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COS细胞中表达白细胞介素-Ⅱ
2007年
为了进一步证实IL-2的存在,我们对IL-2真核表达载体进行了pC-IL-2双酶切鉴定。采用DEAE-Dextran介导的方法,用IL-2真核表达载体pC-IL-2转染COS细胞进行暂态表达。经放射免疫测定了转染细胞上清中IL-2表达量为46.05ng/m l。采用依赖IL-2的CTLL-2细胞作为靶细胞的MTT法测定了IL-2表达产物的活性为86 IU/m l。
周台英张鹤龄王秀梅博晓真郭荧高凯
关键词:COS细胞IL-2表达放免分析
骨多形性蛋白2cDNA在COS细胞和B16F1细胞中的表达差异
2006年
目的研究骨多形性蛋白2cDNA(BMP2cDNA)转染入COS细胞和B16F1细胞中的表达差异。方法BMP-2cDNA克隆在AD1-1载体中巨细胞病毒的早期启动子下游,构建了表达质粒BMP-2/AD1-1。采用脂质体法将表达质粒分别转染入COS细胞和B16F1细胞中。72 h后,分别取100μL培养上清进行Western印迹,检测所表达的BMP-2蛋白。结果Western印迹结果显示:BMP-2/Ad1-1转染的COS细胞上清液中有2条BMP-2特异表达带,大小约为39 kD和36 kD;BMP2/Ad1-1转染B16F1细胞上清液中有1条特异表达带,大小约为15 kD。结论BMP-2cDNA在COS细胞和B16F1细胞中表达产物的种类与大小均有差异。
刘金辉Glenn Larsen
关键词:基因表达基因转染
二种不同病毒基因表达调节元件对骨多形性蛋白12基因在COS细胞中的表达影响
2005年
目的 比较巨细胞病毒的早期启动子和腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列 (IVS)组合对BMP12在COS细胞中表达的影响。方法 BMP12cDNA分别克隆在pED载体中的腺病毒主要晚期 启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列(IVS)组合下游,构建了表达质粒BMP12/pED。及克隆在AD1- 1载体中巨细胞病毒的早期启动子下游,构建了表达质粒BMP12/AD1 1。采用脂质体法将二个表达质粒分别转 染入COS细胞。40h及60h后,分别取100μl培养上清进行Western印迹,检测所表达的BMP12蛋白。结果  Western印迹结果显示:转染40hr后,只在BMP12/pED转染的COS细胞培养液检测出2个BMP12特异表达产 物,大小约为50kD和44kD(较弱)。转染60h后,BMP12/Ad1 1转染的COS细胞培养液有3个BMP12特异表达 产物,大小约为:50kD、40kD、15kD;BMP12/pED转染细胞培养液有4个BMP12特异表达产物,大小约为:50kD、 48kD、44kD、15kD。结论 腺病毒主要晚期启动子(MPL)、三联前导序列(TPL)和插入序列(IVS)组合的基因表 达调节元件驱动的BMP12表达量高于巨细胞病毒的早期启动子;二种病毒基因表达调节元件驱动的BMP12表达 产物的种类与大小均有差异。
刘金辉Glenn Larsen
关键词:巨细胞病毒
ZNF230/荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在Cos细胞中的表达与定位被引量:4
2004年
为了用绿色荧光蛋白标记观察人类无精症相关基因ZNF230在Cos7细胞中的蛋白质表达及定位,用PCR方法扩增得到突变的人和小鼠mt ZNF230和mt znf230基因,使其3′端的终止密码TGA突变为TGG,并装入T 载体,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP N1的绿色荧光蛋白(greenfluorescenceprotein,GFP)基因融合,构建了ZNF230—荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入Cos7细胞系。荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP N1转染的Cos细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP ZNF230和pEGFP znf230的Cos细胞中荧光主要聚集在细胞核中。表明转染的Cos细胞系能高效表达人ZNF230和小鼠znf230蛋白,ZNF230基因表达的蛋白定位于细胞核内。
许文明张思仲邱为民何国平刘运强马用信孙岩
关键词:绿色荧光蛋白COS细胞
大鼠促黄体素基因β亚基的克隆和在COS细胞中的表达被引量:3
2003年
从摘除卵巢的雌性大鼠脑垂体中提取总RBA,利用RT-PCR技术扩增了促黄体素(LH)的亚基基因。序列分析表明该基因序列与国外报道的促黄体素(LH)的亚基基因序列完全相同。将该基因片段插入到真核表达载体pcDNA3.1(-)上,构建表达质粒pcDNA3.1(-)/LH,利用脂质体包裹技术转染COS细胞,放免检测结果显示LH的表达量达6.2 miu/ml。
沈琪汪兴生沈子龙吴国球
关键词:促黄体素基因克隆基因表达
生长抑素DNA疫苗在COS细胞中的瞬时表达被引量:6
2002年
构建了生长抑素DNA疫苗质粒 pCHSS(pCDNA/HBsAg/SS) ,并在COS细胞中的获得较高水平的瞬时表达 ,用HBsAgElisa检测试剂盒跟踪发现 ,约有 2 7%的融合蛋白分泌到细胞外 ,说明SS的插入没有影响HBsAg的免疫反应性和分泌表达。免疫电镜观察 ,HBsAg可以组装成 2 2nm~ 30nm的颗粒 ,说明SS的插入没有影响HBsAg的组装 ,该实验为动物实验打下基础。
孙迎基汪兴生张新元沈子龙
关键词:生长抑素DNA疫苗COS细胞
促黄体素基因的克隆及其在COS细胞中的表达
促黄体素(LH)是下丘脑前叶分泌的一种糖蛋白激素,也称为ICSH.在哺乳动物中,糖蛋白激素的α亚基完全相同.相反,β-亚基有不同的密码子编码并表现不同的生物活性.我们的最终目的是将LH制成核酸疫苗,使人体内产生抗LH抗体...
沈琪
关键词:促黄体素前列腺增生核酸疫苗真核表达表达活性
文献传递
狂犬病病毒3aG株核蛋白基因cDNA的克隆、序列分析及在COS细胞中的暂态表达被引量:3
1999年
从狂犬病病毒 3a G 株感染的 B H K 细胞裂解上清液中快速提取病毒 R N A,用 R T P C R 得到编码核蛋白完整结构基因的 c D N A。进一步将此基因克隆入 p U C 18中,进行核苷酸序列分析,并与国外狂犬病病毒 P V、 C V S、 S A D B1 9 株以及国内另一狂犬病病毒 5a G 株的 N 基因序列进行了同源性比较。然后将 N 基因正向插入真核表达质粒中,转染 C O S7 细胞,用免疫组化方法证明所克隆基因可在细胞中正确表达出 N 蛋白。
李伟张新梅张曼夫王树惠
关键词:狂犬病病毒核蛋白基因RT-PCRCDNA免疫组化
hBMP-2cDNA在COS细胞和小鼠肌肉中的表达被引量:5
1995年
研究了骨形态发生蛋白BMP-2cDNA在COS细胞和小鼠肌肉中的表达的情况,从pSPS65BMP-2质粒中回收BMP-2cDNA,删除5'端的非翻译序列,插入pSVL载体中,构建了含有BMP-2全长编码序列的重组表达质粒pSVLBMP-2。将表达质粒导入COS-7细胞中,细胞RNA点杂交结果表明,转染BMP-2基因的细胞内BMP-2的mRNA水平明显升高;细胞培养上清的ELISA显示,转染BMP-2cDNA后,细胞分泌产生的BMP-2显著增加。小鼠实验发现,在肌肉内用注射法导入BMP-2重组质粒后,局部组织内BMP-2的mRNA转录水平也明显提高。
赵明王会信刘莉周廷冲
关键词:骨形态发生蛋白CDNA基因表达COS细胞肌肉
中性胆固醇酯水解酶活性在COS细胞中高度表达
1993年
将激素敏感酯酶(HSL)基因转染至COS细胞株后,使得HSL的mRNA和中性胆固醇酯酶(CEH)活性得到高度表达。CEH活性随重组质粒DNA量的增加而增高,对其进行了动力学分析,并对CEH活性的检测方法进行了探讨。
刘国庆蔡海江范乐明陈秀英
关键词:基因表达胆固醇脂CEH

相关作者

沈子龙
作品数:126被引量:642H指数:13
供职机构:中国药科大学
研究主题:瑞替普酶 纯化 大肠杆菌 药代动力学 透皮吸收
沈琪
作品数:4被引量:10H指数:2
供职机构:中国药科大学生物技术研究中心
研究主题:COS细胞 促黄体素 前列腺增生 疫苗 抗体
汪兴生
作品数:46被引量:236H指数:9
供职机构:安徽中医学院中西医结合临床学院
研究主题:中草药 良性前列腺增生 褪黑激素 绿益康 生殖内分泌
吴国球
作品数:133被引量:224H指数:7
供职机构:东南大学
研究主题:结缔组织生长因子 核酸 DNA探针 地高辛 抗菌肽
刘金辉
作品数:61被引量:173H指数:8
供职机构:南昌大学基础医学院
研究主题:乙型肝炎病毒 烟曲霉菌 小鼠 侵袭性肺曲霉病 生物信息学