孟凡亮
作品数： 65被引量：83H指数：5
  • 所属机构:中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
  • 所在地区:北京市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

张建中
作品数：410被引量：1,364H指数：17
供职机构：中国疾病预防控制中心
研究主题：幽门螺杆菌 空肠弯曲菌 肺炎支原体 耐药 引物
何利华
作品数：139被引量：350H指数：10
供职机构：中国疾病预防控制中心
研究主题：幽门螺杆菌 肺炎支原体 临床标本 耐药 试剂盒
赵飞
作品数：143被引量：746H指数：16
供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
研究主题：肺炎支原体 结核 幽门螺杆菌 结核病 血吸虫病
肖迪
作品数：115被引量：108H指数：5
供职机构：中国疾病预防控制中心
研究主题：质谱 试剂盒 幽门螺杆菌 布鲁氏菌 蛋白质指纹图谱
顾一心
作品数：61被引量：173H指数：8
供职机构：中国疾病预防控制中心
研究主题：空肠弯曲菌 试剂盒 弯曲菌 肺炎支原体 临床标本
作品列表
空肠弯曲菌CadF蛋白的原核表达与产物分析被引量：1
2010年
目的构建空肠弯曲菌cadF基因重组表达质粒pET30a(+)-cadF,分析其在大肠埃希菌中的表达情况及其融合蛋白的抗原性。方法用PCR方法扩增cadF基因,构建重组克隆质粒和表达质粒,经菌落PCR、双酶切和测序鉴定后在E.coli(DE3)原核表达系统中诱导表达,SDS-PAGE和飞行时间质谱鉴定表达蛋白,Western blot分析其抗原性。结果含重组表达载体pET-30a(+)-cadF中的cadF基因序列经测序证实与出发菌株cadF基因序列100%同源,并成功诱导表达CadF蛋白,Westernblot显示该CadF融合蛋白能被抗空肠弯曲菌多克隆兔血清识别。结论成功构建了空肠弯曲菌cadF基因重组表达载体,表达产物具有抗原性。
周益装张茂俊肖迪孟凡亮张建中
关键词：空肠弯曲菌原核表达抗原性
肺炎支原体基因型快速分型试剂盒
本发明提供一种肺炎支原体基因型快速分型试剂盒，涉及蛋白质指纹图谱检测技术领域。本发明基于质谱技术，构建了针对肺炎支原体进行快速分型鉴定的特异性多肽质谱模型，以及使用质谱技术进行分型的试剂盒。本发明试剂盒能够通过特异性指纹...
赵飞张建中肖迪张慧芳张永婵胡源陶晓霞何利华顾一心孟凡亮
文献传递
幽门螺杆菌免疫兔血清抗体特异性分析被引量：1
2009年
对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）抗原、抗体的研究是Hp分型、检测及疫苗开发的基础。Hp免疫血清的制备已成为常规技术，但血清制备过程中的各种因素均可能影响免疫血清的抗体谱，从而引起同类研究间因所用Hp抗体不同导致的结果的差异。本研究对Hp全菌免疫的兔血清抗体谱加以分析，讨论Hp免疫血清制备中存在的一些问题和应对方法。
郭凤华孟凡亮何利华张建中
关键词：幽门螺杆菌免疫血清制备HP抗体疫苗开发抗体谱
10kDa以上幽门螺杆菌感染相关尿液差异表达蛋白的高效液相色谱-质谱分析被引量：2
2016年
背景:除消化性溃疡和胃癌外,幽门螺杆菌(Hp)感染尚与多种胃肠外疾病密切相关。目前临床上尚无Hp感染的体液检测方法。目的:鉴定相对分子质量在10 k Da以上的Hp感染相关尿液差异表达蛋白,为Hp感染的体液诊断提供潜在生物学标记物。方法:志愿者留取晨起中段尿,并行13C-尿素呼气试验以明确Hp感染情况。Hp阴性和阳性尿液样本各取15例,分别混合后提取蛋白,以高效液相色谱-质谱系统分离蛋白、采集数据,行label-free定量分析。另取Hp阴性尿液样本15例和阳性尿液样本11例,对差异表达分析结果进行全扫描验证。应用IPA软件对鉴定出的尿液差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果:Label-free定量分析共检测到475个尿液蛋白,并确定其中42个为差异表达蛋白。经外部扫描验证,最终鉴定出11个显著上调的差异表达蛋白。生物信息学分析揭示了这些差异表达蛋白的分子功能、参与的生物学通路、相关疾病等信息。结论:鉴定出的11个10 k Da以上尿液差异表达蛋白有望成为诊断Hp感染的生物学标记物,并可为Hp感染与胃肠外疾病的相关性研究提供分子水平的证据。
张慧芳孟凡亮何利华何利华肖迪
关键词：幽门螺杆菌蛋白质组学生物学标记
金黄色葡萄球菌类肠毒素W的超抗原活性位点预测与克隆表达
2023年
目的预测金黄色葡萄球菌类肠毒素W(SElW)与T细胞受体(TCR)的对接和超抗原活性位点,并对SElW进行克隆表达和纯化。方法利用AlphaFold对SElW蛋白单体进行三维结构预测,借助SAVES在线服务器使用ERRAT、拉氏图和Verify_3D等软件对蛋白模型进行评估。用ZDOCK服务器模拟SElW与TCR的对接构象,并对SElW与其他肠毒素的氨基酸序列进行比对。设计引物扩增selw基因,将该片段重组于pMD18-T载体中并进行测序;经限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将目的片段重组于表达质粒pET-28a(+)中,重组质粒鉴定后用IPTG诱导表达;用亲和层析法对表达于上清中的SElW蛋白进行纯化,用BCA法对蛋白进行定量。结果三维结构预测结果显示,SElW蛋白由氨基末端和羧基末端两个结构域组成,其中氨基末端结构域由3个α-螺旋和6个β-片层组成,羧基末端结构域由2个α-螺旋和7个反向平行的β-片层组成。SElW蛋白模型的整体质量因素得分为98.08,其中93.24%的氨基酸Verify_3D得分≥0.2,且无氨基酸位于不允许区。模拟对接预测选择评分最高的对接构象(评分值为1521.328)作为分析对象,采用PyMOL软件分析SElW与TCR之间形成的19个氢键。结合序列比对和既往研究结果,本研究预测发现了SElW蛋白的5个重要超抗原活性位点,分别是Y18、N19、W55、C88和C98。通过克隆表达和蛋白纯化,获得了高纯度的可溶性重组蛋白SElW。结论研究预测了SElW蛋白中5个可能的超抗原活性位点,成功构建并表达了SElW蛋白,为进一步探索SElW免疫识别机制奠定了基础。
杨玉花库鑫宫雅楠孟凡亮卜东波郭亚慧魏销玥龙丽瑾范佳铭张茂俊张茂俊张建中
关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素分子对接克隆表达
一种新型冠状病毒S蛋白受体结合域蛋白的真核表达方法
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒S蛋白受体结合域蛋白的真核表达方法。本发明将原始的S‑RBD蛋白基因序列进行优化，并手动调整部分碱基，获得如SEQ ID NO.1所示的基因序列。采用本发明提供的如SEQ ...
魏销玥闫笑梅尤元海宫雅楠孟凡亮房梦飏张建中
用于检测肺炎支原体的靶序列及检测试剂盒
本发明提供了用于检测肺炎支原体的靶序列及检测试剂盒。本发明首先通过对肺炎支原体基因测序和比对，筛选得到用于检测肺炎支原体的多拷贝重复序列基因，其序列如SEQ？ID？NO.1所示，并设计了检测其的实时荧光定量PCR引物和探...
赵飞张建中何利华孟凡亮顾一心陶晓霞肖迪张慧芳胡源刘立雍
检测艾滋病相关支原体的引物、探针组合及试剂盒
本发明通过对艾滋病相关支原体（穿透支原体、发酵支原体和梨支原体）基因序列分析和比对，提供了适于同时检测这3种艾滋病相关支原体的三重荧光PCR检测的引物和探针，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-9所示，本发明还提供...
赵飞张建中王艳冬肖迪张慧芳何利华孟凡亮
文献传递
基于颜色判定的环介导等温扩增检测人型支原体的研究被引量：4
2018年
目的建立一种基于颜色判定的快速、灵敏、简便的人型支原体环介导等温扩增(LAMP)方法。方法使用PrimerExplorer V5软件设计针对人型支原体MHO_2540基因保守区域的4条特异等温扩增引物,用羟基萘酚蓝(HNB)作为结果判读指示剂并优化体系中dNTPs、MgSO_4浓度,建立人型支原体LAMP检测方法,进行灵敏度、特异度等的检测并与普通PCR比较。结果LAMP对标准浓度人型支原体核酸的检测限约为10^(2 )CFU,与普通PCR相同,但比实时荧光定量PCR差一个数量级。人型支原体阳性临床标本拷贝数>10^(3 )CFU者LAMP阳性率100%,与普通PCR检出率(100%)一致,拷贝数10~1~10^(3 )CFU的弱阳性标本LAMP检出率为63.6%(14/22),普通PCR检出率为31.8%(7/22),差异有统计学意义(χ~2=4.46,P<0.05)。结论LAMP检测人型支原体敏感、特异且操作简便,可在基层推广应用。
龚杰冉梦龙吴伟伟刘立雍何利华孟凡亮赵飞
关键词：人型支原体环介导等温扩增技术临床标本分子诊断
一种用于检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素A和B的引物组合、探针组合和检测方法
本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种用于检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素A和B的引物组合、探针组合和检测方法。所述引物组合和探针组合为特异性针对金黄色葡萄球菌特异基因nuc、肠毒素A基因和肠毒素B基因开发得到，通过数字P...
闫笑梅陶晓霞王铜王文周赵飞孟凡亮张建中
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