搜索到11690篇“ H5N1禽流感病毒“的相关文章
- 华东地区首例人感染2.3.4.4b分支H{1}N1禽流感病毒毒株分子特征分析
- 2024年
- 目的分析华东地区首例感染人的2.3.4.4b H{1}N1禽流感病毒分子进化基因特性。方法通过实时RT-PCR、病毒培养和序列分析,对患者痰标本和支气管肺泡灌洗液进行病毒培养和鉴定。利用Mega 6.1等软件构建系统发育树以探索病毒的进化和起源。结果从1例患严重呼吸道症状患者的支气管肺泡灌洗液标本中分离到1株甲型流感病毒,属于甲型H{1}N1禽流感2.3.4.4b分支。对该毒株进行了全基因组测序分析,8个基因组片段与2021年以来在欧亚大陆特别是中国南方流行的H{1}N1分离株具有极高的核苷酸序列相似性(99.1%~99.7%)。该病毒HA蛋白的226~228位氨基酸未发生突变,保留了禽类受体α2-3半乳糖苷唾液酸(SAα2-3Gal)结合特性,为高致病性禽流感H{1}N1病毒;其NA和M2蛋白中未发现与抗病毒药物(包括奥司他韦、扎那米韦和金刚烷)耐药性相关的突变;JS210的PB2蛋白的E627K和D701N位点以及NS1蛋白的D92E位点均未发生突变,表明该毒株对人体的适应力有限。结论分支2.3.4.4b H{1}N1禽流感病毒可以溢出族群感染人类并引起严重的疾病,应持续加强对禽流感病毒的监测。
- 邓斐祁贤余慧燕王慎骄许可黄昊頔鲍倡俊
- 关键词:禽流感病毒H5N1亚型
- 2023年河南省外环境H7{1}9禽流感病毒的基因组序列分析被引量:1
- 2024年
- 目的分析活禽市场相关环境中检出的H7{1}9禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的遗传进化和分子特征。方法采集禽类粪便、污水,以及脱毛机和案板擦拭拭子等标本,实时荧光定量PCR鉴定甲型流感病毒和H7{1}9亚型。对于H7{1}9阳性标本以甲型流感病毒通用引物扩增病毒全基因组并测序,利用BLAST和MEGA X软件进行序列比对、系统进化和分子特征分析。结果2023年2月采集于许昌市活禽市场的7份外环境标本中检出4份H7{1}9 AIV阳性,3份H7{1}9 AIV阳性标本测序成功,其各基因核苷酸一致性较高(98.37%~100.00%)。BLAST分析显示主要与我国2020—2021年国内禽中分离的H7{1}9毒株一致性最高。遗传进化分析显示3株病毒株聚在同一分支,与最近环境分离株相聚较近,而与最近人/禽感染病毒株关系较远。通过与各时期的代表性病毒株序列比对发现,本研究检出的病毒株呈禽高致病性,裂解位点处插入了4个氨基酸KRAA,病毒株血凝素受体结合位点为QSG,属于禽结合受体,血凝素出现G186I位点突变。聚合酶碱性蛋白2未出现哺乳动物适应性E627K突变。未检测到与神经氨酸酶抑制剂(奥司他韦)和聚合酶酸性蛋白抑制剂(巴洛沙韦)耐药相关的R292K和I38T位点突变,提示病毒对上述药物敏感性未降低。M2蛋白出现S31{1}突变,提示对烷胺类药物耐药。结论从活禽市场检出的3株H7{1}9病毒株呈禽高致病性,与既往感染人/禽代表株相比,未明显增加人受体结合力、哺乳动物致病性、病毒传播力和耐药相关分子位点。
- 毋碧聪罗雪卢世栋宋云张白帆卫海燕聂轶飞夏晖万思嘉叶莹黄学勇郭万申马红霞
- 关键词:禽流感病毒活禽市场遗传进化突变
- 云南省2022年3株H{1}N6禽流感病毒的分离鉴定及其血凝素和神经氨酸酶基因特征分析
- 2024年
- 目的对活禽市场环境中检出的3份H{1}N6亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)标本进行测序鉴定和基因特征分析,为预防人感染H{1}N6亚型AIV提供依据。方法通过实时荧光定量PCR确定病毒型别,采用二代测序方法对病毒血凝素({13}emagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因序列进行测序。使用NCBI中BLAST模块进行比对,用Mega7.0软件构建进化树并进行基因特征分析。结果3份H{1}亚型阳性标本经测序鉴定为H{1}N6亚型AIV,属于Clade2.3.4.4支系。病毒的HA蛋白存在6个连续碱性氨基酸(LRERRRKRGL,其中R,K为碱性氨基酸);病毒HA蛋白的受体结合位点238~240位氨基酸是QRG(氨基酸排序以H3-HA为准),受体特征为禽源;NA蛋白第69~73位点氨基酸未出现茎缺失。结论环境中3份H{1}亚型AIV核酸阳性病毒鉴定为新型H{1}N6亚型AIV,属于高致病AIV,但具有不容易感染人的受体结合特征。活禽市场中持续存在H{1}N6病毒,对人类健康和公共卫生存在威胁,需要继续加强监测。
- 刘照生周洁楠伏晓庆赵晓南陈瑶瑶孙艳红韩晓宇叶芯妤张美玲
- 关键词:活禽市场禽流感病毒
- 表达H9{1}2禽流感病毒HA2蛋白重组乳酸菌的构建与免疫效果研究
- 李雨欣
- 抗H{1}N1禽流感病毒M1蛋白全人源胞内抗体的制备及纯化被引量:1
- 2022年
- 目的 制备抗H{1}N1禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)M1蛋白全人源胞内抗体TAT-ScFv M1-mFc,并进行纯化。方法 从pET28(a)-TAT-ScFv M1质粒中通过PCR扩增目的基因片段TAT-ScFv M1,将该片段与表达载体pET32(a)-HisTag-Sumo-mFc连接,构建重组表达质粒pET32(a)-HisTag-Sumo-TAT-ScFv M1-mFc,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达目的蛋白。通过金属螯合层析、Sumo酶切及亲和层析等方法对目的蛋白进行纯化,ELISA法检测抗体的亲和活性。结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确。重组蛋白以包涵体形式表达,相对分子质量约80 000。制备的胞内抗体具有明显结合M1蛋白的活性。结论 获得了具有亲和活性的抗H{1}N1AIV M1蛋白的全人源胞内抗体蛋白TAT-ScFv M1-mFc,为进一步开发针对AIV H{1}N1的抗体药物奠定了基础。
- 蔄弘扬孙赫田园吴广谋张国利邱月王瑜王瑜张文慧
- 关键词:H5N1禽流感病毒胞内抗体
- H3{1}2禽流感病毒反向遗传操作平台的建立
- 2022年
- 近几年,禽流感{1}(AIV)跨越禽-犬屏障产生新型H3N2犬流感{1},后者在亚洲多国的犬中广泛流行,造成潜在的公共卫生安全威胁。尽管如此,H3N2 AIV如何跨宿主传播至犬的分子机制尚不清楚。为此,本研究利用早期筛选到的一株不感染犬和鼠,但感染禽的H3N2禽流感{1}A/Duck/S{12}a{13}g{12}ai/01/2009(H3N2)(简称为SH01),通过RT-PCR技术扩增了{1}的8个全基因片段,并分别克隆至PLLB双向表达载体上。将构建成功的8个质粒纯化后共转染293T细胞,转染48 {12}后加入TPCK胰酶作用2 {12},将上清液和细胞一同接种9~11日龄SPF鸡胚,检测其血凝效价。经测序分析,确定获救{1}的8个基因片段序列与亲本毒株的序列完全一致,表明该{1}拯救成功。H3N2禽流感{1}反向遗传操作平台的成功建立为探索该{1}跨宿主传播犬的分子机制提供了工具。
- 石晓娜闫婉婉陈新武潘学李雪松刘芹防杨健美李泽君滕巧泱
- 关键词:H3N2禽流感病毒
- 利用GST pull-down联合质谱技术鉴定{1}7N9禽流感病毒PA-X的互作蛋白被引量:1
- 2022年
- 【目的】为探究H7{1}9亚型禽流感病毒(AIV)PA-X蛋白的功能,采用GST pull-down联合质谱技术筛选与鉴定与PA-X相互作用的宿主蛋白。【方法】构建PA-X的重组表达载体pGEX-4T-PA-X,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白,并利用GST亲合树脂进行纯化得到GST-PA-X融合蛋白。利用GST pull-down技术,将GST-PA-X和GST对照蛋白分别与A549细胞裂解液总蛋白进行体外孵育,得到的蛋白复合物经SDS-PAGE分离后进行质谱检测分析。【结果】经GST pull-down筛选与质谱分析鉴定后得到39个高可信度的可能与PA-X互作的候选蛋白质。通过GO注释和KEGG等通路富集分析发现,这些蛋白主要参与R{1}A的代谢及加工、mR{1}A翻译及运输、多肽生物合成及基因表达的转录后调节等生物学过程。对其中评分最高的蛋白Hsp70-2与PA-X的相互作用作进一步验证,免疫荧光试验结果表明Hsp70-2与PA-X可以在细胞浆中共定位。【结论】利用GST pulldown联合质谱技术筛选到39种与PA-X互作的候选蛋白,且经免疫荧光试验证明候选蛋白Hsp70-2与PA-X存在共定位,为深入探讨PA-X在AIV生命周期中的作用机制奠定基础。
- 徐国双姜童潇郭艺迪段铭张茂林关振宏
- 关键词:质谱
- 全人源抗H{1}N1禽流感病毒M1蛋白胞内抗体的制备及活性研究
- H{1}N1高致病性禽流感是一种可以在鸟类间传播的烈性传染病,病毒常常由野生禽类携带,通过候鸟的迁徙引起长距离、大范围跨国传播。目前国内已有24个省和自治区发布过有关H{1}N1禽流感的疫情报告,其造成的直接经济损失十分巨大,消...
- 蔄弘扬
- 关键词:H5N1蛋白纯化
- PB2和PA磷酸化与乙酰化修饰对H{1}N1禽流感病毒生物学特性的影响及机制探索
- A型流感{1}(Influenza A virus,IAV)是分节段的单股负链RNA囊膜{1}。流感{1}的季节性频发对人类的健康与经济的发展造成了很大的危害。IAV的快速进化、耐药毒株的出现以及疫苗效力有限等问题可能会造成I...
- 曾紫雄
- 关键词:H5N1禽流感病毒PA磷酸化乙酰化
- 2021年北京市野生天鹅死亡案例的诊断及其H{1}N8禽流感病毒的遗传变异分析
- 2022年
- 为探明2021年2月北京市海淀区圆明园遗址公园内3只野生天鹅异常死亡的原因,本试验通过临床剖检和实验室检测进行综合分析,并对临床样品进行病毒分离和基因组测序分析。结果显示:病死天鹅头面部水肿,角膜充血,消化道、呼吸道黏膜广泛充血、出血等典型{1}特征,实验室检测确诊病原为H5N8亚型{1}病毒;遗传进化分析显示,该病毒属于2.3.4.4分支;分离到的毒株HA裂解位点符合高致病性{1}分子特征;氨基酸位点分析显示,该病毒含有典型的禽型α2-3受体结合位点。本研究结果对北京地区及时、准确地防控H5N8亚型{1}病毒具有重要意义。
- 吴迪张启龙马志军韦海涛徐发荣李扬高晓龙王培程汝佳王慧强刘晓冬罗伏兵
- 关键词:禽流感病毒遗传进化分析