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腺病毒介导p27基因转染对HeLa细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 2012年; 目的观察p27基因对人宫颈癌细胞HeLa增殖及凋亡的影响。方法将已构建成功的腺病毒载体Ad-p27转染至宫颈癌细胞系HeLa细胞,Western blotting法检测病毒转染后p27蛋白在不同时间点表达;噻唑兰(MTT)法检测其对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测其对肿瘤细胞凋亡的影响。结果 HeLa细胞成功转染进Ad-p27;在各观察的时间点内,与对照组比较,同一时间点的细胞中p27蛋白水平均显著增加(P<0.01),细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率则显著增加(P<0.01)。结论 p27基因抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,腺病毒构建p27基因有望成为宫颈癌治疗的一个新方法。; 杨波任永生黄光荣范丽; 关键词：转染细胞增殖细胞凋亡 HELA细胞 P27蛋白

慢病毒介导组织特异性启动子SM22alpha驱动p27基因转染对离体培养的血管平滑肌细胞增殖的影响: 目的: 探讨p27基因转染对血管平滑肌细胞/(VSMCs/)增殖的影响及由SM22alpha启动子介导的特异性效果。方法: 提取SM22alpha启动子,构建携带p27基因的重组慢病毒,并感染原...; 丁灿; 关键词：P27基因慢病毒增殖; 文献传递

脂质体介导p27基因转染对喉癌细胞系Hep-2生长影响的研究: 2009年; 目的探讨p27基因对喉癌Hep-2细胞系生长的抑制作用,为喉癌发生机制的研究和基因治疗提供理论依据。方法采用基因转染技术,将p27cDNA转染到喉癌Hep-2细胞系中,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响。结果转染p27基因的喉癌细胞生长受到抑制,其在软琼脂上克隆形成能力降低了大约4倍。对细胞周期分析表明,处在G0～G1期的细胞由32.2%增加到66.9%,经Dotblot、Western blot杂交和免疫组化证实,p27mRNA表达有明显差异(P<0.01),p27的蛋白表达量有明显差异(P<0.01),说明p27蛋白具有生长抑制功能,其作用点为G1～S期。结论提高喉癌细胞中p27的表达,能抑制肿瘤细胞的生长,导入p27基因是一种治疗喉癌的新途径。; 孙安孙永柱高卓平席爱民段学军陈谊辉; 关键词：喉肿瘤基因肿瘤抑制转染

腺病毒介导p27基因转染对离体血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：1: 2008年; 目的探讨p27基因转染对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及其机制。方法通过构建携带p27基因的腺病毒并转染培养大鼠VSMC，增强其p27的表达，以免疫细胞化学方法检测p27蛋白在VSMC上的表达；并用^3H标记的胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR）掺入及流式细胞仪等方法检测p27过度表达，对有丝分裂原（血清和大鼠血小板衍化生长因子PDGF-BB）刺激VSMC增殖的影响以及细胞周期依赖性激酶2（CDK2）、细胞增殖核抗原（PCNA）和连接蛋白Cx43表达的变化。结果p27阳性表达率随AdCMV-p27转染VSMC时间延长而不断增加，24h达到峰值（85．81％）。AdCMV-p27转染可显著抑制有丝分裂原刺激引起的G0～G1期细胞减少和^3H-TdR掺入量的增加（P〈0．05）；可抑制PDGF-BB刺激引起的CDK2、PCNA和Cx43蛋白表达阳性率的升高（P〈0．05）；并使p27蛋白表达阳性率由PDGF-BB刺激后的4．23％上升至33．91％（P〈0．01）。结论p27过度表达可抑制有丝分裂原刺激引起的VSMC增殖，其机制与其增强p27表达及抑制CDK2、PCNA和连接蛋白Cx43表达有关。; 冉擘力何国祥王耿宋治远舒茂琴; 关键词：P27 增殖 CDK2 CX43

p27基因转染对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响被引量：3: 2007年; 目的:研究p27对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响差异,探讨p27在瘢痕形成中的作用。方法:取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),p27基因转染HTsFb,建立成纤维细胞-胶原网模型,观察p27基因转染对p27基因转染HTsFb-胶原网收缩的影响差异。结果:p27能抑制HTsFb-胶原网收缩。结论:p27可能通过抑制瘢痕收缩来抑制瘢痕形成。; 董茂龙胡大海姚庆君韩军涛朱雄翔王洪涛; 关键词：P27 瘢痕

P27基因转染对瘢痕成纤维细胞超微结构的影响被引量：1: 2006年; 目的:观察P27基因转染对体外培养增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响,探讨P27基因抑制瘢痕的作用。方法:实验于2001-06/2002-01在第四军医大学烧伤科实验室、第四军医大学电镜中心完成。pcDNA-p273真核表达质粒由第一作者构建,应用基因转染技术将所构建的pcDNA3-p27载体转染成纤维细胞,培养的增生性瘢痕成纤维细胞分为空白对照组(即未经转染的增生性瘢痕成纤维细胞)、转pcDNA3空载体组、转pcDNA3-P27组。获得稳定的P27表达后,用透射电镜观察成纤维细胞内细胞器形态和数量的变化。结果:①空白对照组成纤维细胞核大而呈圆形,核仁明显,胞浆内具有较丰富的粗面内质网,较发达的高尔基复合体,较多的线粒体、微丝、微管,细胞表面微绒毛及突起较多。②转pcDNA3空载体组粗面内质网、线粒体较丰富。③转pcDNA3-P27组细胞胞浆内粗面内质网、线粒体、微丝、微管明显减少,大部分细胞出现染色体边聚,粗面内质网上的核糖体明显减少,部分细胞呈现凋亡,大部分细胞呈典型的生长抑制像。④P27明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的合成功能。结论:P27可能通过抑制成纤维细胞的细胞合成、增殖功能来抑制瘢痕形成。; 董茂龙胡大海姚庆君韩军涛朱雄祥; 关键词：瘢痕基因转染

人突变p27基因转染对大肠癌SW480细胞黏附作用的影响: 2005年; 目的研究人突变p27基因p27mt对大肠癌细胞黏附作用的影响,探讨p27mt基因在大肠癌转移中的作用机制。方法用Ad-p27mt转染大肠癌细胞SW480,采用WesternBlot检测p27mt在SW480中的表达。分别采用细胞计数法,MTT法检测p27mt对大肠癌细胞同质黏附作用和异质黏附作用的影响。结果转染Ad-p27mtSW480细胞转染后,同质黏附作用高于对照,异质黏附作用低于对照。结论上调p27mt基因的表达,可使大肠癌细胞间的同质黏附作用增强,异质黏附作用降低。因此,p27mt基因具有抑制大肠癌细胞转移的功能,其机制是改变了细胞基质及细胞间的黏附能力。; 陈珺徐少勇邓长生; 关键词：P27基因转染突变 MTT法检测大肠癌转移细胞计数法

人突变p27基因转染大肠癌细胞凋亡的实验研究被引量：3: 2005年; 目的:探讨人突变p27基因对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。方法:构建重组腺病毒Ad-p27mt,转染大肠癌细胞SW480,用流式细胞仪、DNA片段分析法、TUNEL法观察Ad-p27mt对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。结果:成功构建了Ad-p27mt,在感染复数≥50时,可达100%的转导效率。Ad-p27mt转染SW48024h后流式细胞仪检测在G1期前出现了亚二倍体凋亡峰,细胞DNA提取电泳后出现了凋亡特征性梯带,TUNEL法检测凋亡指数实验组和对照组分别为82·6±3·2和5·0±3·5,差异显著(P<0·01)。结论:人突变p27基因能有效诱导大肠癌细胞的凋亡。; 陈珺徐少勇熊玲王家宁黄永章; 关键词：结直肠肿瘤细胞凋亡

腺病毒介导的突变型p27基因转染对大肠癌裸鼠模型抑制作用的研究: 本文目的是以腺病毒为载体构建突变型p27kip1(p27mt)，并将其注射到人大肠癌SW480裸鼠模型肿瘤瘤体内，通过观察肿瘤生长情况及肿瘤生长抑制率，研究外源性突变型p27kip1(p27mt)基因对大肠癌的体内抑制作...; 杜勇; 关键词：大肠癌; 文献传递

腺病毒介导的人突变p27基因转染对人大肠癌细胞系的作用被引量：2: 2004年; 目的　用人重组p2 7mt腺病毒感染大肠癌细胞株SW 480 ,研究p2 7mt对大肠癌细胞的抑制作用。方法　用重组腺病毒Ad -p2 7mt转染SW 480后 ,用Westernblot检测目的基因的表达 ;用流式细胞仪对转染细胞进行倍体分析 ,绘制生长曲线观察对细胞的生长抑制作用。结果　Ad -p2 7mt转染SW 480后 ,通过Westernblot分析发现p2 7在细胞中出现了高表达 ;PI染色流式细胞仪检测 ,77 9%的细胞阻滞于G0 /G1 期 ,而Ad -LacZ组及空白对照组分别为 2 5 5 7%和 2 5 2 9%(P <0 0 0 1) ;由生长曲线可以看出Ad -p2 7mt于 2 4h内对细胞就有明显的抑制作用 ( P<0 0 5 ) ,且持续时间长。结论　重组腺病毒能够有效转染p2 7mt基因进入SW480细胞内并获得了高表达 ;p2 7mt对细胞周期有明显的阻滞作用且对细胞的生长有明显的抑制作用。突变p2 7是一种细胞周期高效阻滞因子和高效生长抑制因子 ,为p2; 陈珺徐少勇邓长生王家宁黄永章; 关键词：腺病毒介导作用基因突变 P27基因转染大肠癌细胞系

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