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硝基胍对小鼠L5178Y细胞TK基因的致突变作用: 2024年; 通过体外哺乳动物细胞TK基因突变试验,探讨硝基胍(NQ)的细胞致突变性。在无代谢活化(-S9)和有代谢活化(+S9)条件下,NQ处理L5178Y细胞3 h后表达培养2 d,加入三氟胸苷(TFT),接种于96孔板,培养12 d,计算突变频率(MF)。结果显示,以1000、2000、4000μg/ml NQ处理L5178Y细胞,在-S9和+S9条件下,各剂量组MF具有剂量相关性,4000μg/ml剂量组的MF分别为(126.24±20.22)×10^(-6)和(375.83±41.94)×10^(-6),显著高于溶剂对照组(P<0.05)。提示NQ可能对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因具有致突变性。; 赵彬刘志永高俊宏高永超; 关键词：TK基因突变遗传毒性

牛结节性皮肤病病毒TK基因缺失毒株LSDV-△TK的构建方法: 本发明提供牛结节性皮肤病病毒TK基因缺失毒株LSDV‑△TK的构建方法，包括以下步骤：构建缺失TK基因的pUC19T‑LoxP‑pmH5‑EGFP‑LoxP‑△TK转移载体；构建绿色荧光标记毒株LSDV‑LoxP‑pmH...; 任善会孙跃峰殷相平陈豪泰王相伟王莎莎

猪伪狂犬病病毒gG、gE和TK基因多重PCR检测方法的建立及应用: 2024年; 建立准确鉴别猪群伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)野毒株和基因缺失疫苗株高效多重PCR方法,对PRV gG、gE和TK基因保守区域设计合成特异性引物,优化反应体系和条件,建立多重PCR鉴别检测方法,对临床样品进行检测应用。结果成功建立了鉴别PRV gG、gE和TK基因缺失疫苗株和野毒株感染的多重PCR检测方法,该方法对PRV gG、gE和TK基因可进行特异性扩增,对猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒和猪副猪嗜血杆菌等相关病原均无扩增,对携带gG、gE和TK混合阳性质粒的最低检测限为2.5×10^(-5) ng/μL,具有良好的重复性。用该方法检测53份猪组织样品,检出PRV野毒感染的样品7份,与国标方法和单一PCR法检测结果符合率为100%。建立的猪伪狂犬病病毒野毒株和基因缺失疫苗株多重PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在生产中可快速、高效鉴别猪群PRV野毒感染和基因缺失疫苗免疫,可为PRV的快速鉴别检测、流行病学调查和防控提供技术支持。; 吴晓敏陈润山李华明项维徐梦然杨荣荣雷连成张付贤; 关键词：猪伪狂犬病病毒 GE基因 TK基因多重PCR

猪伪狂犬病病毒gE/gI/TK基因缺失疫苗株及其构建方法和应用: 本发明公开了一种猪伪狂犬病病毒gE/gI/TK基因缺失疫苗株及其构建方法和应用，所述缺失株是在猪伪狂犬病毒PRV GD0304的基础上，通过基因工程方法缺失gE、gI和TK基因得到的；所述基因缺失株的保藏编号为CCTCC...; 伍建敏李中圣王凤求庞旋飞王贵平尹兴强

HSV-tk基因和IL-12基因抑制VEGF的表达及对鼻咽癌荷瘤裸鼠模型放射增敏作用的实验研究: 2023年; 目的:研究HSV-tk基因和IL-12基因抑制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达对鼻咽癌荷瘤裸鼠模型放射增敏作用。方法:建立鼻咽癌荷瘤裸鼠模型,将42只成瘤鼠随机分成IL-12组、IL-12+放射治疗组、HSV-tk/GCV组、HSV-tk/GCV+放射治疗组、IL-12+HSV-tk/GCV组、IL-12+HSV-tk/GCV+放射治疗组、空白对照组、每组6只。采用瘤内注射分别给予相对应的重组腺病毒液(AdKDR-tk)、重组逆转录腺病毒液IL-12及生理盐水,24 h后重复注射1次。次日起HSV-tk/GCV组、HSV-tk/GCV+放射治疗组、IL-12+HSV-tk/GCV组、IL-12+HSV-tk/GCV+放射治疗组连续10 d每天腹腔内注射GCV 100 mg/(kg·d),连续10 d。各放射治疗组第3周开始给予6MV-X照射,每天2 Gy,连续5 d。治疗结束后处死裸鼠,检测裸鼠肿瘤质量及肿瘤生长抑制率,免疫组织化学法检测肿瘤微血管密度及VEGF阳性细胞灰度值。结果:IL-12+HSV-tk/GCV+放射治疗组裸鼠瘤体质量明显低于IL-12组、IL-12+放射治疗组、HSV-tk/GCV组、HSV-tk/GCV+放射治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。IL-12+HSV-tk/GCV+放射治疗组的肿瘤生长抑制率最高,达71.7%。IL-12+HSV-tk/GCV+放射治疗组微血管密度均低于其他各组,VEGF阳性细胞灰度值均高于其他各组(P<0.05)。结论:HSV-tk基因和IL-12基因联合应用在鼻咽癌荷瘤裸鼠模型放疗中可抑制移植瘤的生长,为鼻咽癌的放疗产生增敏作用。; 周玉华朱欠元曾友根李宝金; 关键词：鼻咽癌 HSV-TK 基因 IL-12 基因

山羊转TK基因体细胞联合更昔洛韦的体外培养作用效果及其核移植后的生物学特性研究: “TK-GCV”自杀基因系统是一种由向宿主细胞外源导入的TK基因与后续添加的药物更昔洛韦(Ganciclovir,GCV)所组成的针对宿主细胞的特异性杀伤系统。目前在以肿瘤细胞为宿主的体外实验中，已被证实有明确的杀伤作用...; 孙琦; 关键词：山羊更昔洛韦自杀基因系统体细胞核移植生物学特性

FHV-1昆明株的分离鉴定及TK基因生物信息学分析: 目的:通过对猫疱疹病毒Ⅰ型（Felineherpesvirus-1,FHV-1）的分离鉴定和TK基因的测序及生物信息学分析,并研究阿昔洛韦、泛昔洛韦、利巴韦林核苷类药体外抗FHV-1的作用,为FHV-1病原的诊断以及临床...; 昂艳芬; 关键词：生物信息学分析

低强度聚焦超声联合HER2靶向氟碳纳米液滴介导HSV-TK基因对胃癌裸鼠皮下移植瘤递送的实验研究: 目的:低强度聚焦超声(Low intensity focused ultrasound,LIFU)作为无创和有效的化学制剂递送方法,联合人表皮生长因子受体2(Human epidermal growth factor r...; 姚懿染; 关键词：聚焦超声治疗胃癌人表皮生长因子受体2

基于Cas12a的PRV野毒株和gE/TK基因缺失疫苗株鉴别诊断方法: 本发明属于生物与化学领域，涉及一种利用CRISPR/Cas12a体系可视化检测猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)的方法。本发明公开了基于CRISPR/Cas12a的可视化猪伪狂犬野毒株和gE<S...; 李艳李红招王浩乐敏

伪狂犬病病毒gE/gI/TK基因缺失对感染PK-15细胞的差异表达蛋白质组分析: 2023年; 为了研究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株3个主要毒力基因gE/gI/TK缺失对感染宿主细胞后蛋白表达的影响,探究PRV与宿主细胞相互作用的分子机制,将PRV SD-2017ΔgE/gI/TK株接种PK-15细胞,运用串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)标记定量蛋白质组学技术,开展PRV感染细胞后差异表达蛋白分析,并通过Western blot进行数据验证。通过生物信息学分析发现,与亲本毒株PRV SD-2017感染组比较,SD-2017ΔgE/gI/TK感染组共鉴定到19个差异表达蛋白,其中7个蛋白上调,12个蛋白下调;与传统疫苗株Bartha-K/61比较,SD-2017ΔgE/gI/TK感染组共鉴定到176个差异表达蛋白,其中157个蛋白上调,19个蛋白下调。这些差异蛋白主要与紧密连接、RNA降解途径、核糖体生物发生、B细胞受体等信号通路有关,其中ATP2A1、KDM8、Eri1、XRCC6、DNM2和PYCR2等差异蛋白参与细胞凋亡、免疫反应和自噬相关功能。通过Western blot验证了MYLPF、ERI1、XRCC6和GAMT的表达情况与TMT比率一致,证明了该数据的可靠性。本研究为进一步探讨PRV变异株的致病和免疫机制奠定了理论基础。; 张洪亮王凤雪刁志凯李桂梅黄娟温永俊单虎; 关键词：伪狂犬病病毒变异株 TMT 差异表达蛋白

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