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吴同垒
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- 所属机构:河北科技师范学院
- 所在地区:河北省 秦皇岛市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 张志强
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- 5种中药体外抗牛传染性鼻气管炎病毒作用方式的研究被引量：14
- 2023年
- 为筛选抗牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的中药,本研究选取大青叶、金银花、鱼腥草、连翘和黄连,测定其对MDBK细胞的最大安全浓度,在此基础上通过计算各药物对病毒的抑制率分析上述中药对IBRV的直接杀伤作用、对IBRV黏附细胞的阻断作用和对IBRV在细胞内的抑制作用,确定上述中药对IBRV的有效抑制率;进一步,利用qPCR方法检测中药与IBRV作用后对MDBK细胞中细胞因子转录水平的影响。结果显示,连翘、金银花、黄连、大青叶和鱼腥草对MDBK细胞的最大药物安全浓度分别是3.125 mg/mL、3.125 mg/mL、0.780 mg/mL、1.560 mg/mL和0.780 mg/mL;大青叶对IBRV的直接杀伤作用最好,金银花对IBRV黏附细胞的阻断作用和对细胞内IBRV复制的抑制作用最好;鱼腥草可显著提高细胞中TNF-α、IL-2和IFN-γ的转录水平(P<0.001);大青叶可极显著提高细胞中IL-1β、IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γ的转录水平(P<0.001);黄连可极显著提高细胞中IL-1β的转录水平(P<0.001)。结果表明连翘、金银花、黄连、大青叶和鱼腥草均有抗IBRV作用,其抗病毒方式并不相同,本研究为抗IBRV中药的研发奠定基础。
- 赵桂新付祥王凤杰刘万张志强张艳英史秋梅吴同垒
- 关键词：中药牛传染性鼻气管炎病毒细胞因子
- 禽安卡拉病研究进展被引量：6
- 2017年
- 安卡拉病由禽腺病毒C群IV血清型病毒引起,临床上患病鸡以心包积液和肝炎为典型病理变化。近些年,我国不同省份都有病例报道,发病和死亡情况不尽相同,对养禽业造成巨大的经济损失。安卡拉病毒有垂直和水平2种传播方式,可感染多种品系鸡群。结合国内外研究,总结了目前安卡拉病毒的生物学特性、流行病学、诊断技术及其防治措施,以期为科学研究和临床应用提供重要的参考。
- 常超越吴同垒李蕴玉张建文张召兴张志强贾青辉李佩国
- 关键词：腺病毒
- E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2 DNA疫苗的构建及保护力分析被引量：5
- 2018年
- 为了构建E．tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗，并确定其抗球虫效力。采用RT-PCR方法分别克隆出鸡IL-2和E．tenella河北株EtMIC-2基因，并连接到pMD18-T载体上进行测序；将目的基因克隆到pcDNA3．0载体，构建重组质粒peDNA3．0-IL-2-EtMIC-2，并转染293T细胞，用Westernblot方法验证表达。将构建的重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗以50，100，150ug／只的剂量分别在14，21日龄胸肌注射免疫试验鸡，除阴性对照组外，28日龄时经口灌服孢子化E．tenella卵囊4×10 4个，研究其对E．tenella感染后的免疫保护效果。结果表明：成功构建了重组质粒pcDNA3．0-IL-2-EtMIC-2，且能在293T细胞中表达出融合蛋白；3个免疫组的ACI比阳性对照组分别提高了97．63％，127．02％和129．81％，其中免疫剂量为100，150ug时，ACI均达160以上，具有良好的免疫保护效果。
- 张召兴张香斋李蕴玉丁咚张志强吴同垒贾青辉张艳英李佩国
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫IL-2基因DNA疫苗
- 中华草龟源维氏气单胞菌的分离及生物学特性鉴定被引量：2
- 2022年
- 为了确定引起中华草龟(Chinemys reevesiis)死亡的病原菌并鉴定其生物学特性,从病死中华草龟病变肝脏组织分离得到1株病原菌,经生化鉴定,其为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii),命名为CRQ1。采用斑马鱼(Brachydanio rerio)攻毒试验进行了该分离菌的致病性检验;采用PCR方法检测了该分离菌携带的毒力基因及耐药基因;采用K-B药敏纸片法检测其耐药性。结果显示:CRQ1株对斑马鱼的半数致死量(LD_(50))为3.57×10^(7)cfu/mL,携带aerA、act、aha、Ser、Exu、Lip、Hly、ompA和LuxS 9种毒力基因;分离菌对替米考星、环丙沙星和恩诺沙星等9种药物敏感,对阿米卡星、链霉素和磺胺间甲氧嘧啶等8种药物中度敏感,对新斯的明耐药;该分离菌携带四环素类耐药基因tet(A)、tet(E),氟喹诺酮类耐药基因oqxA、gyrA、gyrB、parC、parE,氨基糖苷类耐药基因aac2、aac(6)-Ib、aadB、aac4,磺胺类耐药基因sul-1,大环内酯类耐药基因ermB,分离菌含有多类抗菌药物的耐药基因,但未表达出相应的耐药表型,这与用药时间长短和用药频率有关。研究表明,维氏气单胞菌是导致中华草龟死亡的致病菌,携带与致病性相关的毒力基因,存在潜在的耐药性,研究结果可为中华草龟源维氏气单胞菌致病机理研究及该病的防控提供参考依据。
- 赵允清邵明珠郭家媚葛成周云宵吴同垒张志强任海张召兴张艳英
- 关键词：维氏气单胞菌毒力基因耐药性耐药基因
- 肠炎沙门菌YbjX基因缺失株的构建及生物学特性研究被引量：2
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- 为研究肠炎沙门菌外膜蛋白YbjX对该菌致病作用的影响,本研究利用λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌(C50336)YbjX基因缺失突变株(C50336ΔYbjX),并对其生物学特性进行分析,探究YbjX蛋白在肠炎沙门菌致病过程中的作用。结果显示,缺失株C50336ΔYbjX与野生型菌株和回复菌株相比,其生长速度、生化特性无明显差异,但其在血清中和蛋清中的存活能力明显下降。此外,药敏试验结果表明YbjX基因缺失会引起沙门菌药物敏感性增强。进一步的,动物致病性实验表明,YbjX基因缺失会引起沙门菌毒力和巨噬细胞内存活能力的严重下降。本研究证实YbjX基因与肠炎沙门菌毒力密切相关,为进一步阐释肠炎沙门菌感染致病机制奠定基础。
- 李永慧苏硕青吴同垒王洪彬孔庆山赵飞史秋梅张志强
- 关键词：肠炎沙门菌基因缺失生物学特性
- 禽腺病毒血清4型QHD2021株的分离鉴定和全基因序列分析被引量：2
- 2022年
- 为了解河北秦皇岛地区禽腺病毒血清4型(FAdV-4)分离株的遗传变异情况和致病性,本试验对疑似患FAdV-4病死鸡的肝脏、心脏等组织进行PCR检测,将PCR检测为阳性的组织接种鸡肝癌细胞(LMH)进行病毒分离培养,对纯化后的FAdV-4进行全基因测序,对所得的序列进行同源性和遗传进化分析及致病性试验。结果表明:将PCR检测为FAdV-4阳性的肝脏、心脏匀浆于接种LMH细胞后72 h内出现明显细胞病变,初步确定分离毒株为FADV-4毒株,命名为FAdV-4 QHD2021株。全基因测序结果显示,QHD2021株全基因组全长44225 bp,共编码14741个氨基酸。与国外毒株相比短1500 bp左右,但比国内毒株长约500 bp。同源性和遗传进化分析显示,QHD2021株与国内外FAdV-4流行毒株在同一支,与国内SD1601株的同源性最高,为94.3%。序列比对发现QHD2021株与国内流行株、国外经典株相比均出现1段1966 bp的碱基缺失,包括ORF19、ORF27和ORF48的缺失。将经LMH细胞纯化的QHD2021株接种21日龄的SPF雏鸡后,可引起心包积液、肝炎等典型的临床症状,死亡率为100%。病理组织学观察可见QHD2021株感染的SPF鸡肝细胞出现出血坏死、心肌断裂等明显特征性病变,说明FAdV-4 QHD2021株对鸡群的致病性较强。
- 陈玥何云凤刘优优吴同垒李佩国李蕴玉张建文
- 关键词：进化分析
- 牛源铜绿假单胞菌的分离鉴定及中草药抑杀效果比较分析
- 2023年
- 为查明养殖场引起牛只呼吸道疾病的病原菌,采集患病牛鼻拭子,采用实验室方法进行细菌的分离鉴定;通过细菌毒力基因的检测、致病性试验、药敏试验分析分离菌生物学特性;并明确22种中草药对其抑杀效果。结果表明,分离菌为两端钝圆革兰氏阴性短杆菌,16SrRNA基因序列与GeneBank铜绿假单胞菌比对相似序列达到100%,表明分离菌株为铜绿假单胞菌;菌株携带Exo S、Exo Y毒力基因,8h内可致小鼠死亡。药敏试验结果显示,该菌对环丙沙星极为敏感,对阿米卡星、新霉素、复方新诺明等9种药物中度敏感;中草药药敏试验结果显示,乌梅、五倍子、五味子对分离菌具有较好的抑菌作用,其MIC分别为31.25mg/mL和62.50mg/mL,对病原菌的生长繁殖具有较好抑制作用。本研究为该病的防控提供参考。
- 白和平彭树德刘亦潇吴同垒张志强张艳英史秋梅
- 关键词：铜绿假单胞菌毒力基因致病性试验
- 迟缓爱德华菌外膜蛋白OmpA原核表达及其免疫原性研究被引量：9
- 2018年
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- 张志强杨楠李永慧王洪彬冯东青吴同垒史秋梅朱国强
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- 纳米金联合荧光PCR在制备检测魁蚶牡蛎疱疹病毒的试剂盒中的应用
- 本发明公开了纳米金联合荧光PCR在制备检测魁蚶牡蛎疱疹病毒的试剂盒中的应用，涉及魁蚶牡蛎疱疹病毒检测技术领域。本发明建立的纳米SYBR Green I qPCR检测方法为今后OSHV‑1的进一步研究提供了一项先进的技术。...
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