黄璐圆
作品数: 9被引量:21H指数:3
  • 所属机构:暨南大学
  • 所在地区:广东省 广州市
  • 研究方向:生物学
  • 发文基金:广东省医学科学技术研究基金

相关作者

王峰
作品数:57被引量:212H指数:9
供职机构:暨南大学药学院
研究主题:VMI 锰超氧化物歧化酶 水稻 阳春砂 基因克隆
张自德
作品数:7被引量:8H指数:2
供职机构:暨南大学
研究主题:基因克隆 大肠杆菌表达 纯化 基因片段 PCR
王峰
作品数:97被引量:280H指数:9
供职机构:暨南大学
研究主题:视神经 玻璃体切割术治疗 玻璃体切割术 白内障 视神经损伤
吴秋红
作品数:7被引量:17H指数:3
供职机构:暨南大学
研究主题:阳春砂 基因克隆 克隆及序列分析 大肠杆菌表达 基因片段
李秀英
作品数:66被引量:98H指数:6
供职机构:暨南大学
研究主题:VMI 穿孔素 趋化因子 广谱 颗粒酶B
双元Ti载体的发展被引量:6
2006年
双元Ti载体是目前植物基因工程中最重要的植物转化载体。近年来双元Ti载体得到迅速的发展,新的载体不断出现。新发展的双元Ti载体结构优化,适用范围广,易于基因克隆操作,同时提高了植物转化的效率,更便于进行植物基因功能的研究。本文介绍了构建高容量载体、多基因载体、定点整合载体所采用的新策略。
王峰黄璐圆
关键词:双元载体根癌农杆菌TI质粒植物转化植物基因工程
人锰超氧化物歧化酶基因剪接异构体的表达分析
2010年
对人锰超氧化物歧化酶(human manganese superoxide dismutase,hMn-SOD)基因剪接异构体进行分析,并检测异构体的表达情况。在GenBank库中检索人锰超氧化物歧化酶基因异构体及编码基因组序列,利用Vector NTI9生物软件进行核酸及蛋白序列比对;利用RT-PCR方法分析锰超氧化物歧化酶基因异构体的表达。结果显示,在GenBank库检索发现有3种人锰超氧化物歧化酶基因异构体,剪接异构的类型为可变的5′剪接位点和外显子盒,各异构体基因内含子均符合"GT-AG"规则。3种基因异构体编码两种异构体蛋白,即222个氨基酸的人锰超氧化物歧化酶蛋白以及中部缺少39个氨基酸的截短型异构蛋白。RT-PCR检测结果表明,剪接异构体hMn-SODb在HEK293T和HSC细胞中的表达比在HepG2细胞中高,未见异构体hMn-SODc的表达。
王峰黄璐圆
关键词:锰超氧化物歧化酶
一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用
本发明公开了一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用,属于分子生物学与生物化学领域。通过设计引物进行PCR扩增得到引入R9的MnSOD的hMnSOD-R9基因片段,将该片段连接到pET15b构建表达质粒pE...
王峰张自德黄璐圆吴秋红张光李秀英
文献传递
人转铁蛋白基因的克隆及序列分析被引量:9
2007年
目的:克隆人转铁蛋白基因并对其编码序列进行分析。方法:以人胎肝cDNA为模板,利用PCR方法克隆人转铁蛋白基因;通过与基因组序列对比分析基因组结构;通过TargetP 1.1和S ignalP 3.0预测信号肽;通过C lustal X(1.81)进行蛋白序列联配。结果:PCR扩增了一个长2 160 bp的基因片断,序列分析表明其覆盖了完整编码框,编码由698个氨基酸组成的人转铁蛋白。进一步分析发现人转铁蛋白基因有19个外显子和18个内含子,编码人转铁蛋白N端具有19个氨基酸组成的信号肽序列。人转铁蛋白与猩猩、猴子、兔子和老鼠的转铁蛋白氨基酸相似率分别为94%、91%、78%、73%。生物信息分析表明,人转铁蛋白含有高度保守的参与蛋白二硫键形成的半胱氨酸以及铁离子结合位点,有两个序列较同源的结构域。结论:成功克隆人转铁蛋白基因,人转铁蛋白与其它物种转铁蛋白同源。
王峰黄璐圆
关键词:转铁蛋白基因组结构
一步法RT-PCR克隆水稻线粒体磷转运蛋白基因及其序列特征分析
2005年
以水稻广亲和品种Cpslo17幼穗为材料,用一步法RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)克隆了一个长度为1118bp的编码线粒体磷转运蛋白的OsMPT基因。序列分析表明其包含了基因完整的编码序列,编码由368个氨基酸组成的线粒体磷转运蛋白,它与玉米、大豆、Lotusjaponicus、Betulapendula、拟南芥的线粒体磷转运蛋白氨基酸序列相似率分别为93.5%,85.6%,83.8%,83.7%,81.1%。氨基酸疏水谱分析显示它有线粒体磷转运蛋白家族高度保守的6个跨膜结构域。水稻线粒体磷转运蛋白N端富含精氨酸(Arginine)、丙氨酸(Alanine)和丝氨酸(Serine)。iPSORT预测其蛋白N端具有定位于线粒体的信号肽序列,进一步分析表明此编码区段有6个外显子和5个内含子。RT-PCR结果表明,OsMPT基因在水稻两个亚种粳稻和籼稻的叶片中均有表达,在Cpslo17营养器官和生殖器官中都有高水平表达。水稻线粒体磷转运蛋白的克隆和表达分析将为研究其结构和生物学功能奠定基础。
王峰黄璐圆王宏斌刘兵王金发
关键词:水稻基因组结构
人锰超氧化物歧化酶的扩增和表达研究被引量:4
2009年
构建人锰超氧化物歧化酶的原核表达载体,对影响蛋白表达的因素进行探索,并初步检测其活性。以人293T细胞cDNA为模板,利用PCR方法克隆人锰超氧化物歧化酶基因,将其插入pET15b载体中,经测序鉴定正确后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami,通过IPTG诱导,SDS-PAGE检测菌体总蛋白。利用SOD检测试剂盒检测粗提物的SOD活性。结果:PCR扩增了一个长597bp的基因片断,该片断编码由198个氨基酸组成的成熟的人锰超氧化物歧化酶蛋白。经过IPTG诱导表达出约25k的蛋白。优化的IPTG浓度为0.25mmol/L,在1~6h范围内随着诱导时间的增加表达量逐渐增加,IPTG总量一样的情况下分次加入比单次加入所诱导的目的蛋白产量高。SOD活性检测表明经过诱导表达的hMn-SOD具有SOD活性。结论:成功扩增人锰超氧化物歧化酶基因,并构建了原核表达载体,经过IPTG诱导表达的目的蛋白有SOD活性。
王峰杨文杰成子锋黄璐圆
关键词:锰超氧化物歧化酶SOD活性
双元载体pBCR1的构建及胡萝卜抗冻蛋白启动子pafp的功能研究
RRD3是一段从水稻基因组中分离的在单子叶和双子叶植物都具有较高活性的维管组织特异性强启动子,本研究将其与双元载体和细菌人工染色体结合,发展一种能转化大片段DNA并能使目的基因在单子叶和双子叶植物中高水平表达的通用型植物...
黄璐圆
关键词:双元载体植物表达载体细菌人工染色体植物转化
文献传递
一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用
本发明公开了一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用,属于分子生物学与生物化学领域。通过设计引物进行PCR扩增得到引入R9的MnSOD的hMnSOD-R9基因片段,将该片段连接到pET15b构建表达质粒pE...
王峰张自德黄璐圆吴秋红张光李秀英
文献传递
小鼠锰超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的表达和纯化被引量:2
2010年
为构建小鼠锰超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体,在大肠杆菌中进行蛋白表达、纯化和功能检测,以小鼠肝脏cDNA为模板,利用PCR方法克隆小鼠锰SOD基因,PCR扩增了1个长600bp左右的基因片段,该片段编码由198个氨基酸组成的成熟的小鼠锰SOD蛋白.将其插入pET15b载体中,经测序鉴定正确后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami.含有pET15b-mMn-SOD质粒的工程菌经过IPTG诱导能表达出相对分子质量约25000的目的蛋白,超声破碎菌体,经Ni-NTA纯化后得到纯度约为95%的重组mMn-SOD蛋白.SOD活性检测表明经过诱导表达的mMn-SOD比活力为531.7U/mg.
王峰黄璐圆
关键词:锰超氧化物歧化酶纯化SOD活性