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恒温荧光法 及RT-PCR 法 检测 南美白对虾常见病 2025年 试验旨在探究恒温荧光法 及RT-PCR 法 检测 南美白对虾常见3类疾病(病毒类、细菌类、寄生虫类)的应用效果。试验随机抽取3份虾苗样品,每份样品15~20头,采用RT-PCR 法 检测 肝胰腺细小病毒(HPV)、对虾杆状病毒(BPV),恒温荧光法 检测 致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp_(AHPND))、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、黄头病毒(YHV)、虹彩病毒(DIVI)、哈维氏弧菌(HVS)、桃拉病毒(TSV)、虾肝肠胞虫(EHP)、白斑综合征病毒(WSSV)。结果显示,恒温荧光法 检测 Vp_(AHPND)、IHHNV、YHV、DIVI、TSV、HVS、WSSV、EHP等8种病原结果均为阴性,凝胶电泳试验中未出现HPV、BPV条带,表明虾苗未携带上述病原。研究表明,RT-PCR 法 与恒温荧光法 可快速有效地检测 南美白对虾虾苗病原携带情况。 赵龙飞 韩煜茹 王万兴 蔡树东关键词:南美白对虾 RT-PCR法 一步RT-PCR 法 检测 苹果锈果类病毒和苹果凹果类病毒 2024年 由类病毒引起的苹果病害在中国苹果主产区普遍发生,严重制约苹果产业的健康发展。对采自不同地区的带有典型症状的弘前富士、南方脆及惠民短枝富士果实,进行苹果锈果类病毒(ASSVd)和凹果类病毒(ADFVd)检测 ,发现两种病毒能够共侵染。根据ASSVd和ADFVd保守序列设计通用引物,建立了能快速、同时检测 两种类病毒的RT-PCR 方法 。 马宁 孔令荣 张学勇 赵玲玲 由春香 张振鲁关键词:苹果锈果类病毒 RT-PCR检测 复合探针实时荧光RT-PCR 法 检测 小儿上呼吸道感染甲型流感病毒的价值 被引量:1 2024年 目的 分析小儿上呼吸道感染甲型流感病毒应用复合探针实时荧光反转录聚合酶链反应(RT-PCR )法 检测 的临床价值。方法 选择2023年1月至2023年12月流感监测信息系统两家监测点上呼吸道感染甲型流感病毒感染的患儿80例监测标本进行回顾性分析,均开展复合探针实时荧光RT-PCR 法 检测 ,分析其诊断价值。结果 根据监测标本最终诊断结果显示,阳性标本68例、阴性标本12例。经复合探针实时荧光RT-PCR 法 检出67例,检出率为83.75%,敏感度为95.59%、特异度为83.33%、准确度为93.75%、阳性结果预测值为97.01%、阴性结果预测值为76.92%;批间批内变异系数均小于5%。结论 小儿上呼吸道感染甲型流感病毒应用复合探针实时荧光RT-PCR 技术具有较高的敏感度、特异度及准确度,且检查结果快速,可为小儿上呼吸道感染甲型流感病变提供可靠的诊断,有利于制订合理的治疗方案。 杨彬彬 陈秋虾 郭丽清关键词:上呼吸道感染 甲型流感病毒 数字RT-PCR 与荧光定量RT-PCR 法 检测 草莓中甲型肝炎病毒 2023年 目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)数字芯片式RT-PCR (dRT-PCR )方法 并与real time RT-PCR (RT -qPCR )方法 进行比较,选出适用于检测 草莓中HAV的最佳方法 。方法 提取HAV疫苗RNA,优化dRT-PCR 的反应条件,评价其特异性;碱性洗脱-PEG浓缩法 对草莓标本进行前处理后提取核酸,同时采用dRT-PCR 与RT -qPCR 方法 ,检测 纯水或草莓基质中HAV疫苗RNA的敏感性、抑制率;比较人工污染草莓中HAV的回收率,并应用于市售标本中的检测 。结果确立了dRT-PCR 反应的最适退火温度为60℃,最佳引物、探针浓度为0.4μmol/L、0.4μmol/L、0.2μmol/L,特异度良好;两种检测 方法 检测 HAV疫苗RNA在纯水或草莓基质中的敏感性没有明显差异,dRT-PCR 的抑制率较低。dRT-PCR 与RT -qRCR在检测 较高浓度HAV污染草莓标本时的回收率分别为12.90±0.006%、30.12±0.02%;在检测 较低浓度HAV污染草莓标本时的回收率分别为18.27±0.07%、10.85±0.03%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。对市售标本进行检测 ,两种方法 检测 结果均为阴性。结论本研究建立的dRT-PCR 法 ,与RT -qPCR 检测 不同基质中的HAV RNA敏感性没有明显差异,但dRT-PCR 对PCR 反应抑制物有较好的耐受能力,在检测 低浓度HAV时回收率较高。两种检测 方法 均可用于草莓中甲型肝炎病毒的定量检测 ,可根据具体实际情况进行选择。 焦梦琪 石峰 尹文娇 曹经瑗 毕胜利关键词:草莓 甲型肝炎病毒 实时荧光定量RT-PCR 间接免疫荧光法 与RT-PCR 法 检测 鼠肺汉坦病毒带毒率 被引量:2 2020年 目的对间接免疫荧光法 (IFA)和逆转录聚合酶连反应(RT-PCR )两种检测 鼠肺汉坦病毒(HV)的实验方法 进行比较,为进一步完善出血热病毒实验室检测 方案提供依据。方法 采用IFA和RT-PCR 对2018年收集的200份鼠肺进行HV检测 、分型,统计鼠种和数量。结果锦州市鼠带汉坦病毒率2014年最高为5.42%(11/203),2010年最低为0.95%(1/105)。人间肾综合征出血热发病率2014年最高为6.77/10万,2010年最低为2.27/10万。鼠带毒指数与人间出血热发病率正相关(r=0.75,P<0.05);IFA检测 鼠肺HA抗原阳性率为2.00%(4/200);RT-PCR 检测 鼠肺HA核酸阳性率为4.00%(8/200),两种方法 检测 结果有统计学差异(χ~2=13.01,P<0.01);锦州地区主要流行株为汉城(SEO)型HV。结论 RT-PCR 检测 鼠肺HV核酸的敏感性高于IFA检测 鼠肺HV抗原的敏感性,可以推广应用RT-PCR 检测 鼠肺带毒率的实验室检测 技术。 杨洋 张振 张旭 白梅关键词:肾综合征出血热 汉坦病毒 间接免疫荧光法 乌鲁木齐地区RT-PCR 法 检测 儿童急性呼吸道病毒的临床研究 被引量:5 2020年 目的利用多重荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR )分析急性下呼吸道感染患儿4种病毒:人腺病毒(HADV)、人博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(HMPV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)的感染情况。方法 收集1045例急性呼吸道感染的住院患儿鼻咽深部分泌物标本,采用多重荧光RT-PCR 进行呼吸道病毒4项指标检测 ,就病毒分布情况、季节因素等方面进行临床流行病学特点分析。结果1045例患儿中有281例4种呼吸道病毒阳性,总阳性率为26.89%;其中单一病毒感染194例(69.04%)、混合病毒感染87例(30.96%),HMPV感染最多,为120例(42.70%)、其次为HRSV感染119例(42.35%);在各年龄组中≤3岁组阳性229例(36.06%),4~7岁组阳性114例(42.22%),≥8岁组阳性63例(45.00%)。从季节分布来看,春、夏、秋、冬四季的检出率分别为25.68%、28.24%、49.34%、65.57%。结论多重荧光RT-PCR 法 能快速检测 乌鲁木齐地区儿童急性呼吸道病毒,呼吸道病毒感染主要为HMPV和HRSV感染;呼吸道病毒患儿感染率最高年龄段为≥8岁;以秋季和冬季为呼吸道病毒感染高发期。 伊合帕尔·吐依洪 比拉里·艾山 姜敏 张洪平 王晶关键词:呼吸道合胞病毒 博卡病毒 偏肺病毒 定西市疑似风疹标本ELISA与RT-PCR 法 检测 分析 被引量:1 2020年 目的用ELISA法 和RT-PCR 法 检测 2019年甘肃省定西市疑似风疹病例标本,分析两种方法 的检测 效果。方法 采用ELISA方法 检测 血标本中风疹IgM抗体,用实时荧光RT-PCR 方法 检测 咽拭子标本中风疹病毒核酸。结果240份血标本中,风疹IgM抗体阳性率(33.33%)低于咽拭子标本的风疹病毒核酸阳性率(47.92%),差异有统计学意义(χ^2=10.580,P<0.01);不同出疹天数IgM抗体阳性率(χ^2=9.974)、核酸阳性率(χ^2=16.646)差异有统计学意义(P<0.01);出疹0 d(χ^2=12.698),1 d(χ^2=8.100)及出疹4 d及以上(χ^2=3.304)风疹病毒核酸阳性率高于IgM抗体阳性率(P<0.05)。结论2019年定西市风疹病毒核酸检测 阳性率高于IgM抗体阳性率;两种检测 方法 应相互结合,以早期发现和确诊风疹病例。 贺晓玲 张艳梅 陈军莲关键词:风疹病毒 IGM抗体 核酸检测 双扩增法 和real-time RT-PCR 法 检测 手足口病的比较 被引量:2 2019年 目的开展双扩增法 和real-time RT-PCR 法 检测 手足口病的比较性研究,为基层实验室建立手足口病科学快速检测 方法 提供依据。方法 对2016年-2017年宜昌市9县市区采集的205份手足口病患者的咽拭子样本,同时采用双扩增法 和real-time RT-PCR 法 检测 手足口病通用病毒、CoxA16、EV71,比较2种方法 检测 结果的差异,对2种方法 检测 结果相异的标本进行测序。结果双扩增法 同real-time RT-PCR 法 检测 结果比较,阳性标本数差异无统计学意义(x^2=0.743,P>0.05);且2种方法 与测序方法 结果比较,符合数差异无统计学意义(x^2=3.32,P>0.05)。结论双扩增法 适合基层实验室推广使用。 马静 马蓓蓓 李清元 周攀 黄英关键词:手足口病 RT-PCR法 人肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型 RT-PCR 法 检测 低度恶性纤维黏液样肉瘤FFPE组织中的融合基因被引量:4 2019年 目的探讨低度恶性纤维黏液样肉瘤(low-grade fibromyxoid sarcoma,LGFMS)福尔马林固定石蜡包埋组织(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)中用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR )法 检测 FUS-CREB3L2融合基因的可行性。方法 收集LGFMS的FFPE样本2例,以PGK基因为内参,用RT-PCR 法 扩增FUSCREB3L2融合基因。结果 2例LGFMS中均检测 有FUSCREB3L2融合基因,阴性对照均检测 无FUS-CREB3L2融合基因。结论运用RT-PCR 法 检测 FFPE样本中FUSCREB3L2融合基因的有无,有助于LGFMS的诊断和鉴别诊断。 郝颖华 赵兰 王莉 陈修文 汤显斌关键词:低度恶性纤维黏液样肉瘤 融合基因 RT-PCR 多重RT-PCR 法 检测 燕窝及其制品掺伪成分 被引量:7 2019年 目的建立一种食用燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR 检测 方法 。方法 本研究通过合成金丝燕成分、银耳成分、红藻成分特异性的引物和探针,建立燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR 检测 体系,并设计相应的特异性实验保证检测 体系的准确性,最后使用所建立的方法 对市售样品进行检测 并收集数据,验证多重实时荧光PCR 检测 方法 的适用性。结果本方法 可在1 d内完成样品的检测 ,建立的体系对金丝燕成分、银耳成分的检测 灵敏度为0.1 ng/μL,红藻成分的检测 灵敏度为0.5 ng/μL;燕窝中掺入银耳的检测 限可达到0.1%;燕窝中掺入石花菜的检测 限可达到0.5%。结论本研究建立的多重实时荧光PCR 检测 方法 具有准确、灵敏度高、特异性好的优点,可用于燕窝及其制品中掺假物成分的准确定性检测 。 陈筱婷关键词:PCR