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A型魏氏梭菌α毒素羧基端蛋白基因表达与结构分析被引量：1
2020年
利用PCR技术将α毒素羧基端基因CPA251-370克隆到pET-32a载体上,构建了重组表达质粒pXETCPA-C,酶切鉴定和序列分析证实其含有CPA251-370基因且序列和阅读框架均正确。对重组菌株BL21(DE3)(pXETCPA-C)表达的蛋白质进行SDS-PAGE分析,结果表明CPA251-370蛋白表达量占菌体总蛋白质相对含量的16.43%。SOPMA法预测表明CPA251-370蛋白二级结构主要由β折叠和无规则卷曲组成,其3D结构与α毒素羧基端部分相似。CPA和CPA251-370蛋白的圆二色(CD)光谱分析发现两者的CD光谱仅有一些微小变化。免疫攻毒试验表明CPA251-370蛋白免疫的小鼠能抵抗最小致死剂量(MLD) 0.5 mL·只-1(活菌数约为5×109 cfu)的A型魏氏梭菌标准株C57-1毒素攻击。该研究深入阐释了A型魏氏梭菌α毒素的分子结构,为揭示其作用的分子机制奠定了坚实基础。
许崇利许崇波佘玉罕
关键词：A型魏氏梭菌Α毒素
一例D-型魏氏梭菌感染引起的羊肠毒血症病例研究被引量：2
2020年
羊肠毒素血症是一种急性疾病,病程普遍较短,羔羊的患病率和死亡率较高。2018年8月25日,阿里地区日土县日土镇日土村7户牧民的羔羊在近48 h内突然死亡6只。发病羊排黄褐色水样稀粪,死亡前突然倒地,全身颤抖、磨牙、头颈后仰,大口喘气,发病后2 h内死亡,死亡羔羊体腹部胀气,眼球突出、粘膜充血。死亡羔羊四肢根部组织间隙充气,腹腔内充有恶臭气体,小肠充气,肠壁充血、水肿,肠粘膜出血,肠壁内有溃疡;心包液体增多,心脏肿大;肺充血、气肿;肾脏肿大、包膜紧张、表面充血,实质松软,稍压即碎;真胃内有未消化的饲草料。经现场调查、临床检查、死畜解剖和实验室生化检测等综合分析,确诊为D型魏氏梭菌感染引起的羊肠毒血症。经笔者及时诊治,疫情得以控制。
次仁卓玛
关键词：羔羊
A型、C型魏氏梭菌的毒力测定
2019年
作者对从山西省各地患病动物病料中分离得到的A型、C型魏氏梭菌菌株在不同温度、不同培养时间下进行了毒力测定。试验结果表明:在35℃培养7h时,A型、C型魏氏梭菌菌株产毒能力最强。此结果为今后制备A型、C型魏氏梭菌疫苗奠定了基础,提供了试验依据。
孔庆娟
关键词：A型魏氏梭菌C型魏氏梭菌毒力
D型魏氏梭菌诊断方法的研究进展被引量：1
2018年
魏氏梭菌病是由魏氏梭菌引起的一种重要的人兽共患传染病。这种病菌可导致各种家畜的肠毒血症或坏死性肠炎,其中D型魏氏梭菌病包括牛、羊以及灰鼠的肠毒血症等,其菌体所产的毒素是引起动物死亡的重要因素之一。笔者对D型魏氏梭菌诊断方法的最新研究进展进行了阐述,为D型魏氏梭菌病在今后的诊断方法上提供有力依据。
车达王亮刘彦双
关键词：D型魏氏梭菌毒素菌型鉴定
A型魏氏梭菌致猪猝死的探讨被引量：2
2018年
一提起猪的魏氏梭菌病,人们往往想到是仔猪的梭菌性肠炎,即俗称的仔猪红痢,但实际上其病原只是魏氏梭菌的一种—C型魏氏梭菌,主要发生于1周龄以内特别是1~3日龄的新生仔猪,1周龄以上的仔猪很少发病。而近年来,中大猪及母猪发生一种以腹部鼓胀、猝死为特征的疾病,虽然发病率较其它疾病相对较低但却呈日趋上升趋势,而且只要发病,基本上100%死亡。
李建福
关键词：A型魏氏梭菌仔猪红痢猝死C型魏氏梭菌魏氏梭菌病梭菌性肠炎
绵羊A型魏氏梭菌感染血浆蛋白差异分析
2018年
为研究绵羊感染魏氏梭菌血浆蛋白表达变化,寻找疾病诊断及疫苗研发的候选抗原,实验利用Albumin&Ig G Depletion Spintrap^(TM)试剂盒去除血浆高丰度蛋白,2-DE技术分离蛋白,PDQUest 8.0软件分析2-DE图谱得到差异蛋白点,离子阱质谱鉴定蛋白点。结果表明:Albumin&Ig G Depletion Spintrap^(TM)试剂盒成功去除了血浆中Albumin和IgG,凝胶得到10个差异明显的蛋白点,质谱鉴定出5种蛋白,分别为转铁蛋白、结合珠蛋白、血浆淀粉样蛋白、免疫球蛋白和载脂蛋白,这些蛋白涉及机体脂肪代谢、应激反应以及免疫防御等。这些蛋白的发现对绵羊魏氏梭菌早期诊断提供了重要的信息,为疾病防治及新型疫苗的研发提供了参考靶标。
郭虹
关键词：绵羊魏氏梭菌2-DE质谱
A型魏氏梭菌α毒素氨基端plc基因的生物学活性探究被引量：1
2017年
为了探究α毒素氨基端及其生物学功能的关系,本研究利用PCR技术克隆了魏氏梭菌α毒素氨基端基因PLC1-250,构建了含PLC1-250基因重组质粒的BL21(DE3)(p N-PLC1-250)重组表达菌株。根据序列分析和酶切鉴定的结果,证实了重组质粒p N-PLC1-250含有PLC1-250基因,且其开放阅读框架和基因序列均正确。经过SDS-PAGE分析,结果表明PLC1-250蛋白表达量约占菌体总蛋白相对含量的18.76%。对其生物学活性的研究表明,PLC1-250蛋白与α毒素一样具有磷脂酶C活性。研究为进一步揭示α毒素的分子作用机制提供了有力的支持。
许崇利许崇波宫语晨
关键词：A型魏氏梭菌生物学活性
A型魏氏梭菌α毒素氨基端PLC结构分析与生物学活性鉴定被引量：1
2017年
利用PCR扩增技术克隆A型魏氏梭菌α毒素氨基端的PLC1-250基因,构建含PLC1-250基因表达质粒的BL21(DE3)(p N-PLC1-250)重组菌株,序列分析和酶切鉴定证实构建的p N-PLC1-250重组质粒含有目的基因且基因序列与阅读框架均正确。SDS-PAGE分析表明,PLC1-250蛋白表达量占菌体总蛋白相对含量的18.76%。利用SOPMA法预测PLC1-250蛋白分子的二级结构,且同源模建了其3D结构,结果表明,PLC1-250蛋白分子的二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,三级结构与α毒素相类似。此外,还对其生物学活性进行了鉴定,可为进一步探索α毒素作用的分子机制,以及其分子结构与生物学功能的关系奠定基础。
许崇利许崇波宫语晨
关键词：A型魏氏梭菌生物学活性圆二色光谱
A型魏氏梭菌α毒素Asp-56定点突变及其氨基端plc基因表达与特性分析
A型魏氏梭菌是引起创伤性气性坏疽和人类食物中毒的主要病原菌之一,α毒素是其主要的致病因子。α毒素是一种依赖于锌离子具有磷脂酶C(PLC)活性的金属酶,它具有酶分子的结构特征,其活性部位包括催化位点和结合位点。α毒素第56...
宫语晨
关键词：磷脂酶C基因定点突变基因表达
头功铁药散对A型魏氏梭菌α毒素的mRNA表达及损伤小鼠免疫功能的影响
2015年
探讨自拟处方头功铁药散对A型魏氏梭菌α-毒素损伤小鼠免疫功能的影响,并检测了α毒素mRNA表达的情况.检测小鼠部分免疫功能;荧光定量RT-PCR法检测α毒素基因mRNA表达的变化.结果显示,与模型组相比,头功铁药散能拮抗α-毒素对小鼠的损伤,极显著提高小鼠免疫器官指数及巨噬细胞的吞噬能力(p<0.01);与细菌模型组相比,头功铁药散能极显著降低α毒素基因表达(p<0.01).推测头功铁药散可通过提高小鼠免疫功能,并下调α毒素基因表达,从而减少α-毒素对小鼠的损伤.
赖建彬彭诗刘娟朱兆荣郭志兴
关键词：A型魏氏梭菌Α毒素
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