpB,构建EpB嵌合的PCV-2b衣壳蛋白(Cap),利用原核表达系统诱导表达后进行凝胶层析纯化和Western-blot检测,并利用透射电子显微镜分析VLPs的组装状态。结果表明:在PCV-2b VLPs表面共筛选到8个可用于外源肽展示的位点,分别为S1(Y^(50)TIKRTTVKTP^(60))、S2(L^(75)PPGGGSN^(82))、S3(F^(124)VTKATAL^(131))、S4(V^(161)LDSTIDY^(168))、S5(Q^(183)TAGNVD^(189))、S6(I^(201)YDQE^(205))、S7(K^(222)DPPL^(226))、S8(S^(104)PITQGDRGVGS^(115))位点;将EpB替换展示到S1~S8位点后,构建的EpB嵌合的PCV-2b Cap能够在原核表达系统中获得不同程度的可溶性表达,其中S1~S7位点被EpB替换后能够实现较高水平的可溶性表达;8个目的蛋白均能被抗EpB抗体特异性识别,也均能够自组装形成VLPs,但粒径大小和形态与PCV-2b VLPs有不同程度的差异。说明试验筛选出的8个位点均有一定的外源肽展示能力。
李国攀荣俊谢明匡红艳
关键词：病毒样颗粒原核表达系统
传染性法氏囊病病毒VP2基因在多杀性巴氏杆菌弱毒株中的表达及免疫原性研究被引量：2
2008年
将重组质粒pET28 a-VP2转化禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40,探讨该转化菌表达的VP2是否具有免疫原性,以及重组表达质粒在转化菌内的稳定性。该转化菌在体外经IPTG或乳糖诱导,表达产物经AGP检测,VP2滴度可达1/4;经间接ELISA检测,VP2滴度可达1/512;经SDS-PAGE分析,出现VP2蛋白条带。结果表明,诱导表达的提取液中有一定量可溶性VP2。将pET28 a-VP2转化的禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40经诱导后,接种爱维茵肉仔鸡,21日龄及35日龄时,分别肌肉注射菌液0.1、0.2 m l/只(3×108个/m l活菌)。49日龄时,感染IBDV标准强毒株BC6/85。IBDVVP2血清抗体检测结果,不接种组(B)、0.1 m l接种组(C)、0.2 m l接种组(D)及空质粒转化菌接种组(E)的AGP抗体检测阳性率分别为0、65%、70%、0;间接ELISA抗体检测阳性率分别为0、80%、85%、0;IBDV强毒感染的免疫保护率分别为5%、75%、75%、5%。经t检验,B组与C组、B组与D组、E组与C组、E组与D组,P<0.05,差异均显著,但B组与E组、C组与D组,P>0.05,差异均不显著。免疫试验结果表明,诱导表达产物VP2可有效地刺激鸡体产生体液免疫应答,刺激鸡体建立的免疫力可以抵抗一定剂量强毒的攻击。在质粒稳定性测定中,第9代次及以后的3个代次,20个菌落的VP2目的基因PCR检测结果均为阴性,表明该质粒在禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40内是不稳定的。
程太平荣俊刘晓娜邵伟龚大春杨待建
关键词：多杀性巴氏杆菌IBDVVP2基因免疫原性
猪圆环病毒2型病毒样颗粒的纯化及鉴定被引量：11
2019年
为获得较高纯度的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)并对其进行结构和功能研究,本试验以大肠杆菌表达系统表达了PCV2重组Cap(PCV2 rCap)蛋白,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300 HR凝胶过滤层析、Capto Q离子交换层析、CsCl密度梯度离心等方法对其进行了纯化。通过Western blotting对纯化所得蛋白进行免疫反应性鉴定,透射电镜(TEM)观察纯化蛋白的粒径及形态,高效液相尺寸排阻色谱(HPSEC)检测其组分分布。结果显示,纯化后PCV2 rCap蛋白经SDS-PAGE检测,可见28 ku的目的蛋白带,灰度扫描法检测其纯度为97.53%。Western blotting结果显示,该处的特异性蛋白条带有明显的免疫反应性;TEM检测其为粒径17.35~19.24 nm的规则球形颗粒,表明所获得的PCV2 rCap蛋白在表达时能在菌体内自我装配成VLPs,且在纯化过程中没有被破坏而解聚,仍保持天然状态;HPSEC检测纯化样品中VLPs含量为92.67%。本试验结果为进一步研究PCV2 VLPs的空间结构及其免疫保护机制提供了参考依据。
王席李国攀陈清清徐保娟荣俊
关键词：纯化凝胶过滤层析离子交换层析
多杀性巴氏杆菌C48-16电转化条件的研究被引量：1
2007年
将C48-16感受态细胞和带有标记基因的质粒DNA混和后进行电转化,通过改变脉冲电压、脉冲次数和质粒DNA浓度等电转化的重要参数,探讨了巴氏杆菌(Pasteurella multocida)C48-16的电转化条件。结果显示:最佳脉冲电压为2.4～2.5kV,最佳脉冲次数为1～2。质粒DNA浓度为58～1.16×102μg/mL转化子最多。所有转化子经标记基因PCR鉴定为阳性克隆子。此方法与常规化学转化法相比操作简单、快速且转化成功率更高。
熊萍萍荣俊
关键词：电转化脉冲
传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫持续时间的研究
2008年
以三批次传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗分别免疫SPF雏鸡和产蛋鸡,以琼脂免疫扩散试验检测鸡血清抗体或卵黄抗体,以其阳性率达到80%为免疫期确定依据。试验结果表明,IBD重组亚单位疫苗对青年鸡及产蛋鸡接种一次的免疫期为15～16周。
程太平荣俊刘晓娜孙中杰
关键词：传染性法氏囊病重组亚单位疫苗
猪瘟病毒C株E2基因克隆及重组pGAPZα的构建
2010年
从猪瘟弱毒活疫苗中提取猪瘟病毒(CSFV)RNA,采用RT-PCR技术,得到E2基因的cDNA,连接到pMD-18T载体上进行测序。将E2基因的cDNA及质粒pGAPZαA分别以内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行顺序酶切,连接酶切产物并转化Escherichia coliDH5α。经过抗生素Zeocin筛选、PCR鉴定和重组质粒的酶切分析,将E2基因的测定序列与GenBank中的CSFV C株E2基因序列(序列号Z46258)比对,核苷酸同源性为99.46%;获得6个阳性重组子的克隆株。结果表明,重组质粒pGAPZα-E2中目的基因E2的核苷酸序列和大小、插入方向和位置是正确的。
程太平刘超荣俊
关键词：CSFVE2基因基因克隆
传染性法氏囊病重组亚单位疫苗的田间试验被引量：3
2007年
将三批次传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗实验制品以9个肉仔鸡鸡群进行田间试验。免疫接种后第21天,在试验鸡群中随机抽取2%的鸡只进行攻毒保护试验。对每一试验鸡群都进行免疫效力评价和安全性评价。结果,在9个鸡群中,同一试验鸡群内免疫组的保护率与攻毒对照组的保护率之间差异均显著(<0.05);9个试验鸡群在免疫后食欲和精神状态均无异常改变,接种局部病变程度达2分以上的鸡仅占2.5%～6.0%。结果表明,将该疫苗接种于肉用仔鸡是安全的,并可诱导鸡只产生高的免疫力。
程太平荣俊孙中杰
关键词：传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫效力安全性
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