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恒温荧光RT-PCR检测南美白对虾常见病
2025年
试验旨在探究恒温荧光RT-PCR检测南美白对虾常见3类疾病(病毒类、细菌类、寄生虫类)的应用效果。试验随机抽取3份虾苗样品,每份样品15~20头,采用RT-PCR检测肝胰腺细小病毒(HPV)、对虾杆状病毒(BPV),恒温荧光检测致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp_(AHPND))、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、黄头病毒(YHV)、虹彩病毒(DIVI)、哈维氏弧菌(HVS)、桃拉病毒(TSV)、虾肝肠胞虫(EHP)、白斑综合征病毒(WSSV)。结果显示,恒温荧光检测Vp_(AHPND)、IHHNV、YHV、DIVI、TSV、HVS、WSSV、EHP等8种病原结果均为阴性,凝胶电泳试验中未出现HPV、BPV条带,表明虾苗未携带上述病原。研究表明,RT-PCR与恒温荧光可快速有效地检测南美白对虾虾苗病原携带情况。
赵龙飞韩煜茹王万兴蔡树东
关键词:南美白对虾RT-PCR法
一步RT-PCR检测苹果锈果类病毒和苹果凹果类病毒
2024年
由类病毒引起的苹果病害在中国苹果主产区普遍发生,严重制约苹果产业的健康发展。对采自不同地区的带有典型症状的弘前富士、南方脆及惠民短枝富士果实,进行苹果锈果类病毒(ASSVd)和凹果类病毒(ADFVd)检测,发现两种病毒能够共侵染。根据ASSVd和ADFVd保守序列设计通用引物,建立了能快速、同时检测两种类病毒的RT-PCR
马宁孔令荣张学勇赵玲玲由春香张振鲁
关键词:苹果锈果类病毒RT-PCR检测
复合探针实时荧光RT-PCR检测小儿上呼吸道感染甲型流感病毒的价值被引量:1
2024年
目的 分析小儿上呼吸道感染甲型流感病毒应用复合探针实时荧光反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测的临床价值。方选择2023年1月至2023年12月流感监测信息系统两家监测点上呼吸道感染甲型流感病毒感染的患儿80例监测标本进行回顾性分析,均开展复合探针实时荧光RT-PCR检测,分析其诊断价值。结果 根据监测标本最终诊断结果显示,阳性标本68例、阴性标本12例。经复合探针实时荧光RT-PCR检出67例,检出率为83.75%,敏感度为95.59%、特异度为83.33%、准确度为93.75%、阳性结果预测值为97.01%、阴性结果预测值为76.92%;批间批内变异系数均小于5%。结论 小儿上呼吸道感染甲型流感病毒应用复合探针实时荧光RT-PCR技术具有较高的敏感度、特异度及准确度,且检查结果快速,可为小儿上呼吸道感染甲型流感病变提供可靠的诊断,有利于制订合理的治疗方案。
杨彬彬陈秋虾郭丽清
关键词:上呼吸道感染甲型流感病毒
数字RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测草莓中甲型肝炎病毒
2023年
目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)数字芯片式RT-PCR(dRT-PCR)方并与real time RT-PCR(RT-qPCR)方进行比较,选出适用于检测草莓中HAV的最佳方。方提取HAV疫苗RNA,优化dRT-PCR的反应条件,评价其特异性;碱性洗脱-PEG浓缩对草莓标本进行前处理后提取核酸,同时采用dRT-PCRRT-qPCR,检测纯水或草莓基质中HAV疫苗RNA的敏感性、抑制率;比较人工污染草莓中HAV的回收率,并应用于市售标本中的检测。结果确立了dRT-PCR反应的最适退火温度为60℃,最佳引物、探针浓度为0.4μmol/L、0.4μmol/L、0.2μmol/L,特异度良好;两种检测检测HAV疫苗RNA在纯水或草莓基质中的敏感性没有明显差异,dRT-PCR的抑制率较低。dRT-PCRRT-qRCR在检测较高浓度HAV污染草莓标本时的回收率分别为12.90±0.006%、30.12±0.02%;在检测较低浓度HAV污染草莓标本时的回收率分别为18.27±0.07%、10.85±0.03%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。对市售标本进行检测,两种方检测结果均为阴性。结论本研究建立的dRT-PCR,与RT-qPCR检测不同基质中的HAV RNA敏感性没有明显差异,但dRT-PCRPCR反应抑制物有较好的耐受能力,在检测低浓度HAV时回收率较高。两种检测均可用于草莓中甲型肝炎病毒的定量检测,可根据具体实际情况进行选择。
焦梦琪石峰尹文娇曹经瑗毕胜利
关键词:草莓甲型肝炎病毒实时荧光定量RT-PCR
间接免疫荧光RT-PCR检测鼠肺汉坦病毒带毒率被引量:2
2020年
目的对间接免疫荧光(IFA)和逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)两种检测鼠肺汉坦病毒(HV)的实验方进行比较,为进一步完善出血热病毒实验室检测方案提供依据。方采用IFA和RT-PCR对2018年收集的200份鼠肺进行HV检测、分型,统计鼠种和数量。结果锦州市鼠带汉坦病毒率2014年最高为5.42%(11/203),2010年最低为0.95%(1/105)。人间肾综合征出血热发病率2014年最高为6.77/10万,2010年最低为2.27/10万。鼠带毒指数与人间出血热发病率正相关(r=0.75,P<0.05);IFA检测鼠肺HA抗原阳性率为2.00%(4/200);RT-PCR检测鼠肺HA核酸阳性率为4.00%(8/200),两种方检测结果有统计学差异(χ~2=13.01,P<0.01);锦州地区主要流行株为汉城(SEO)型HV。结论 RT-PCR检测鼠肺HV核酸的敏感性高于IFA检测鼠肺HV抗原的敏感性,可以推广应用RT-PCR检测鼠肺带毒率的实验室检测技术。
杨洋张振张旭白梅
关键词:肾综合征出血热汉坦病毒间接免疫荧光法
乌鲁木齐地区RT-PCR检测儿童急性呼吸道病毒的临床研究被引量:5
2020年
目的利用多重荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析急性下呼吸道感染患儿4种病毒:人腺病毒(HADV)、人博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(HMPV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)的感染情况。方收集1045例急性呼吸道感染的住院患儿鼻咽深部分泌物标本,采用多重荧光RT-PCR进行呼吸道病毒4项指标检测,就病毒分布情况、季节因素等方面进行临床流行病学特点分析。结果1045例患儿中有281例4种呼吸道病毒阳性,总阳性率为26.89%;其中单一病毒感染194例(69.04%)、混合病毒感染87例(30.96%),HMPV感染最多,为120例(42.70%)、其次为HRSV感染119例(42.35%);在各年龄组中≤3岁组阳性229例(36.06%),4~7岁组阳性114例(42.22%),≥8岁组阳性63例(45.00%)。从季节分布来看,春、夏、秋、冬四季的检出率分别为25.68%、28.24%、49.34%、65.57%。结论多重荧光RT-PCR能快速检测乌鲁木齐地区儿童急性呼吸道病毒,呼吸道病毒感染主要为HMPV和HRSV感染;呼吸道病毒患儿感染率最高年龄段为≥8岁;以秋季和冬季为呼吸道病毒感染高发期。
伊合帕尔·吐依洪比拉里·艾山姜敏张洪平王晶
关键词:呼吸道合胞病毒博卡病毒偏肺病毒
定西市疑似风疹标本ELISA与RT-PCR检测分析被引量:1
2020年
目的用ELISART-PCR检测2019年甘肃省定西市疑似风疹病例标本,分析两种方检测效果。方采用ELISA方检测血标本中风疹IgM抗体,用实时荧光RT-PCR检测咽拭子标本中风疹病毒核酸。结果240份血标本中,风疹IgM抗体阳性率(33.33%)低于咽拭子标本的风疹病毒核酸阳性率(47.92%),差异有统计学意义(χ^2=10.580,P<0.01);不同出疹天数IgM抗体阳性率(χ^2=9.974)、核酸阳性率(χ^2=16.646)差异有统计学意义(P<0.01);出疹0 d(χ^2=12.698),1 d(χ^2=8.100)及出疹4 d及以上(χ^2=3.304)风疹病毒核酸阳性率高于IgM抗体阳性率(P<0.05)。结论2019年定西市风疹病毒核酸检测阳性率高于IgM抗体阳性率;两种检测应相互结合,以早期发现和确诊风疹病例。
贺晓玲张艳梅陈军莲
关键词:风疹病毒IGM抗体核酸检测
双扩增和real-time RT-PCR检测手足口病的比较被引量:2
2019年
目的开展双扩增和real-time RT-PCR检测手足口病的比较性研究,为基层实验室建立手足口病科学快速检测提供依据。方对2016年-2017年宜昌市9县市区采集的205份手足口病患者的咽拭子样本,同时采用双扩增和real-time RT-PCR检测手足口病通用病毒、CoxA16、EV71,比较2种方检测结果的差异,对2种方检测结果相异的标本进行测序。结果双扩增同real-time RT-PCR检测结果比较,阳性标本数差异无统计学意义(x^2=0.743,P>0.05);且2种方与测序方结果比较,符合数差异无统计学意义(x^2=3.32,P>0.05)。结论双扩增适合基层实验室推广使用。
马静马蓓蓓李清元周攀黄英
关键词:手足口病RT-PCR法人肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型
RT-PCR检测低度恶性纤维黏液样肉瘤FFPE组织中的融合基因被引量:4
2019年
目的探讨低度恶性纤维黏液样肉瘤(low-grade fibromyxoid sarcoma,LGFMS)福尔马林固定石蜡包埋组织(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)中用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测FUS-CREB3L2融合基因的可行性。方收集LGFMS的FFPE样本2例,以PGK基因为内参,用RT-PCR扩增FUSCREB3L2融合基因。结果 2例LGFMS中均检测有FUSCREB3L2融合基因,阴性对照均检测无FUS-CREB3L2融合基因。结论运用RT-PCR检测FFPE样本中FUSCREB3L2融合基因的有无,有助于LGFMS的诊断和鉴别诊断。
郝颖华赵兰王莉陈修文汤显斌
关键词:低度恶性纤维黏液样肉瘤融合基因RT-PCR
多重RT-PCR检测燕窝及其制品掺伪成分被引量:7
2019年
目的建立一种食用燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR检测。方本研究通过合成金丝燕成分、银耳成分、红藻成分特异性的引物和探针,建立燕窝中主成分及掺伪成分的双重和三重实时荧光PCR检测体系,并设计相应的特异性实验保证检测体系的准确性,最后使用所建立的方对市售样品进行检测并收集数据,验证多重实时荧光PCR检测的适用性。结果本方可在1 d内完成样品的检测,建立的体系对金丝燕成分、银耳成分的检测灵敏度为0.1 ng/μL,红藻成分的检测灵敏度为0.5 ng/μL;燕窝中掺入银耳的检测限可达到0.1%;燕窝中掺入石花菜的检测限可达到0.5%。结论本研究建立的多重实时荧光PCR检测具有准确、灵敏度高、特异性好的优点,可用于燕窝及其制品中掺假物成分的准确定性检测
陈筱婷
关键词:PCR

相关作者

葛明建
作品数:90被引量:384H指数:11
供职机构:重庆医科大学附属第一医院
研究主题:非小细胞肺癌 肺癌 聚合酶链反应 RT-PCR法检测 肺肿瘤
王梅
作品数:35被引量:117H指数:7
供职机构:重庆医科大学附属第一医院
研究主题:聚合酶链反应 RT-PCR法检测 信使RNA 淋巴结微转移 角蛋白
张玉洪
作品数:43被引量:132H指数:6
供职机构:重庆医科大学附属第一医院
研究主题:聚合酶链反应 RT-PCR法检测 淋巴结微转移 角蛋白 乙型肝炎
李良彬
作品数:76被引量:298H指数:10
供职机构:重庆医科大学附属第一医院
研究主题:外科治疗 聚合酶链反应 肺肿瘤 外科手术 RT-PCR法检测
陈瑜
作品数:369被引量:1,845H指数:20
供职机构:浙江大学医学院附属第一医院
研究主题:乙型肝炎 血清 手足口病 急性腹泻 HBV