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VEGF与Survivin反义寡核苷酸对裸鼠荷舌癌肿瘤的作用
2021年
目的︰研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VECF-ASODN)和生存素(Survivinm)反义寡核苷酸(Survivin-ASODN)联合转染对裸鼠体内Tca8113舌癌细胞的作用。方法﹐25只雌性裸鼠分为5组,每组5只,建立移植瘤模型,并注入相应的试剂。①联合ASODN组:每次在裸鼠瘤体及瘤周注入Survivin-ASODN,VECF-ASODN各66μg,注射液体积为200μl,内含LipofectamineTM 2000和无血清1640液。②VECF-ASODN组;同上述方法注射VECF-ASODN 66μg。③Survivin-ASODN组:同法注射Survivin-ASODN 66μg。④脂质体组:同法注射等量脂质体200μl。⑤生理盐水(NS)组:注射等量NS200μl。3天注射1次,共7次。实验结束2天后,全麻下处死裸鼠,称取肿瘤重量并测量大小,肿瘤制作石蜡切片,免疫组织化学方法测VECF,Survivin,PCNA,CD34表达水平,计算肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)和肿瘤增殖细胞核抗原标记指数(PCNA Iabel index,PLI)。结果﹑联合ASODN组裸鼠移植瘤的重量、体积、VECF和Survivin蛋白,PCNA、CD34表达水平明显降低。结论VEGF-ASODN和Survivin-ASODN联合转染Tca8113舌癌细胞,明显抑制VECF和Survivin表达水平,并且抑制癌细胞生长和增殖。
李腾宇于肖鹏李晓光王延秀李俊福陈岱韻孙振
关键词:血管内皮细胞生长因子生存素反义寡核苷酸裸鼠舌鳞状细胞癌
Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株IL-6/STAT3信号通路的影响和意义被引量:9
2017年
目的通过分析人卵巢癌细胞株转染Survivin反义寡核苷酸(ASODN)后IL-6/STAT3信号通路及其下游相关癌基因的表达以及其侵袭能力的改变,探讨Survivin ASODN在抑制人卵巢癌细胞转移中的可能作用、机制和临床价值。方法脂质体(LipofectamineTM2000)介导Survivin ASODN转染人卵巢癌SKOV3细胞株(实验组),同时设空脂质体对照,Transwell小室检测细胞株侵袭能力的改变,荧光定量PCR检测两组细胞株中白细胞介素6(IL-6)、信号转导与活化因子3(STAT3)、Survivin、血管内皮生长因子(VEGF)基因的表达,Western blot检测IL-6、STAT3、磷化的信号转导与活化因子3(p-STAT3)、Survivin、VEGF-A蛋白的表达。结果实验组细胞株中IL-6、STAT3、Survivin、VEGF基因表达均较对照组明显下调(P<0.05);实验组细胞株中IL-6、STAT 3、p-STAT 3、Survivin、VEGF-A蛋白表达均较对照组明显下调(P<0.05)。实验组细胞株侵袭能力较对照组明显下降(P<0.01)。结论 ASODN靶向抑制Survivin可有效降低人卵巢癌细胞侵袭转移能力,抑制IL-6/STAT3信号通路及其下游相关致癌基因的表达活性。Survivin ASODN可能在防治卵巢癌复发和转移治疗中有临床价值。
孙艳王成书王文莉
关键词:SURVIVIN反义寡核苷酸卵巢癌
靶向Survivin反义寡核苷酸逆转MCF-7乳腺癌细胞三苯氧胺耐药的研究
2016年
目的探讨Survivin基因在乳腺癌细胞获得性三苯氧胺(TAM)耐药性形成中的作用以及靶向Survivin mRNA逆转乳腺癌细胞TAM耐药性的可行性。方法建立TAM耐药细胞株(TAM-R),用靶向Survivin mRNA的反义寡核苷酸(ASODN)联合10^(-5)M TAM分别作用于MCF-7细胞和MCF-7/TAM-R细胞72 h后,采用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞仪、原位杂交法检测细胞活性、克隆形成率、凋亡率及Survivin mRNA表达的变化。结果 MCF-7/TAM-R组的Survivin mRNA表达明显高于MCF-7组;ASODN联合应用TAM能够逆转MCF-7/TAM-R细胞对TAM的耐药性,其细胞活性、克隆形成率以及凋亡抑制程度明显强于TAM组(P<0.05);靶向Survivin的反义寡核苷酸能够抑制Survivin mRNA的表达。结论 MCF-7细胞可能通过上调Survivin基因来对抗长期TAM刺激所诱导的细胞凋亡,从而促进TAM耐药性的形成,靶向Survivin mRNA的反义寡核苷酸能够逆转MCF-7细胞对TAM的耐药。
宋燕魏海峰宋文哲谢忠士宋世俊张春福谭岩
关键词:乳腺癌凋亡抑制基因反义寡核苷酸
Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞裸鼠腹腔移植瘤生长的影响与机制被引量:5
2015年
目的探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)在活体内对人卵巢癌细胞种植性转移能力和腹腔移植瘤形成的影响,分析其可能的作用机制。方法构建人卵巢癌SKOV3细胞株裸鼠腹腔移植瘤模型,实验组给予survivin ASODN腹腔注射,同时对照组给予生理盐水腹腔注射,比较两组动物腹腔移植瘤形成和生长情况的改变,并通过蛋白印迹法检测两组腹腔移植瘤组织中白细胞介素6(IL-6)、信号转导与活化因子3(STAT3)、磷化的信号转导与活化因子3(p-STAT3)、survivin蛋白表达的改变。结果Survivin ASODN组人卵巢癌细胞裸鼠腹腔移植瘤数量和重量都较对照组明显减小(P<0.05),IL-6、STAT3、p-STAT3、survivin蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论 Survivin ASODN在活体内能有效降低人卵巢癌细胞侵袭和种植性转移能力,能有效抑制卵巢癌腹腔移植瘤的生长,这些作用是通过抑制IL-6/STAT3信号通路的活性来完成的。靶向survivin基因的反义核苷酸治疗将成为临床防治卵巢癌复发和转移重要手段,有重要的临床价值。
孙艳底建敏陈春宁
关键词:卵巢癌腹腔转移反义寡核苷酸
Survivin在骨肉瘤细胞中的表达及Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对骨肉瘤MG 63细胞增殖、凋亡和侵袭的作用
伴随肿瘤分子遗传学和分子生物学的进步,肿瘤出现的主要因素当前指出是常规的凋亡体制遭受阻止,此外,众多的妨碍凋亡的因子参加这个活动。IAP家族为现在研究的主要内容。一类架构有关的蛋白被凋亡蛋白抑制剂(inhibitorof...
黎承军
关键词:骨肉瘤凋亡抑制蛋白反义寡核苷酸细胞表达
Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖的影响被引量:6
2013年
目的:应用反义寡核苷酸技术研究凋亡抑制蛋白Survivin反义寡核苷酸对肿瘤细胞增殖的影响。方法:根据Survivin序列合成其反义寡核苷酸序列(Survivin-ASODN)。培养肝癌细胞株SMMC-7721,用荧光素标记的Survivin-ASODN转染,并设立空白对照、空脂质体对照及正义寡核苷酸(SODN)对照组;用PCR方法检测Survivin基因表达水平;通过MTT方法分析Survivin-ASODN转染对肝癌细胞增殖的影响。结果:荧光素标记的Survivin-ASODN在SMMC-7721细胞中的转染率达到60%以上。SMMC-7721细胞分别用100、200、300、400和600nmol.L-1 ASODN转染后,Survivin基因表达水平下降,细胞增殖抑制率24h时分别为(3.87±1.67)%、(9.21±2.21)%、(15.21±3.18)%、(21.32±3.43)%和(32.62±3.74)%,而300nmol.L-1ASODN组48h时细胞生长抑制率为(29.21±4.12)%,72h时抑制率为(44.21±3.32)%;ASODN转染组细胞增殖抑制率与空白对照组、空脂质体组及SODN组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Survivin-ASODN对细胞增殖有抑制作用,且呈现剂量依赖性;并且随着作用时间的延长,其抑制效果增强。
方艳秋齐亚灵白晓芦小单谭岩
关键词:SURVIVIN反义寡核苷酸转染增殖抑制率
新型纳米金荧光双标survivin反义寡核苷酸探针的合成及其对人恶性黑素瘤A375细胞的影响
2013年
目的利用纳米金独特的生物和光学特性,合成一种新型纳米金荧光双标survivin反义寡核苷酸探针,观察其对人恶性黑素瘤A375细胞的影响。方法用柠檬钠还原法制备纳米金,将巯基修饰后的survivin反义寡核苷酸结合在纳米金表面,合成纳米金survivin反义寡核苷酸探针;再结合互补的带荧光标记的报告序列,制成纳米金荧光双标survivin反义寡核苷酸探针;将制备的探针转染人恶性黑素瘤A375细胞,荧光显微镜观察细胞内荧光图像,MTT法及流式细胞仪检测A375细胞的增殖及凋亡情况。结果制备的纳米金荧光双标survivin反义寡核苷酸探针转染A375细胞后,可观察到清晰的细胞内荧光图像,可以抑制A375细胞的增殖,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),诱导细胞凋亡增多。结论寡核苷酸功能化的纳米金颗粒可有效转染进人恶性黑素瘤A375细胞,通过反义封闭作用诱导人恶性黑素瘤A375细胞凋亡增多。
李萍王梅肖生祥王冰霍佳
关键词:纳米金反义寡核苷酸SURVIVINA375细胞
Survivin反义寡核苷酸诱导K562细胞凋亡及化疗协同作用研究被引量:3
2012年
目的:研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)诱导慢性髓系白血病(CML)急变细胞系K562细胞凋亡及机制,并探讨与喜树碱(CPT)的活性代谢产物SN-38联合治疗的疗效。方法:Survivin ASODN转染K562细胞后,应用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,QRT-PCR法及Western blot法检测凋亡相关基因及蛋白的变化。依据Chou-Talalay中效原理,采用calcusyn软件计算两药联合指数(CI),评价survivin ASODN与SN-38联合治疗疗效,并以Western blot检测联合治疗后凋亡相关蛋白变化。结果:Survivin ASODN呈时间和剂量依赖性抑制K562细胞增殖,24、48、72h半数抑制率(IC50)分别约为600、498、296nmol/L。600nmol/L survivinASODN以时间依赖方式诱导K562细胞凋亡,下调survivin mRNA及蛋白表达,而Bcl-2蛋白表达无明显变化。survivin ASODN与SN-38联合治疗K562细胞48h,两药极低浓度时为拮抗及相加作用(Fa≤0.12),随浓度增大表现剂量依赖性的协同作用(Fa>0.12),两药最强协同效应时浓度为380nmol/L survivin ASODN和38nmol/L SN-38。联合组的survivin及Bcl-2蛋白表达较2单药组及对照组均明显下降。结论:survivin ASODN抑制K562细胞生长并诱导凋亡,和SN-38联合治疗通过下调survivin及Bcl-2表达发挥协同效应(Fa>0.12)。
封蔚莹周炀周国忠
关键词:白血病SURVIVIN反义寡核苷酸
Survivin反义寡核苷酸在人胰腺癌裸鼠模型中的抑瘤作用
[目的]: 探讨Survivin反义寡核苷酸对裸鼠荷胰腺癌的抑制作用以及与Cox-2、PTEN和CEACAM-1在胰腺癌组织中的表达及相关性。 [方法]: 构建28只人胰腺癌裸鼠模型,随机分配到空白对照组、脂质体组、AS...
张超
Survivin反义寡核苷酸诱导人胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡的研究被引量:1
2012年
目的研究survivin反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人胃癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其诱导人胃癌移植瘤凋亡的分子生物学机制。方法建立SGC-7901胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,即survivin-ASODN+脂质体组、survivin-ASODN组、脂质体组和空白对照组(蒸馏水)。瘤体内隔日给药,停药后48小时处死裸鼠,剥离瘤组织,称取瘤重,计算抑瘤率。western-blot法检测各组凋亡相关蛋白survivin、Caspase-3蛋白的表达。结果 survivin-ASODN+脂质体组的移植瘤生长速度明显减慢,其抑瘤率为:33.19%。survivin-ASODN+脂质体组的survivin蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05),Caspase-3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论 survivin反义寡核苷酸转染胃癌移植瘤能够明显抑制肿瘤生长,其主要机制与降低survivin蛋白的表达,诱导Caspase-3高表达,从而促进肿瘤细胞凋亡有关。
王超群郑茂金梁栋周云
关键词:SURVIVIN胃癌移植瘤

相关作者

崔大祥
作品数:504被引量:649H指数:14
供职机构:上海交通大学
研究主题:胃癌 量子点 磁性纳米粒子 纳米探针 荧光
黄宗海
作品数:473被引量:1,658H指数:17
供职机构:天津农学院
研究主题:创伤性休克 创伤性 自杀基因治疗 双自杀基因 KDR启动子
厉周
作品数:154被引量:624H指数:12
供职机构:南方医科大学珠江医院
研究主题:自杀基因治疗 创伤性 腺病毒 CDGLYTK 双自杀基因
孙艳
作品数:35被引量:74H指数:6
供职机构:河北医科大学第二医院
研究主题:SURVIVIN SURVIVIN反义寡核苷酸 SMAC/DIABLO 卵巢癌 生物学行为
徐酉华
作品数:227被引量:814H指数:14
供职机构:重庆医科大学附属儿童医院
研究主题:白血病 儿童 小儿 儿童急性白血病 急性白血病