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融合大肠杆菌素DNA结合域的Taq DNA聚合酶的性质表征被引量：1: 2024年; Taq DNA聚合酶发现自水生热栖菌(Thermus aquaticus),是一种同时具有逆转录酶活性以及DNA聚合酶活性的工具酶。Colicin E(简称CE)蛋白质是一类以维生素受体BtuB为跨膜受体的大肠杆菌素,其中CE2、CE7、CE8和CE9是非特异性的DNase型大肠杆菌素。Taq DNA聚合酶由5′→3′核酸外切酶结构域、3′→5′核酸外切酶结构域以及聚合酶结构域组成。缺失5′→3′核酸外切酶结构域的Taq DNA聚合酶(ΔTaq)具有更高的产量,但是其进行性很低,无法扩增长片段。为了提高ΔTaq的进行性,本研究融合dCE和ΔTaq,发现dCE-ΔTaq的进行性相比于Taq DNA聚合酶和dCE-Taq显著提升,并且其逆转录酶活性也比ΔTaq更高。dCE8-ΔTaq的提升最明显,不仅能够1 min内扩增8 kb的DNA片段,并且产量高于其他突变体。综上所述,本研究通过将ΔTaq DNA聚合酶和dCE进行融合,提升了Taq DNA聚合酶的PCR效率和逆转录活性,为改造Taq DNA聚合酶提供了新的方法,有望开发出性质更好的Taq DNA聚合酶。; 王亚平平啸寅赵艺刘阳吴林马立新; 关键词：CE

雌激素受体α及DNA结合域在宫颈病变中的研究进展: 2022年; 宫颈癌是一种发生在宫颈上皮的妇科恶性肿瘤,其是全球女性恶性肿瘤中最为常见的癌症之一。尽管采取各种预防措施,如HPV筛查和预防性HPV疫苗,在一定程度上降低了宫颈癌的发病率,但宫颈癌的转移和复发仍然是患者死亡的主要原因。除HPV感染外,雌激素及雌激素受体α(ERα)对宫颈病变的影响非常重要,同时,长期口服避孕药和多胎妊娠会增加宫颈癌发病的风险。越来越多研究表明,有多种miRNA参与调节ERα,进而促进宫颈癌的发生;且在宫颈癌中发现ESR1的突变,推测其参与着宫颈病变的发生与发展。转基因小鼠实验表明对ERαDNA结合域(DBD)的干扰可影响相关的基因转录,DBD区域突变的转基因鼠在雌激素作用下不会发生宫颈癌,因此,DBD区域可能成为宫颈病变早期诊断和临床治疗的新靶点。本文对ERα及其突变、miRNA调节以及DBD区域与宫颈病变相关方面的研究进展做一综述。; 王杰宋建东; 关键词：雌激素受体Α DNA结合域突变分子机制

拟南芥NAC53转录因子DNA结合域的筛选与鉴定: NAC(NAM,ATAF和CUC)家族是植物特有的转录因子家族之一,该家族成员广泛参与植物生长、发育和胁迫反应。研究发现NAC转录因子与靶基因启动子结合,激活或抑制下游基因表达来参与植物防卫反应。课题组前期在拟南芥c D...; 董学硕; 关键词：NAC转录因子原核表达蛋白纯化

改造的转铁蛋白DNA结合域、重组DNA聚合酶及制备方法: 本发明公开了一种改造的转铁蛋白DNA结合域，所述转铁蛋白为乳转铁蛋白LTF、血清铁传递蛋白TF、黑素转铁蛋白MTF或卵转铁蛋白OTF，所述各转铁蛋白的N端具有一段同源的DNA结合域，其中，DNA结合域的第10位、第20位...; 刘华华; 文献传递

翼螺旋转录因子FOXO1的DNA结合域的表达、纯化及结合特性被引量：3: 2017年; 目的:探讨翼螺旋转录因子FOXO1的DNA结合域(FOXO1 DNA binding domain,FOXO1-DBD)的表达、纯化及与DNA的结合特性。方法:采用优化FOXO1-DNA的基因序列和低温诱导的方式实现FOXO1-DBD蛋白的可溶性表达,通过镍亲和层析及阳离子交换层析进行纯化,并经凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证FOXO1-DBD的DNA结合特性。结果:优化后的FOXO1基因在21℃时编码的蛋白大多以可溶性方式表达,通过两步纯化即可获得95%以上纯度的FOXO1-DBD蛋白,纯化的蛋白与含FOX家族DNA结合基序(G/ATAAACA)的DNA序列显示良好的结合特性。结论:建立了FOXO1-DBD蛋白高效表达、纯化的方法,验证了FOXO1蛋白在识别DNA上的复杂性。; 哈依努尔李俊陈永恒陈林陈主初; 关键词：FOXO1 DNA结合域表达纯化

改造的转铁蛋白DNA结合域、重组DNA聚合酶及制备方法: 本发明公开了一种改造的转铁蛋白DNA结合域，所述转铁蛋白为乳转铁蛋白LTF、血清铁传递蛋白TF、黑素转铁蛋白MTF或卵转铁蛋白OTF，所述各转铁蛋白的N端具有一段同源的DNA结合域，其中，DNA结合域的第10位、第20位...; 刘华华

CRISPR/Cas9系统中Cas9蛋白DNA结合域及sgRNa-shRNA阵列表达研究: CRISPR/Cas9是新近开发的一种基因编辑技术，由两部分组成，非特性的核酸酶Cas9蛋白和一个小片段导向RNA。鉴于CRISPR/Cas9系统结构简单，容易操作以及较高的基因组切割效率，已经被广泛应用于各种生物的基因...; 刘致远; 关键词：DNA结合域短发夹RNA 基因表达; 文献传递

NR4A1 DNA结合域的表达纯化被引量：1: 2015年; 目的:寻求一种核受体家族蛋白NR4A1 DNA结合域(NR4A1 DNA binding domain,NR4A1-DBD)表达纯化的方法。方法:构建融合蛋白PET28a-NR4A1-DBD表达载体,分别通过镍亲和层析、阳离子交换层析及凝胶过滤的方法对目的蛋白进行纯化。结果:PET28a-NR4A1-DBD蛋白在低温诱导(24℃)时多以可溶性形式存在,通过此纯化,可达到每升培养基产生2~3 mg蛋白,纯度高达95%以上。结论:镍亲和层析是一种可靠、实用的蛋白表达纯化方法,后续使用阳离子交换层析及凝胶过滤可以进一步提高蛋白纯度。; 闫宁宁李俊陈小娟陈永恒陈林陈主初; 关键词：层析阳离子交换纯化

KSHV病毒vIRF4 DNA结合域、其多克隆抗体及制备方法: 本发明涉及KSHV病毒vIRF4？DNA结合域、其多克隆抗体及制备方法。本发明人利用基因工程技术重组表达了KSHV的vIRF4？DNA结合结构域，免疫动物制备了鼠源的多克隆抗体。所述的抗体具有极好的结合特异性和专一性。; 蓝柯胡海岱梁德光; 文献传递

pprM及其DNA结合域基因敲除对耐辐射奇球菌辐射抗性影响: 目的耐辐射奇球菌（Deinococcus Radiodurans，DR）对于电离辐照及多种极端环境具有极强的抗性，有研究提示pprM基因可能对DR菌的极强辐射抗性具有重要作用。本研究拟构建pprM及其DNA结合域...; 杨杰; 关键词：耐辐射奇球菌基因敲除辐射抗性; 文献传递

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